發(fā)布時(shí)間：2025-02-06 17:15

　　ERF蛋白是AP2/EREBP轉(zhuǎn)錄因子家族的一大成員,在植物面對(duì)逆境脅迫中起重要調(diào)控作用。但目前對(duì)ERF基因在逆境中的功能研究尚不完全清晰,因此,研究檉柳ERF基因響應(yīng)高鹽和干旱脅迫的機(jī)理具有重要意義。首先,優(yōu)化了瞬時(shí)轉(zhuǎn)化體系,侵染液最佳組合為吐溫0.05%(v/v)、乙酰丁香酮120 μmol/L和菌液OD600值1.0,該條件下轉(zhuǎn)化基因的表達(dá)量最高。然后利用優(yōu)化的轉(zhuǎn)化體系,將檉柳不同ERF基因在煙草中瞬時(shí)過表達(dá),并經(jīng)鹽、旱脅迫處理,通過抗逆生理學(xué)分析,篩選出了抗逆能力強(qiáng)的檉柳基因ThERF4作為進(jìn)一步研究的對(duì)象。進(jìn)一步將ThERF4基因瞬時(shí)轉(zhuǎn)化檉柳,獲得瞬時(shí)過表達(dá)及抑制表達(dá)的轉(zhuǎn)基因檉柳,分別在鹽、旱脅迫下進(jìn)行生理生化指標(biāo)的測(cè)定。DAB、NBT、伊文斯藍(lán)的染色顯示ThERF4基因具有良好的抗逆能力,其過表達(dá)能夠減少逆境脅迫下ROS的積累及細(xì)胞膜的損傷,而ThERF4的抑制表達(dá)正好相反。進(jìn)一步的生理指標(biāo)實(shí)驗(yàn)顯示ThERF4能夠調(diào)控脯氨酸、SOD、POD、可溶性糖的含量,并減少脅迫下相對(duì)電導(dǎo)率、H202含量、MDA含量、失水率。說明ThERF4能夠通過調(diào)控SOD、POD活性減少ROS積累,...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１不同農(nóng)桿菌濃度對(duì)轉(zhuǎn)化效率的影響??

?東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文???板ｌｓ，共４５個(gè)循環(huán)。??２．３結(jié)果與分析??２．３．１不同農(nóng)桿菌濃度對(duì)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化效率的影響??農(nóng)桿菌濃度及侵染時(shí)間是影響遺傳轉(zhuǎn)化率的重要因子。因此，用不同的農(nóng)桿菌侵染??濃度，通過ＧＵＳ染色和ｑＲＴ－ＰＣＲ來研究轉(zhuǎn)化的ＧＵＳ基因的表達(dá)情況。如圖２－....

圖２－１不同農(nóng)桿菌濃度對(duì)轉(zhuǎn)化效率的影響??

?東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文???板ｌｓ，共４５個(gè)循環(huán)。??２．３結(jié)果與分析??２．３．１不同農(nóng)桿菌濃度對(duì)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化效率的影響??農(nóng)桿菌濃度及侵染時(shí)間是影響遺傳轉(zhuǎn)化率的重要因子。因此，用不同的農(nóng)桿菌侵染??濃度，通過ＧＵＳ染色和ｑＲＴ－ＰＣＲ來研究轉(zhuǎn)化的ＧＵＳ基因的表達(dá)情況。如圖２－....

圖２－３不同的吐溫休枳分?jǐn)?shù)對(duì)轉(zhuǎn)化效率的影響??Ａ不同吐溫體積分?jǐn)?shù)對(duì)轉(zhuǎn)基囚擬南芥的ＧＵＳ染色影響??

?２擬南芥瞬時(shí)侵染方法的研究???濃度上升，ＧＵＳ染色和ｑＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果都表明其瞬時(shí)轉(zhuǎn)化效率在升高，在１２〇ｎｍｏｌ／Ｌ??時(shí)，瞬時(shí)轉(zhuǎn)化效率最高，當(dāng)ＡＳ為１８０?ｎｍｏｌ／Ｌ時(shí)，轉(zhuǎn)化效率下降。說明，瞬時(shí)轉(zhuǎn)化的最??佳ＡＳ濃度為１２〇ｎｍｏｌ／Ｌ，與煙草的最適ＡＳ濃度接近。??闡....

圖２－４不同的較優(yōu)組合處理對(duì)轉(zhuǎn)化效率的影響??Ａ不同的較優(yōu)組合處理對(duì)轉(zhuǎn)基因擬南芥的ＧＵＳ染色影響??

?東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文???７０?－??ｍ?６０１??輝?■??４０?ｉ?■■??１?３〇?］?■??Ｉ：；?１??Ｑ??．．．．．．ｉｗｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉａｉｉｗｉｉｉ．－????——?；??；一－?????１?不同ｌｉｔ溫濃度處ｋ?４??圖２－３?Ｂ不同的吐溫體積分....

本文編號(hào)：4030631