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南極磷蝦蝦青素及蝦青素酯分離研究

發(fā)布時間:2020-11-13 10:56
   背景 南極磷蝦(Euphausia superba),又叫大磷蝦,其體內富含蝦青素。蝦青素是一種極強的天然抗氧化劑,具有抵抗心血管老化、防輻射、預防癌癥以及老年癡呆和保護眼睛及皮膚等良好功效,有著非常高的研究價值。蝦青素存在形式主要為:蝦青素一酯、蝦青素二酯和游離的蝦青素,其中主要形式是穩(wěn)定的酯化蝦青素,即蝦青素一酯和蝦青素二酯。蝦青素一酯和蝦青素二酯沒有標準品,國內對南極磷蝦中蝦青素酯進一步分離純化以及南極磷蝦中蝦青素立體異構體的研究并不成熟,故亟待對其進行研究和開發(fā)。 目的 本文旨在建立對從南極磷蝦中提取出來的蝦青素、蝦青素一酯和蝦青素二酯進行進一步分離純化以及立體異構體鑒定的方法,再通過氣相-質譜聯(lián)用(GC-MS)、高效液相色譜(HPLC)等方法確定其組成及立體異構體。 方法 本文以南極磷蝦中蝦青素及其酯作為研究對象。利用AgNO3高效薄層板刮板分離方法分別確定了蝦青素一酯和二酯的最佳進一步分離純化條件,將進一步分離純化之后的蝦青素一酯和蝦青素二酯進行甲酯化,再進行GC-MS檢測,分別分析其每條色譜帶的脂肪酸結構。利用HPLC方法進行了蝦青素、皂化后的蝦青素一酯和皂化后的蝦青素二酯的立體異構體檢測分析。 結果 1.本研究通過對AgNO3甲醇溶液濃度,高效薄層H板浸泡時間,高效薄層H板烘干溫度,高效薄層H板烘干時間以及展開劑配比等的單因素實驗,確定了利用AgNO3高效薄層H板刮板分離蝦青素一酯和二酯的最佳條件,即當AgNO3甲醇溶液濃度為2%,高效薄層H板浸泡時間為15min,烘干溫度為60℃,烘干時間為1h,采用展開劑為石油醚:三乙胺:丙酮=9.5ml:10μl:3ml時,蝦青素一酯分離效果最好,分出兩條色譜帶。當采用展開劑為正己烷:丙酮=3:1時,二酯分離效果最好,分出五條色譜帶。 2.用GC-MS方法對經AgNO3高效薄層H板刮板分離的蝦青素一酯的兩條色譜帶和蝦青素二酯的五條色譜帶進行了檢測及分析:蝦青素一酯第一條色譜帶富含6.9%的蝦青素十三烯酸一酯和48.83%的蝦青素十五酸一酯;第二條色譜帶富含100%的偶數(shù)脂肪酸蝦青素一酯。蝦青素二酯第一條色譜帶富含62.03%飽和蝦青素二酯;第二條色譜帶富含73.34%飽和蝦青素二酯;第三條色譜帶富含82.26%不飽和蝦青素二酯;第四條色譜帶富含54.58%不飽和蝦青素二酯;第五條色譜帶富含75.61%不飽和蝦青素二酯。 3.對蝦青素標準品,蝦青素一酯經皂化后得到的蝦青素以及蝦青素二酯經皂化后得到的蝦青素分別用HPLC方法進行立體異構體分析檢測:蝦青素標準品在18.765min、19.938min和21.197min三個時間點出現(xiàn)(3S,3’S),(3S,3’R),(3R,3’R)三種立體異構體;蝦青素一酯制備出的蝦青素只在29.971min一個時間點出現(xiàn)一個峰,對比標準品可以得出,蝦青素一酯中的蝦青素只有(3R,3’R)一種立體異構體;蝦青素二酯制備出的蝦青素在18.422min、20.189min和21.281min三個時間點出現(xiàn)三個峰,對比標準品可以得出,蝦青素二酯中的蝦青素存在蝦青素標準品的三種立體結構。 結論與創(chuàng)新 國內外首次對南極磷蝦中的蝦青素一酯和蝦青素二酯進行AgNO3高效薄層H板刮板再分離并得到具有一定規(guī)律的實驗結果:首次分離出富含十三烯酸一酯和十五酸一酯的奇數(shù)脂肪酸蝦青素一酯,有利于推進對蝦青素奇數(shù)脂肪酸一酯的再分離、進一步純化和生理活性差異的研究。蝦青素二酯的分離結果也極具規(guī)律性,制備出了富含飽和脂肪酸的蝦青素二酯和富含不飽和脂肪酸的蝦青素二酯,提供了一種再分離蝦青素二酯的檢測方法。此外,蝦青素一酯也首次被檢測出只含有一種異構體,同時制備出了只含有一種立體異構體體的蝦青素,這就又進一步推進了南極磷蝦蝦油的鑒定工作。
【學位單位】:山東師范大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2015
【中圖分類】:S917.4
【部分圖文】:

南極磷蝦,大磷蝦,南極洲,南極


圖 1- 1 南極磷蝦Fig1-1 Euphausia superba南極磷蝦(Euphausia superba),又叫南極大磷蝦,為生活在南極洲地區(qū)的一種磷蝦,是南極生態(tài)系統(tǒng)中非常重要的物種。它們可達6厘米長,2克重,壽命約6年。南極磷蝦是南極生態(tài)系統(tǒng)中的關鍵物種,按照生物質能來說,南極大磷蝦可能是地球上最成功的動物物種,也是地球上最大的單種生物資源之一,其現(xiàn)存

分子結構圖,蝦青素,分子結構,南極磷蝦


其年捕撈量就一直徘徊在 100,000t[10]。前蘇聯(lián)將南極磷蝦做成糊狀物進行大批量銷售,之后,日本,西德,波等國家也開始相繼生產蝦粉[3]。前蘇聯(lián)解體后,日本成為南極磷蝦開發(fā)國[4]。由于日本主要以糠蝦和磷蝦等來作為食品,在 70 年代中期之前磷蝦基本是在煮沸后被做成冷凍的食品,但冷凍食品解凍之后營養(yǎng)價值,其市場銷路并不好,故日本又開始將南極磷蝦制成養(yǎng)魚餌料,且此種占領了冷凍魚餌市場。近些年來,日本又相繼利用南極磷蝦制作出了炸蝦和炸糕等[11]。現(xiàn)在,已有多個國家加入到生產南極磷蝦的行列,目前為止,南極磷蝦量已經到達 6000000 噸[12]。蝦青素概況 蝦青素結構及存在形式

蝦青素,立體異構體,人工合成


山東師范大學碩士學位論文形式存在,(3S, 3’R)的內消旋形式多為人工合成的[13]。三種立體異構體中,(3S,3’S)具有最高的抗氧化活性,所以天然蝦青素在功能上遠強于人工合成蝦青素。蝦青素存在于魚、蝦、蟹、藻類、鮭等海洋生物中,在魚類和水產養(yǎng)殖業(yè)中是一種重要的著色劑[14]。
【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 樊莉,張亞剛,馬莉,文彬,吾滿江·艾力;尿素包合法及其在多價不飽和脂肪酸分離純化中的應用[J];兵團教育學院學報;2002年03期

2 陳時華;南極磷蝦資源開發(fā)研究現(xiàn)狀及對今后研究的建議[J];東海海洋;1990年02期

3 陳興才,黃偉光,歐陽琴;雨生紅球藻中蝦青素酯的皂化及游離蝦青素的純化分離[J];福州大學學報(自然科學版);2005年02期

4 宋光泉;閻杰;王榮輝;施進;;天然蝦青素的提取純化及其應用[J];廣東化工;2007年11期

5 何林;孫文郡;李鑫鋼;;溶劑萃取在油砂分離中的應用及發(fā)展[J];化工進展;2011年S2期

6 王淑云;陳仲祥;;飽和-不飽和脂肪酸π絡合分離技術研究[J];河北化工;2008年05期

7 陳永,趙輝,江鴻,曹紅霞,康定學;混合脂肪酸的分離[J];化學世界;2000年03期

8 孫雷;周德慶;盛曉風;;南極磷蝦營養(yǎng)評價與安全性研究[J];海洋水產研究;2008年02期

9 魏東,嚴小君;天然蝦青素的超級抗氧化活性及其應用[J];中國海洋藥物;2001年04期

10 孫松,嚴小軍;南極大磷蝦的生物活性物質及其用途研究進展[J];極地研究;2001年03期



本文編號:2882114

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