發(fā)布時間：2025-06-19 03:48

　　嗜蟲書虱Liposcelis entomophila(Enderlein)是一種重要的儲藏物害蟲,大量發(fā)生時可造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失,且對化學(xué)藥劑的抗性發(fā)展迅速,已引起全世界儲藏物工作者的高度重視。但與其他儲藏物類害蟲相比,關(guān)于嗜蟲書虱抗性機理的研究鮮有報道。細胞色素P450是昆蟲體內(nèi)一種重要的解毒代謝酶,在昆蟲的生命活動中具有重要的生理功能。本學(xué)位論文以嗜蟲書虱為研究對象,圍繞細胞色素P450介導(dǎo)昆蟲代謝抗性這一科學(xué)問題開展研究工作。具體內(nèi)容包括:測定嗜蟲書虱對藥劑的敏感性,明確不同種群的抗性水平;構(gòu)建嗜蟲書虱轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫,篩選鑒定具有解毒代謝功能的基因信息;聚焦細胞色素P450基因,克隆cDNA全長序列,解析這些基因在不同性別、不同發(fā)育階段以及藥劑誘導(dǎo)后的表達模式;初步構(gòu)建嗜蟲書虱P450基因真核表達載體;從生化水平上比較相對抗性和相對敏感種群P450s的酶學(xué)特征。研究結(jié)果為探究細胞色素P450是否參與嗜蟲書虱抗藥性形成提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù),在實踐上為制定嗜蟲書虱可持續(xù)的防控策略提供指導(dǎo)。主要研究結(jié)果如下:1嗜蟲書虱轉(zhuǎn)錄組測序及解毒代謝酶基因的鑒定利用Illumina技術(shù)對嗜蟲書虱全蟲態(tài)進行轉(zhuǎn)錄...

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1 轉(zhuǎn)錄組學(xué)在昆蟲學(xué)研究中的應(yīng)用
    2 細胞色素P450酶系
        2.1 細胞色素P450的結(jié)構(gòu)特征
        2.2 細胞色素P450的集團分類
        2.3 細胞色素P450與害蟲抗藥性的關(guān)系
        2.4 細胞色素P450在藥劑脅迫下的可誘導(dǎo)性
        2.5 昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)在P450功能研究中的應(yīng)用
    3 書虱的危害及抗性研究概況
        3.1 書虱的危害與抗性產(chǎn)生
        3.2 書虱的抗性研究
引言
第二章 嗜蟲書虱轉(zhuǎn)錄組測序與分析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 供試主要試劑和儀器
        1.3 總RNA的提取
        1.4 嗜蟲書虱轉(zhuǎn)錄組測序及數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 嗜蟲書虱轉(zhuǎn)錄組測序及數(shù)據(jù)分析
        2.2 功能注釋
        2.3 嗜蟲書虱解毒代謝酶基因的鑒定及代謝通路分析
    3 小結(jié)
第三章 嗜蟲書虱細胞色素P450基因的克隆與表達研究
    第一節(jié) 嗜蟲書虱5個P450基因的克隆與信息分析
        1 材料與方法
            1.1 供試蟲源
            1.2 供試主要試劑（盒）和儀器
            1.3 總RNA的提取
            1.4 總RNA中g(shù)DNA的去除
            1.5 cDNA的合成
            1.6 引物設(shè)計
            1.7 PCR擴增反應(yīng)
            1.8 嗜蟲書虱P450基因序列及系統(tǒng)發(fā)育分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 嗜蟲書虱P450基因cDNA全長的獲得
            2.2 嗜蟲書虱P450基因cDNA序列的生物信息學(xué)分析
            2.3 嗜蟲書虱P450基因的同源性分析
            2.4 嗜蟲書虱P450的系統(tǒng)發(fā)育分析
        3 小結(jié)
    第二節(jié) 嗜蟲書虱P450基因的時空表達分析
        1 材料與方法
            1.1 供試蟲源
            1.2 供試主要試劑（盒）和儀器
            1.3 嗜蟲書虱不同性別及不同發(fā)育階段蟲源的收集
            1.4 生物測定及藥劑誘導(dǎo)
            1.5 總RNA的提取
            1.6 總RNA中g(shù)DNA的去除
            1.7 cDNA的合成
            1.8 引物設(shè)計及內(nèi)參基因選擇
            1.9 定量PCR
            1.10 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 嗜蟲書虱不同性別P450基因的表達模式
            2.2 嗜蟲書虱不同發(fā)育階段P450基因的表達模式
            2.3 嗜蟲書虱P450基因?qū)λ巹┱T導(dǎo)的響應(yīng)表達模式
            2.4 嗜蟲書虱P450基因在不同種群間的表達模式
        3 小結(jié)
    第三節(jié) 嗜蟲書虱細胞色素P450基因真核表達載體構(gòu)建
        1 材料與方法
            1.1 供試主要試劑（盒）和儀器
            1.2 細胞培養(yǎng)
            1.3 PCR擴增及p MD-19T Simple載體構(gòu)建
            1.4 表達載體構(gòu)建
        2 結(jié)果與分析
            2.1 嗜蟲書虱P450基因與p MD-19T Simple重組載體的構(gòu)建
            2.2 p FastBac-CYP4FD2重組質(zhì)粒的構(gòu)建
            2.3 Bacmid-CYP4FD2重組桿粒的構(gòu)建
        3 小結(jié)
        本章討論
            1 細胞色素P450基因的表達模式
            2 細胞色素P450基因的真核表達
第四章 嗜蟲書虱敏感與抗性種群P450酶活性的比較研究
    1 材料與方法
        1.1 供試主要試劑（盒）和儀器
        1.2 嗜蟲書虱的藥劑誘導(dǎo)
        1.3 定量PCR
        1.4 增效作用測定
        1.5 P450s活性測定
        1.6 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 嗜蟲書虱敏感和抗性種群藥劑敏感性及增效作用測定
        2.2 嗜蟲書虱P450基因在不同種群的定量表達研究
        2.3 嗜蟲書虱不同種群P450酶活性測定與比較分析
        2.4 嗜蟲書虱敏感種群在不同藥劑脅迫后的P450酶的活性測定
    3 小結(jié)
第五章 主要結(jié)果、結(jié)論與研究展望
    1 主要結(jié)果與結(jié)論
    2 研究展望
參考文獻
在讀期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：4050809