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異育銀鯽鰓出血病檢測方法的建立和生化指標分析

發(fā)布時間:2020-12-12 02:26
  異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)因具有個頭大、生長快、肉質鮮美、營養(yǎng)豐富等優(yōu)點而受到人民群眾的喜愛,其產量持續(xù)增長,帶來了巨大的經濟效益和社會效益。然而,大規(guī)模病害的爆發(fā)阻礙了異育銀鯽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,其中病害主要有寄生蟲病、細菌性疾病、真菌性疾病、病毒性疾病等。2012年來,異育銀鯽養(yǎng)殖區(qū)爆發(fā)了大規(guī)!蚌w出血病”,該病死亡率極高,造成重大經濟損失,經鑒定引起這種疾病的是鯉皰疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)。CyHV-2最早于1992年在日本的金魚中被發(fā)現,因其是第二個從鯉科魚中分離出的病毒,國際病毒系統分類與命名委員會命名其為鯉皰疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2),因其可造成鯽魚造血組織器官壞死,因此,又稱該病毒為“皰疹病毒性造血器官壞死癥病毒”,(Herpes viral haematopoietic necrosis virus,HVHNV)。鯉科魚皰疹病毒目前分為三個型,分別為鯉痘瘡病毒(Carp pox herpesvirus,Cyprinid herpesvirus,CyHV-1);鯉皰疹病毒 Ⅱ 型(CyHV-2)... 

【文章來源】:南京師范大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數】:65 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

異育銀鯽鰓出血病檢測方法的建立和生化指標分析


圖2.1用于提取病毒液的病魚組織PCR結果

疾病癥狀,皰疹病毒,異育銀鯽,人工感染


??染CyHV-2,檢測結果如圖2.1所示,4條病魚的腎組織皆為陽性。因此這些病??魚提取的病毒液可以放心用于人工回感。??M?1?23456789?M??1>P?bp??2000?2000??zso??iuu?loo??圖2.1用于提取病毒液的病魚組織PCR結果。M:DL2000DNA?marker;?1-4:用于提取病毒??液的4條病魚的腎組織;6為陰性對照;9為陽性對照:5、7、8為空白對照。??Fig.?2.1?The?PCR?results?of?tissue?DNA?for?the?diseased?fish?used?to?extract?the?sick?poison.?M:??DL2000?DNA?marker;?M:?kidney?tissues?of?4?sick?fish;?6:?negative?control;?9:?positive?control;??5、7、8:?blank?control.??2.3.2疾病感染癥狀??與正常魚相比,回感的魚出現行動緩慢、離群獨游等反應。從第二天開始魚??出現了輕微病癥,第三天開始出現死亡,都出現典型的病癥,如圖2.2所示:鰭??基部有出血點、尾鰭末端發(fā)白、眼球突出、解剖可見魚鰾上有出血點等,第七天??99°/。回感魚死亡。??圖2.2異育銀鯽人工感染鯉皰疹病毒II型后的疾病癥狀和健康魚的對比。A:感染3天后有??18??

溶解曲線,后產物,標準曲線,相關數值


2.3.4熒光定量PCR標準曲線的繪制??將獲取的DNA模板測定濃度后,10倍梯度稀釋,分別以6.07x1?〇8?6.07x102??copies/L為模板,進行熒光定量PCR檢測,檢測結果見表2.3和圖2.4,計算并??得出標準曲線:y?=?-3.6399?x?+36.941,R2=?0.9998。??表2.3熒光定量PCR標準曲線繪制相關數值??Table?2.3?The?related?values?about?the?drawing?of?Fluorescence?quantitative?PCR?standard?curve??拷貝數?loglO?重復數?CT平均值??19??


本文編號:2911679

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