發(fā)布時間：2020-12-08 01:11

　　本研究以中華鱉為研究對象,探討高脂日糧對中華鱉肌肉和肝臟中生物鐘核心基因、重要功能基因及microRNA表達(dá)的影響。其方法和結(jié)果如下:通過克隆、測序及生物信息學(xué)方法,獲得中華鱉Clock、Bmal2和Per2三個生物鐘核心基因的ORF區(qū)序列大小分別為2553 bp、1902 bp和3888 bp,共編碼氨基酸850個、633個和1295個。其中,Clock、Bmal2兩個蛋白均含有1個BHLH結(jié)構(gòu)域和2個PAS保守結(jié)構(gòu)域,而Per2只含有1個PAS結(jié)構(gòu)域。且中華鱉Clock、Bmal2和Per2三個生物鐘核心基因在進(jìn)化上與其它爬行類動物和鳥類具有更親的親緣關(guān)系,而與魚類和哺乳類關(guān)系較遠(yuǎn)一些。采用qRT-PCR技術(shù)和geNorm、NormFinder與BestKeeper三個軟件,對GAPDH、18S rRNA、RPL13、RPL19、RPS2和β-actin 6個內(nèi)參基因進(jìn)行篩選。得出中華鱉肌肉和肝臟中最適內(nèi)參基因分別為RPL13和RPL19。選取180只中華鱉隨機(jī)分成兩個組即對照組和實驗組,分別投喂脂肪含量為7.98%和13.86%的飼料,定制光周期為12 h光照vs 12 h黑暗。... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

生物鐘系統(tǒng)的構(gòu)成

圖 1-2 哺乳動物生物鐘核心基因反饋環(huán)路模式圖[4]Fig. 1-2 Ideograph on mammalian core circadian gene feedback loop[4]此外，在生物鐘分子調(diào)控機(jī)制中，還存在另一個核受體 Rev-erbα (NR1D1)基因Rorα 基因參與的輔助反饋環(huán)（圖 1-3）。一方面，其相應(yīng)蛋白進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)抑制正調(diào)節(jié)端的 Bmal1 基因的轉(zhuǎn)錄，從而降低 Bmal1 基因的表達(dá)；另一方面，在負(fù)向調(diào)端的Cry基因可以抑制Rev-erbα基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)以增加節(jié)律振蕩的穩(wěn)定性和維持其物鐘功能[7]。

圖 1-2 哺乳動物生物鐘核心基因反饋環(huán)路模式圖[4]Fig. 1-2 Ideograph on mammalian core circadian gene feedback loop[4]外，在生物鐘分子調(diào)控機(jī)制中，還存在另一個核受體 Rev-erbα (NR1D1)基因基因參與的輔助反饋環(huán)（圖 1-3）。一方面，其相應(yīng)蛋白進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)抑制正的 Bmal1 基因的轉(zhuǎn)錄，從而降低 Bmal1 基因的表達(dá)；另一方面，在負(fù)向調(diào)ry基因可以抑制Rev-erbα基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)以增加節(jié)律振蕩的穩(wěn)定性和維持其能[7]。


本文編號：2904191