酶促化學偶聯(lián)構(gòu)建膽固醇-g-聚胺酯載體介導p53基因遞送的研究
發(fā)布時間：2020-12-09 20:47
在世界范圍內(nèi),各國的腫瘤發(fā)病率和死亡率都呈現(xiàn)逐年上升的趨勢,使之成為威脅人類健康和亟待解決的惡性疾病。近年來,在腫瘤疾病的研究中,利用基因載體來遞送特殊基因并促進所需治療性蛋白質(zhì)表達的方法,成為人們關(guān)注的焦點,有望為未來腫瘤治療提供新的安全有效的技術(shù)手段�；谏鲜隹紤],在本論文中首先將N-甲基二乙醇胺,癸二酸二乙酯和ω-十五內(nèi)酯通過脂肪酶催化聚合成陽離子聚胺酯,然后利用季銨化反應將疏水性N-（2-溴乙基）氨基甲�；懝檀冀又Φ狡渲麈溕�,制備出新型兩親共聚物Chol-g-PMSC-PPDL。該載體材料能夠與DNA進行良好的組裝,形成穩(wěn)定的納米復合物,同時由于疏水性片段的引入,該載體表現(xiàn)出利于細胞攝取的特性并且有效地促進p53質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染。我們以宮頸癌HeLa細胞（p53野生型）、人前列腺癌PC-3細胞（p53缺失型）為細胞模型,系統(tǒng)評價該載體介導p53基因遞送、誘導腫瘤細胞增殖、遷移及浸潤的效果與分子機制。遞送48小時后,由于p53蛋白的大量表達,兩種細胞系均產(chǎn)生明顯的增殖抑制現(xiàn)象。同時,該納米載體復合物（Chol-g-PMSC-PPDL/p53）能夠通過外源基因的表達,增強HeLa細胞和...
【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：81 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
miRNA的作用機制siRNA：是一組長度為20-25個核苷酸的雙鏈RNA，與mRNA作用機制類似，通過體外合成的siRNA進入細胞后與靶mRNA互補配對，使靶基因降解
圖 1.2 siRNA 的作用機制1.2.2.3 核酶核酶是一種生物催化劑，是具有催化功能的 RNA 分子，它能夠通過識別特定的序列來降解 mRNA。它們通過堿基互補配對原則特異性識別 mRNA，催化靶位點 mRNA 鏈中的磷酸二酯鍵斷裂，選擇性地剪切 mRNA 分子，從而阻斷靶基因的表達。近幾年，人們又合成了一些具有催化活性的 DNA，稱作脫氧核酶。與原有的 RNA 核酶相比，這種雙鏈的脫氧核酶更穩(wěn)定，不易被 RNA 酶降解，同時它也更容易合成和修飾，產(chǎn)生的多種類似物能夠更好的應用到基因治療中[3]。1.2.3 p53 基因
圖 1.3 p53 凋亡信號通路P53 蛋白為 p53 基因編碼的產(chǎn)物，它的 N 端為酸性區(qū)，還有 1-80 位氨基酸殘基，C 端為堿性區(qū)，含有 319-393 位氨基酸殘基，正常的 p53 蛋白在細胞中易水解，半衰期為 20 分鐘，突變的 p53 蛋白半衰期為 1.4-7 小時不等。研究顯示，p53 蛋白能夠改變線粒體途徑中的 DNA 修復蛋白和促凋亡蛋白從而影響細胞的生長和凋亡等過程[8]，同時它還控制著細胞周期的啟動。在健康的細胞中，若細胞受損又無法修復，則會向 p53 蛋白發(fā)送信號，p53 蛋白啟動凋亡過程，使細胞通過凋亡途徑死去；若 p53 蛋白缺失或有缺陷，喪失了原有的功能，則無法控制細胞，使其繼續(xù)分裂，導致腫瘤的發(fā)生。2007 年，美國生物技術(shù)公司 Introgen 研發(fā)的 p53 基因藥 Advexin 問世。Advexin 是以非整合性和非復制性腺病毒為載體遞送 p53 基因，該藥物主要針對難治性頭頸部腫瘤的治療。頭頸部實體腫瘤多為 p53 表達缺陷型腫瘤，通過腺病毒的遞送使癌癥細胞內(nèi) p53 蛋白表達恢復到正常水平，抑制腫瘤生長達到治療目
【參考文獻】：
博士論文
[1]中國慢性病前瞻性研究隊列惡性腫瘤發(fā)病與死亡分析[D]. 潘睿.南京醫(yī)科大學 2017
[2]新型PEI衍生物材料的合成及在腫瘤基因遞送中的應用研究[D]. 王艷波.吉林大學 2014
本文編號：2907450
【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：81 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
miRNA的作用機制siRNA：是一組長度為20-25個核苷酸的雙鏈RNA，與mRNA作用機制類似，通過體外合成的siRNA進入細胞后與靶mRNA互補配對，使靶基因降解
圖 1.2 siRNA 的作用機制1.2.2.3 核酶核酶是一種生物催化劑，是具有催化功能的 RNA 分子，它能夠通過識別特定的序列來降解 mRNA。它們通過堿基互補配對原則特異性識別 mRNA，催化靶位點 mRNA 鏈中的磷酸二酯鍵斷裂，選擇性地剪切 mRNA 分子，從而阻斷靶基因的表達。近幾年，人們又合成了一些具有催化活性的 DNA，稱作脫氧核酶。與原有的 RNA 核酶相比，這種雙鏈的脫氧核酶更穩(wěn)定，不易被 RNA 酶降解，同時它也更容易合成和修飾，產(chǎn)生的多種類似物能夠更好的應用到基因治療中[3]。1.2.3 p53 基因
圖 1.3 p53 凋亡信號通路P53 蛋白為 p53 基因編碼的產(chǎn)物，它的 N 端為酸性區(qū)，還有 1-80 位氨基酸殘基，C 端為堿性區(qū)，含有 319-393 位氨基酸殘基，正常的 p53 蛋白在細胞中易水解，半衰期為 20 分鐘，突變的 p53 蛋白半衰期為 1.4-7 小時不等。研究顯示，p53 蛋白能夠改變線粒體途徑中的 DNA 修復蛋白和促凋亡蛋白從而影響細胞的生長和凋亡等過程[8]，同時它還控制著細胞周期的啟動。在健康的細胞中，若細胞受損又無法修復，則會向 p53 蛋白發(fā)送信號，p53 蛋白啟動凋亡過程，使細胞通過凋亡途徑死去；若 p53 蛋白缺失或有缺陷，喪失了原有的功能，則無法控制細胞，使其繼續(xù)分裂，導致腫瘤的發(fā)生。2007 年，美國生物技術(shù)公司 Introgen 研發(fā)的 p53 基因藥 Advexin 問世。Advexin 是以非整合性和非復制性腺病毒為載體遞送 p53 基因，該藥物主要針對難治性頭頸部腫瘤的治療。頭頸部實體腫瘤多為 p53 表達缺陷型腫瘤，通過腺病毒的遞送使癌癥細胞內(nèi) p53 蛋白表達恢復到正常水平，抑制腫瘤生長達到治療目
【參考文獻】：
博士論文
[1]中國慢性病前瞻性研究隊列惡性腫瘤發(fā)病與死亡分析[D]. 潘睿.南京醫(yī)科大學 2017
[2]新型PEI衍生物材料的合成及在腫瘤基因遞送中的應用研究[D]. 王艷波.吉林大學 2014
本文編號：2907450
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