發(fā)布時間：2020-11-14 13:04

　　 舞毒蛾(Lymantria dispar L.)是一種葉食害蟲,具有寄主種類多、分布廣、危害大的特征。舞毒蛾核型多角體病毒(L.dispar nucleopolyhedrosivirus,簡稱LdNPV)是一種可以影響舞毒蛾種群數(shù)量的致病微生物。合適的熒光增白劑可以提高LdNPV對舞毒蛾幼蟲的毒力,達到利用病毒防治舞毒蛾蟲害的目的,為此室內(nèi)用正交實驗方法比較不同濃度的熒光增白劑和氯化鋅對核型多角體病毒的增效作用,篩選出最佳配比,得到了復配劑;通過生物測定確定了復配劑對舞毒蛾的LC_50和LT_50,同時分析了復配劑對舞毒蛾的亞致死作用。為研究這種增效作用的原理,實驗測定了復配劑各成分對舞毒蛾4齡幼蟲血淋巴和中腸谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶比活性的影響關系。研究結果如下:1.病毒中添加1%的熒光增白劑和0.1%的氯化鋅,紫外照射6h后,對舞毒蛾的死亡率比正常人工飼料的情況提高3倍,舞毒蛾幼蟲的死亡率是67.7%。說明這種配比可以顯著提高LdNPV對舞毒蛾幼蟲的致死作用。2.舞毒蛾幼蟲取食添加1%熒光增白劑VBL與0.1%氯化鋅(ZnCl_2)的LdNPV后,病毒濃度與致死作用呈正相關,病毒濃度越高,致死率越高。對舞毒蛾2齡幼蟲致死中濃度(LC_(50))為106.4 0Bs/μL,LC_90為6457.4 0Bs/μL,濃度為390Bs/μL時,致死中時間LT_50為13.12d,濃度為3900Bs/μL時,LT_(50)為9.37 d。3.加入熒光增白劑VBL和氯化鋅(ZnCl_2)的LdNPV對舞毒蛾幼蟲有亞致死作用。雄性幼蟲歷期較對照縮短,不同病毒濃度下雄性幼蟲歷期較對照的縮短2-5d。隨病毒濃度的升高,復配劑使舞毒蛾雌雄化蛹率、羽化率、產(chǎn)卵數(shù)量、卵塊重量減少,且濃度越高,減少的越明顯。取食未添加熒光增白劑和氯化鋅的人工飼料的舞毒蛾與已被病毒感染的舞毒蛾單雌產(chǎn)卵量差異明顯,比對照顯著降低。4.VBL+ZnCl_2+病毒復配劑和ZnCl_2+病毒對舞毒蛾4齡幼蟲的中腸、血淋巴GST酶活性有顯著差異,比對照組(單獨病毒)的酶活性增高,在第72h時表現(xiàn)為活性增加最大,達到顯著差異。VBL+ZnCl_2+病毒對舞毒蛾幼蟲血淋巴GST的影響在第72h時表現(xiàn)為活性增加,24h時的血淋巴GST活性也顯著增加,分別比單獨病毒的增高3.7和7.2倍。VBL+ZnCl_2+病毒復配劑對舞毒蛾幼蟲中腸GST的影響在第48h和72h時表現(xiàn)為活性增加,與24h時的中腸GST顯著差異,分別增高2.4和4.6倍。
【學位單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S433.4
【文章目錄】：
摘要
abstract
1.引言
    1.1 舞毒蛾相關生物學
        1.1.1 危害與分布
        1.1.2 生活史
        1.1.3 舞毒蛾天敵及制約能力
        1.1.4 舞毒蛾的防治
        1.1.5 物理防治
        1.1.6 化學藥劑防治
        1.1.7 生物防治
            1.1.7.1 蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis, Bt）
            1.1.7.2 舞毒蛾核型多角體病毒
            1.1.7.3 關于熒光增白劑VBL分析
    1.2 VBL增效作用研究進展
        1.2.1 中國的舞毒蛾病毒研究
        1.2.2 國內(nèi)外熒光增白劑研究
            1.2.2.1 國外熒光增白劑研究
            1.2.2.2 中國熒光增白劑研究現(xiàn)狀
        1.2.3 國內(nèi)外舞毒蛾幼蟲谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶研究現(xiàn)狀
            1.2.3.1 國外舞毒蛾幼蟲谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶研究現(xiàn)狀
            1.2.3.2 在中國舞毒蛾幼蟲谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶研究現(xiàn)狀
    1.3 研究意義及研究內(nèi)容過程
        1.3.1 研究目的及意義
        1.3.2 研究內(nèi)容
        1.3.3 技術路線
2.材料與方法
    2.1 供試材料
    2.2 舞毒蛾幼蟲飼養(yǎng)方法
        2.2.1 卵面的消毒
        2.2.2 人工飼料的制作
        2.2.3 幼蟲飼養(yǎng)
        2.2.4 供試幼蟲的選取與病毒的飼喂
    2.3 LdNPV的分離題純
    2.4 熒光素VBL對于舞毒蛾核型多角體病毒毒力的影響分析
        2.4.1 幼蟲的飼養(yǎng)及前期處理
        2.4.2 VBL的增效作用測定
            2.4.2.1 生物測定
            2.4.2.2 數(shù)據(jù)的處理
        2.4.3 實驗的計劃（VBL濃度篩選）
            2.4.3.1 確定VBL最佳濃度研究辦法
            2.4.3.2 VBL的抗紫外線作用的研究計劃
        2.4.4 數(shù)據(jù)的處理
    2.5 舞毒蛾核型多角體病毒的最佳復配劑對舞毒蛾幼蟲亞致死的影響
        2.5.1 幼蟲的飼養(yǎng)及前期處理
        2.5.2 最佳復配劑不同濃度的病毒溶液的配制
        2.5.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分祈
    2.6 熒光素及舞毒蛾核型多角體病毒對舞毒蛾酶活的影響
        2.6.1 幼蟲飼養(yǎng)及前期處理
        2.6.2 酶液提取
        2.6.3 實驗液的配置
        2.6.4 谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶 GlututhioneS-transferases 活性測定
        2.6.5 蛋白質(zhì)含量測定
        2.6.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
3.結果與分析
    3.1 熒光素VBL對舞毒蛾核型多角體病毒的毒力的影響分析
        3.1.1 篩選獲得LdNPV的最佳復配劑
        3.1.2 LdNPV的不同復配劑對舞毒蛾幼蟲發(fā)育影響
        3.1.3 小結
    3.2 舞毒蛾核型多角體病的復配劑對舞毒蛾幼蟲的致病力
        3.2.1 最佳病毒復配劑對舞毒蛾二齡幼蟲的死亡率的分析
50 '>        3.2.2 最佳病毒復配劑對舞毒蛾二齡幼蟲的致死中濃度LC50

        3.2.3 不同濃度LdNPV舞毒蛾幼蟲的致死中時間 LT₅₀

        3.2.4 小結
2和不同濃度LdNPV感染的人工飼料后對舞毒蛾幼蟲發(fā)育歷期的影響 '>    3.3 舞毒蛾幼蟲取食 VBL、ZnCl₂和不同濃度LdNPV感染的人工飼料后對舞毒蛾幼蟲發(fā)育歷期的影響
2和不同濃度LdNPV感染的人工飼料對舞毒蛾雄幼蟲發(fā)育歷期的影響 '>        3.3.1 舞毒蛾幼蟲取食 VBL、ZnCl₂和不同濃度LdNPV感染的人工飼料對舞毒蛾雄幼蟲發(fā)育歷期的影響
2和不同濃度LdNPV感染的人工飼料對舞毒蛾?幼蟲發(fā)育歷期影響 '>        3.3.2 舞毒蛾幼蟲取食 VBL、ZnCl₂和不同濃度LdNPV感染的人工飼料對舞毒蛾?幼蟲發(fā)育歷期影響
        3.3.3 最佳病毒復配劑對舞毒蛾蛹的影響
2和不同濃度病毒對舞毒蛾的產(chǎn)卵量及性比的影響 '>        3.3.4 VBL、ZnCl₂和不同濃度病毒對舞毒蛾的產(chǎn)卵量及性比的影響
        3.3.5 小結
    3.4 舞毒蛾核型多角體病毒復配劑及其組分對舞毒蛾4齡幼蟲酶的影響
        3.4.1 血淋巴的谷胱肽S轉(zhuǎn)移酶
            3.4.1.1 不同成分對舞毒蛾幼蟲血淋巴GST的比較
            3.4.1.2 小結
        3.4.2 中腸的谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶
            3.4.2.1 不同成分對舞毒蛾幼蟲中腸GST比較
            3.4.2.2 小結
4.結論與討論
    4.1 結論
    4.2 討論
    4.3 論文的創(chuàng)新點
致謝
參考文獻
附錄
作者簡介

【參考文獻】

相關碩士學位論文 前1條

1 黃琳瑞;甜菜夜蛾對蟲酰肼抗藥性選育和抗藥性機理初探[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2005年

本文編號：2883503

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