柿果實(shí)木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)移/水解酶基因表達(dá)特性及功能分析
發(fā)布時(shí)間：2020-12-05 06:52
柿果實(shí)采后極易軟化,不利于鮮柿的貯藏和運(yùn)輸,影響其商品價(jià)值。木葡聚糖是高等植物細(xì)胞壁半纖維素的主要成分,半纖維素與纖維素微纖絲構(gòu)成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),對細(xì)胞壁的膨脹松軟起限制作用,也是細(xì)胞壁的主要機(jī)械支撐物來源。木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)移/水解酶（XTH）具有催化木葡聚糖分子水解和糖基轉(zhuǎn)移的雙重作用,它在植物生長發(fā)育、果實(shí)成熟軟化及逆境脅迫抗性形成等過程中都發(fā)揮重要功能。目前XTH發(fā)揮功能的機(jī)制尚不明確,柿果實(shí)XTH基因的發(fā)掘和功能研究也鮮有報(bào)道。本文首先對柿果實(shí)中分離得到的XTH基因家族成員進(jìn)行表達(dá)分析,篩選出參與果實(shí)生長發(fā)育和成熟軟化的關(guān)鍵基因。其次利用體外誘導(dǎo)蛋白和亞細(xì)胞定位,在蛋白層面上分析關(guān)鍵基因發(fā)揮功能的作用機(jī)制。在此基礎(chǔ)上,利用轉(zhuǎn)基因手段系統(tǒng)研究柿DkXTH1和DkXTH8基因的功能,揭示XTH在果實(shí)生長發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫中的重要作用。主要研究結(jié)果如下:1.利用RACE技術(shù)從‘富平尖柿’中分離得到4條新的柿XTH基因,命名為DkXTH5-8。與DkXTH1-4類似,新基因均具有其他物種XTH的共同特征。聚類分析表明,柿DkXTH1-8基因被聚在Ⅰ/Ⅰ類中。XTH三維結(jié)構(gòu)中Loop2的...
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：104 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
XET的整合轉(zhuǎn)糖基作用示意圖
種轉(zhuǎn)糖基方式是重組的轉(zhuǎn)移酶作用，它是在兩個(gè)已有細(xì)胞（圖 1-2）。首先 XTH 與其中一條已有木葡聚糖分子結(jié)成酶-底物共價(jià)復(fù)合體。之后酶-底物復(fù)合體中的還原性接，此時(shí)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)松弛，以便于重組。最后酶脫離復(fù)pson and Fry 2001)。關(guān) XTH 活性與蛋白結(jié)構(gòu)的關(guān)系也被廣泛研究。對比只的旱金蓮TmNXGl和只具有轉(zhuǎn)移酶活性的雜交楊樹PttX存在環(huán) 1 和環(huán) 2 上明顯差異的氨基酸序列和空間構(gòu)象。氨基酸，而 PttXET16-34 的環(huán) 2 只有 5 個(gè)氨基酸。將 Tm酶 Tm-NXG1-△YNIIG 表現(xiàn)明顯的 XET 活性，同時(shí)其 可能是調(diào)控 XET 和 XEH 活性的關(guān)鍵(Baumann et al. 20
https://ww蛋 白 質(zhì)ptidemass.vices/Siga析，采用行（http:白三維結(jié)構(gòu)%瓊脂糖凝尾、降解明 RNAww.ncbi.nlm理 化 性html）。蛋l(fā)P）。利用Bootstrap N//swissmod構(gòu)為模板。凝膠電泳檢解等現(xiàn)象。2質(zhì)量較好且m.nih.gov/質(zhì) ， 如白質(zhì)的信號DNAMAN-J Tree 方del.expasy.o檢測其質(zhì)量28S rRNA 且完整，可號方可
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]柿采后丙烯和1–甲基環(huán)丙烯處理對兩個(gè)擴(kuò)展蛋白基因表達(dá)的影響[J]. 孫振營,韓葉,李秀芳,馬秋詩,饒景萍. 園藝學(xué)報(bào). 2014(06)
[2]采后嘎拉蘋果果實(shí)細(xì)胞壁代謝及關(guān)鍵酶基因表達(dá)特性研究[J]. 齊秀東,李海山,魏建梅,賈艷茹. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2012(02)
[3]柿果實(shí)內(nèi)切-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆與定量表達(dá)分析[J]. 宋康華,饒景萍,常曉曉,祝慶剛. 園藝學(xué)報(bào). 2011(10)
[4]果膠降解相關(guān)酶與果實(shí)成熟軟化[J]. 佟兆國,王飛,高志紅,周軍,徐秋紅,章鎮(zhèn). 果樹學(xué)報(bào). 2011(02)
[5]硬溶質(zhì)型桃果實(shí)成熟過程中細(xì)胞壁多糖降解特性及其相關(guān)酶研究[J]. 闞娟,劉濤,金昌海,謝海艷. 食品科學(xué). 2011(04)
[6]細(xì)胞壁重構(gòu)關(guān)鍵酶木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶/水解酶(XTH)的研究進(jìn)展[J]. 杜麗萍,沈昕,陳少良,胡贊民. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2010(03)
[7]赤霉素和萘乙酸對柿果實(shí)采后成熟軟化生理指標(biāo)的影響[J]. 付潤山,姜妮娜,饒景萍,索江濤. 西北植物學(xué)報(bào). 2010(06)
[8]京白梨果實(shí)后熟軟化過程中細(xì)胞壁代謝及其調(diào)控[J]. 魏建梅,馬鋒旺,關(guān)軍鋒,袁軍偉,朱向秋. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(08)
[9]丙烯和1-MCP處理對采后柿果實(shí)ACS和ACO基因表達(dá)的影響[J]. 劉樂,饒景萍,常曉曉,弋順超. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(06)
[10]柿果實(shí)多聚半乳糖醛酸酶基因克隆與序列分析[J]. 劉樂,饒景萍,常曉曉. 西北植物學(xué)報(bào). 2009(04)
碩士論文
[1]柿霜與柿多糖功能特性的初步研究[D]. 李春梅.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
本文編號：2899067
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：104 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
XET的整合轉(zhuǎn)糖基作用示意圖
種轉(zhuǎn)糖基方式是重組的轉(zhuǎn)移酶作用，它是在兩個(gè)已有細(xì)胞（圖 1-2）。首先 XTH 與其中一條已有木葡聚糖分子結(jié)成酶-底物共價(jià)復(fù)合體。之后酶-底物復(fù)合體中的還原性接，此時(shí)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)松弛，以便于重組。最后酶脫離復(fù)pson and Fry 2001)。關(guān) XTH 活性與蛋白結(jié)構(gòu)的關(guān)系也被廣泛研究。對比只的旱金蓮TmNXGl和只具有轉(zhuǎn)移酶活性的雜交楊樹PttX存在環(huán) 1 和環(huán) 2 上明顯差異的氨基酸序列和空間構(gòu)象。氨基酸，而 PttXET16-34 的環(huán) 2 只有 5 個(gè)氨基酸。將 Tm酶 Tm-NXG1-△YNIIG 表現(xiàn)明顯的 XET 活性，同時(shí)其 可能是調(diào)控 XET 和 XEH 活性的關(guān)鍵(Baumann et al. 20
https://ww蛋 白 質(zhì)ptidemass.vices/Siga析，采用行（http:白三維結(jié)構(gòu)%瓊脂糖凝尾、降解明 RNAww.ncbi.nlm理 化 性html）。蛋l(fā)P）。利用Bootstrap N//swissmod構(gòu)為模板。凝膠電泳檢解等現(xiàn)象。2質(zhì)量較好且m.nih.gov/質(zhì) ， 如白質(zhì)的信號DNAMAN-J Tree 方del.expasy.o檢測其質(zhì)量28S rRNA 且完整，可號方可
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]柿采后丙烯和1–甲基環(huán)丙烯處理對兩個(gè)擴(kuò)展蛋白基因表達(dá)的影響[J]. 孫振營,韓葉,李秀芳,馬秋詩,饒景萍. 園藝學(xué)報(bào). 2014(06)
[2]采后嘎拉蘋果果實(shí)細(xì)胞壁代謝及關(guān)鍵酶基因表達(dá)特性研究[J]. 齊秀東,李海山,魏建梅,賈艷茹. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2012(02)
[3]柿果實(shí)內(nèi)切-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆與定量表達(dá)分析[J]. 宋康華,饒景萍,常曉曉,祝慶剛. 園藝學(xué)報(bào). 2011(10)
[4]果膠降解相關(guān)酶與果實(shí)成熟軟化[J]. 佟兆國,王飛,高志紅,周軍,徐秋紅,章鎮(zhèn). 果樹學(xué)報(bào). 2011(02)
[5]硬溶質(zhì)型桃果實(shí)成熟過程中細(xì)胞壁多糖降解特性及其相關(guān)酶研究[J]. 闞娟,劉濤,金昌海,謝海艷. 食品科學(xué). 2011(04)
[6]細(xì)胞壁重構(gòu)關(guān)鍵酶木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶/水解酶(XTH)的研究進(jìn)展[J]. 杜麗萍,沈昕,陳少良,胡贊民. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2010(03)
[7]赤霉素和萘乙酸對柿果實(shí)采后成熟軟化生理指標(biāo)的影響[J]. 付潤山,姜妮娜,饒景萍,索江濤. 西北植物學(xué)報(bào). 2010(06)
[8]京白梨果實(shí)后熟軟化過程中細(xì)胞壁代謝及其調(diào)控[J]. 魏建梅,馬鋒旺,關(guān)軍鋒,袁軍偉,朱向秋. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(08)
[9]丙烯和1-MCP處理對采后柿果實(shí)ACS和ACO基因表達(dá)的影響[J]. 劉樂,饒景萍,常曉曉,弋順超. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(06)
[10]柿果實(shí)多聚半乳糖醛酸酶基因克隆與序列分析[J]. 劉樂,饒景萍,常曉曉. 西北植物學(xué)報(bào). 2009(04)
碩士論文
[1]柿霜與柿多糖功能特性的初步研究[D]. 李春梅.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
本文編號：2899067
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