發(fā)布時(shí)間：2024-11-02 22:04

　　 小麥籽粒黃色素是面粉及面制品黃度形成的主要原因,其主要成分是類胡蘿卜素。ε-番茄紅素環(huán)化酶（LCYE）是小麥類胡蘿卜素生物合成途徑的關(guān)鍵酶,前人對其研究多集中于QTL定位、基因克隆和分子標(biāo)記開發(fā),而基因功能和遺傳調(diào)控機(jī)制尚不明確。本研究利用TILLING技術(shù)篩選EMS誘變?nèi)后w,對Lcye功能及遺傳調(diào)控機(jī)制進(jìn)行研究,以期深入認(rèn)識(shí)小麥籽粒黃色素含量形成的分子機(jī)制。在2491份M₂代EMS誘變?nèi)后w中共檢測到21個(gè)Lcye基因的點(diǎn)突變,包含6個(gè)錯(cuò)義突變,2個(gè)同義突變和13個(gè)內(nèi)含子突變,Lcye基因在該誘變?nèi)后w中的突變頻率為1/266.1kb。PARSENP軟件預(yù)測分析顯示,M090815（C2202T）和M091648（G3284A）兩個(gè)錯(cuò)義突變可能嚴(yán)重影響蛋白質(zhì)功能。MEME分析結(jié)果表明, M090815和M092230 （G2195A）突變位點(diǎn)位于Lcye基因保守結(jié)構(gòu)域內(nèi)。6個(gè)錯(cuò)義突變植株與野生型雜交構(gòu)建的F₂代群體中, M090815突變位點(diǎn)顯著降低籽粒黃色素含量,證實(shí)該位點(diǎn)對LCYE功能具有重要影響。qRT-PCR（quantitative ...

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PARSESNP軟件分析結(jié)果顯示,錯(cuò)義突變體M090815(C2202T)和M091648(G3284A)的PSSM值分別為26.9和27.7,SIFT值均為0,推測這些突變位點(diǎn)可能對LCYE蛋白功能產(chǎn)生嚴(yán)重影響(表4)。2.3突變體Lcye基因表達(dá)和黃色素含量分析

突變體M090815構(gòu)建的F2群體中,不同基因型植株籽粒Lcye及其同源基因表達(dá)水平如圖2所示�；ê�7～21d,純合突變型植株籽粒Lcye基因總表達(dá)量降低至野生型的59.0%～83.0%,雜合型降低至71.5%～91.1%,花后28d各基因型表達(dá)差異不顯著。除了Lcye-B1....

圖2突變體M090815的F2群體中不同基因型植株籽粒Lcye及其同源基因的相對表達(dá)量2.4LCYE功能結(jié)構(gòu)域預(yù)測

基于擬南芥(Arabidopsisthaliana)、水稻(Oryzasativa)、大麥(Hordeumvulgare)等27個(gè)物種已知的Lcye基因cDNA序列(附表1),利用MEMESuite5.1.0預(yù)測LCYE功能結(jié)構(gòu)域,共檢測到3個(gè)結(jié)構(gòu)域(圖4)。6個(gè)錯(cuò)義突....

本文編號(hào)：4010210