發(fā)布時間：2025-02-10 18:49

　　基因治療已經(jīng)開始應用于獲得性或者是原發(fā)性疾病的診斷治療中�；�因轉染是關鍵步驟,而轉染載體的研究成為研究的熱點。本文采用生物玻璃和雙親性殼聚糖的復合物作為研究對象,來探究其在基因轉染的作用及其機理。本文制備出生物玻璃,其粒徑通過SEM和Zeta電位儀測得在100-150 nm范圍內,通過TEM觀察形貌,其類似于海膽形狀,內部具有豐富的納米孔徑結構。另外,對單純的殼聚糖進行修飾使得其在水溶液中的溶解性能提高。通過在殼聚糖的側鏈位置引入親水性鏈段mPEG和疏水鏈段PCL,使得其成為雙親性殼聚糖。通過UV表征,雙親性殼聚糖顯示出了特有的峰位,測得CMC值;通過GPC測得雙親性殼聚糖的數(shù)均分子量和重均分子量;通過FT-IR和NMR對其化學結構進行了表征,結果顯示成功接枝上兩鏈段。通過基因重組技術,成功構建了重組質粒-成骨生長肽質粒pOGP。該質粒能夠表達成骨生長肽和綠色熒光蛋白。其質粒上還含有啟動子,終止子,抗抗生素(Kana霉素)序列等。質粒的構建載體為PAcGFP1-N1,大小在4726 bp。將生物玻璃和雙親性殼聚糖以合適的比例與pOGP質粒復合,然后深入研究轉染及其機理。首先,研究了生物玻...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1基因治療的流程

圖1-1基因治療的流程Fig.1-1Theprocessofgenetherapy腺病毒及慢病毒等，這類載體一般轉染效率較高，但是存在著生NA有可能整合到宿主細胞內，生物潛在毒性較大[18-22]。另一類載體有脂質體、殼聚糖、聚乙烯亞胺、二氧化硅、鈣磷體系等低免....

圖1-2殼聚糖的轉染路徑Fig.1-2Thetransfectionpathwayofchitosan

第一章緒論達細胞膜時，刺激膜外蛋白，內陷形成囊泡，將脂質體包裹進入細胞內部，在細胞內部由于脂質體與內吞膜上的磷脂發(fā)生作用，囊泡溶解，遺傳物質釋放從而有機會進入細胞核實現(xiàn)轉染。陽離子脂質體在進入血液后，尤其是遇見血清后，容易團聚，或是被降解。所以一般要對脂質體進行修飾，提高在體內....

圖1-3碳納米管轉染各類遺傳物質Fig.1-3Thegenetransfectionofcarbonnanotubes

殼聚糖是一類常見的轉染載體（圖1-2），而殼寡糖是殼聚糖部分降解的產(chǎn)物[31-34]，是分子量較小的物質。殼聚糖由于存在大量的氨基，所以成為潛在的轉染載體但是同時它也存在大量的羥基基團。這些基團使得分子間氫鍵作用增加，水溶性大大降低，從而影響了轉染性能。在酸性溶液中，殼聚糖的質....

圖1-4熔融法生物玻璃45S5Fig.1-4ThetraditionalBioactiveglass45S5

現(xiàn)磷酸鈣具有轉染進入KB細胞的能力。現(xiàn)在研究者趨向于研究尺寸可控染DNA的能力。如將聚乙二醇-聚天冬氨酸共聚物與磷酸鈣復合形成納米徑可控，轉染效率較高，細胞毒性較低的優(yōu)點。的納米金適用范圍較廣泛。用于cRNA，mRNA,DNA的轉染實驗中。Schm55作為較為理想....

本文編號：4032915