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小黑楊PnAlaAT基因的克隆及遺傳轉化

發(fā)布時間:2024-05-18 02:28
  小黑楊(Populus simonii ×Populus nigra)是楊柳科楊屬喬木,具有抗旱、耐寒、耐瘠薄等優(yōu)良性狀,是北方推廣的造林樹種。丙氨酸氨基轉移酶(Alanine Aminotransferase,AlaAT)是一種磷酸吡哆醛依賴性的轉移酶,在植物碳氮代謝平衡中起關鍵性作用。本研究利用生物信息學方法,在楊樹基因組數(shù)據(jù)庫中鑒定了谷丙轉氨酶基因家族的4個同源基因。以小黑楊為試材克隆了PnAlaAT1-4基因,并且對獲得的cDNA的核苷酸序列、編碼蛋白的氨基酸序列進行了生物信息學分析。同時,利用實時定量PCR方法鑒定了PnAlaATs基因的組織表達特異性及其在不同氮素條件、日節(jié)律及光照等條件下的表達模式。構建pROK Ⅱ-PnAlaAT3植物表達載體后通過農(nóng)桿菌介導法遺傳轉化小黑楊,獲得了 17個轉基因株系。主要研究結果如下:(1)利用生物信息學方法,在毛果楊基因組數(shù)據(jù)庫中鑒定了 AlaAT基因家族的4個成員。系統(tǒng)進化樹分析表明,該家族含有2個亞家族,PtAlaAT3和PtAlaAT4屬于亞家族A,編碼谷丙轉氨酶;PtAlaAT1和PtAlaAT2屬于亞家族B,編碼谷氨酸:乙醛...

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1植物對氮素的吸收和同化??NR:硝酸還原酶;GOGAT:谷氨酰胺合成酶;glutamate:谷氨酰胺;glutamine:谷氨酸鹽

圖1-1植物對氮素的吸收和同化??NR:硝酸還原酶;GOGAT:谷氨酰胺合成酶;glutamate:谷氨酰胺;glutamine:谷氨酸鹽

?1緒論???1緒論??1.1植物氮素代謝過程??氮素是植物從土壤中吸收量最多的元素,是植物生長發(fā)育過程中必需的大量元素。??氮素的吸收與利用效率直接影響著植物的生長與發(fā)育。??可以被植物從外界吸收和利用的氮素形式主要是銨態(tài)氮、硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮、單質??態(tài)氮及一些可溶性有機含氮化....


圖2-2毛果楊基因的結構??

圖2-2毛果楊基因的結構??

?東北林業(yè)人學碩_丨:學位論文???2.3.3楊樹乃基因的結構分析??通過GSDS在線軟件繪制毛果楊基因的結構圖,結果如圖2-2所示,亞家??族A中的PMW77和基因具有相似的基因結構,都含有13個外顯子,均為??第3至最后一個外顯子編碼了保守結構域。亞家族B中的尸M/adri和....


圖2-3毛果楊PM/d7:v基因啟動子的順式作用元件示意圖??注:ABA?element,脫落酸應答兀件;Light?element,光應答元件;MeJA?element,茉莉酸應答元??

圖2-3毛果楊PM/d7:v基因啟動子的順式作用元件示意圖??注:ABA?element,脫落酸應答兀件;Light?element,光應答元件;MeJA?element,茉莉酸應答元??

?東北林業(yè)人學碩_丨:學位論文???2.3.3楊樹乃基因的結構分析??通過GSDS在線軟件繪制毛果楊基因的結構圖,結果如圖2-2所示,亞家??族A中的PMW77和基因具有相似的基因結構,都含有13個外顯子,均為??第3至最后一個外顯子編碼了保守結構域。亞家族B中的尸M/adri和....


圖3-1小黑楊取材與氮素處理設計模式圖??(3)光和黑暗處理:培養(yǎng)方式如(1),小黑楊株高近30?cm時,進行光照和黑暗??處理,每三棵苗一組

圖3-1小黑楊取材與氮素處理設計模式圖??(3)光和黑暗處理:培養(yǎng)方式如(1),小黑楊株高近30?cm時,進行光照和黑暗??處理,每三棵苗一組

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本文編號:3976320

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