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早期液體復蘇治療對嚴重膿毒癥大鼠腸道微生態(tài)的影響研究

發(fā)布時間:2025-06-04 03:43
  目的:探討研究早期液體復蘇治療及早期液體復蘇聯(lián)合免疫調(diào)節(jié)治療對嚴重膿毒癥大鼠腸道微生態(tài)的影響,揭示早期液體復蘇治療及早期液體復蘇聯(lián)合免疫調(diào)節(jié)治療對嚴重膿毒癥的療效機理,以及對嚴重膿毒癥大鼠腸道微生態(tài)影響的機制,為闡明嚴重膿毒癥的發(fā)生發(fā)展機制提供理論依據(jù),為探索嚴重膿毒癥治療方案的優(yōu)化奠定基礎。方法:隨機將80只(200-250g)SD雄性大鼠分成5組:假手術組(Sham),嚴重膿毒癥組(CLP),液體復蘇組(NS),環(huán)磷酰胺組(CTX),液體復蘇聯(lián)合環(huán)磷酰胺組(NS+CTX)。采用盲腸結扎穿孔術(Cecal ligation and puncture,[CLP])復制嚴重膿毒癥模型,假手術組給予同樣的手術操作,但不進行穿孔及結扎。判斷及鑒定嚴重膿毒癥模型復制成功后,通過腹腔注射生理鹽水(30ml/kg)及環(huán)磷酰胺(10mg/kg)干預治療。記錄各組大鼠存活時間及數(shù)量并繪制生存曲線,定量分析各組大鼠生存率。通過熒光示蹤法檢測各組大鼠門靜脈血中FD-70濃度,定量分析各組大鼠腸道通透性。通過各組大鼠空腸組織切片HE染色,觀察各組大鼠腸道組織損傷程度及炎性浸潤情況;并利用TUNEL法,定性及定...

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
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前言
    1.膿毒癥治療研究現(xiàn)狀及進展
    2.腸道微生態(tài)
    3.腸道微生態(tài)與膿毒癥的發(fā)生發(fā)展機制
材料與方法
    1. 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要購買的試劑及公司
        1.3 主要儀器設備、耗材及公司
        1.4 外科手術器械
        1.5 主要配制的試劑
    2. 方法
        2.1 嚴重膿毒癥大鼠模型的復制、鑒定、實驗分組及生存率計算
            2.1.1 實驗動物分組
            2.1.2 術前準備
            2.1.3 模型制備
            2.1.4 模型鑒定
            2.1.5 膿毒癥大鼠干預藥物注射
        2.2 血液及組織標本的獲取
            2.2.1 組織蠟塊包埋
            2.2.2 檢測動脈血氣
        2.3 大鼠血清炎癥因子檢測
            2.3.1 準備試劑
            2.3.2 檢測程序
            2.3.3 結果計算與判斷
        2.4 組織蛋白的提取
        2.5 利用Western Blot技術檢測腸道組織Occludin的表達
            2.5.1SDS-PAGE電泳
            2.5.2 轉膜
            2.5.3 免疫反應
            2.5.4 圖像分析
        2.6 腸道組織病理切片
        2.7 TUNEL檢測腸上皮細胞凋亡(TUNEL凋亡檢測試劑盒)
        2.8 腸道通透性測定
        2.9 實驗結果整理分析,數(shù)據(jù)采集與統(tǒng)計學分析
    3.技術路線
結果
    3.1 大鼠基本情況
    3.2 大鼠七天生存分析情況
    3.3 各組大鼠緊密連接蛋白表達情況
    3.4 早期液體復蘇和環(huán)磷酰胺對嚴重膿毒癥后腸上皮細胞凋亡的影響
    3.5 各組大鼠腸組織病理學檢測
    3.6 各組大鼠炎癥因子TNF - a、IL - 6、IL - 10 的表達水平
    3.7 各組大鼠腸壁通透性檢測
    3.8 各組大鼠腸絨毛膜長度改變
    3.9 各組大鼠動脈血氣分析情況
討論
結論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
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