發(fā)布時(shí)間：2024-05-24 19:16

　　鹽霉素(salinomycin)屬于典型的聚醚類抗生素,由白色鏈霉菌(Streptomyces albus)合成,在農(nóng)業(yè)上主要用于治療雞球蟲病,在醫(yī)藥上具有抗腫瘤細(xì)胞活性,是一種潛在的抗腫瘤藥物。本論文主要開展了白色鏈霉菌誘變育種篩選技術(shù)研究和雙組份系統(tǒng)RspA1/A2對(duì)白色鏈霉菌基礎(chǔ)代謝及鹽霉素合成等次級(jí)代謝全局調(diào)控研究。首先,以工業(yè)白色鏈霉菌(S.albus)S12為出發(fā)菌,建立菌種高效誘變篩選平臺(tái),通過高通量篩選獲得高產(chǎn)菌,同時(shí)在轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上分析誘變育種提高鹽霉素生物合成能力的可能作用機(jī)制;其次,研究白色鏈霉菌(S.albus)雙組份系統(tǒng)RspA1/A2對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)的初級(jí)代謝(如葡萄糖中心代謝途徑、氮源代謝和磷源攝入等途徑)和鹽霉素生物合成等次級(jí)代謝的全局調(diào)控機(jī)理,理解細(xì)胞生長(zhǎng)和鹽霉素合成等次級(jí)代謝之間關(guān)系。具體結(jié)果如下:1.鹽霉素工業(yè)菌菌種誘變及高產(chǎn)菌株高效合成鹽霉素機(jī)理研究本研究在已建立的菌種誘變篩選方法基礎(chǔ)上,采用瓊脂糖擴(kuò)散法替代原來的24孔板發(fā)酵方法來表征鹽霉素效價(jià),最后使篩選周期縮短了 18天,篩選效率明顯提高。在高產(chǎn)菌株篩選方面,采用常溫等離子(atmosphe...

【文章頁數(shù)】：152 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２鏈霉菌芽孢萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)１７１??Ｆｉｇ?１．２?Ｓｐｏｒｅ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｈｙｐｈａｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ．??

等。??Ｓｐｏｒｅ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?Ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ?ｏｆ?ｇｅｒｍ?ｔｕｂｅ??ＣＡＭＰ??ｃ－ｄｉ－ＡＭＰ?－＞?Ｒｐｆ??ｐｐＧｐｐ??」?Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－ｌｉｋｅ??ｇｌｙｃａｎ??Ｈｙｐｈａｌ?｜??ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ??????Ｃｓ?丨?Ａ?ＧｌｘＡ?....

圖１．３鏈霉菌細(xì)胞后期產(chǎn)孢機(jī)制１１８１??

第４頁?華東理工大學(xué)博士學(xué)位論文??８ｌｄＤ：ｃ－ｄｉ－ＧＭＰ?Ｓｐｏｒｅ?ｗａｌｌ?￣??Ｉ?｜??ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ?ｒｅｍｏｄｅｌｌｉｎｇ?Ｐ?Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ?ｂｙ??５ｌｕｉＬＳ??畫??ＮＯ—＞ＷｈｉＯ??Ａｅｒｉａｌ?ｆｖｙｐｈａ?ａｂｏｕｔ?ｔ....

圖１．４天藍(lán)色鏈霉菌氮源代謝１２７１??Ｆｉ１．４?Ｎｉｔｒｏｅｎ?ｓｏｕｒｃｅ?ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ?ｉｎ?Ｓ．?ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ??

變化，微生物進(jìn)化出復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)??去調(diào)控跟氮源代謝相關(guān)基因的表達(dá)水平。例如在腸道桿菌中，雙組份系統(tǒng)??ＮｔｒＢ／ＮｔｒＣ參與了氮源代謝調(diào)控，當(dāng)?shù)�源限制時(shí)，感應(yīng)蛋白ＮｔｒＢ磷酸化ＮｔｒＣ，??反應(yīng)蛋白ＮｔｒＣ被激活并進(jìn)一步直接調(diào)控下游的靶基因的轉(zhuǎn)錄水平［２８｜３在枯草芽??孢桿菌....

圖１．９鹽霉素合成基因簇結(jié)構(gòu)圖??Ｆｉｇ?１．９?Ｇｅｎｅ?ｃｌｕｓｔｅｒ?ｏｆ?ｓａｌｉｎｏｍｙｃｉｎ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ??

第１４頁?華東理工大學(xué)博士學(xué)位論文??鏈霉菌合成基因簇才一步一步被發(fā)現(xiàn)，２００３年，Ｉｓａｏ?Ｆｕｊｉｉ實(shí)驗(yàn)室利用Ｉ型ＰＫＳ??中保守區(qū)域序列設(shè)計(jì)兼并引物，擴(kuò)增得到一個(gè)４．５ｋｂ的片段。進(jìn)一步經(jīng)過測(cè)序之??后發(fā)現(xiàn)其序列屬于Ｉ型ＰＫＳ基因簇，通過同源雙交換缺失４．５ｋｂ片段中的部分....

本文編號(hào)：3981130