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新型核酸適配體電化學(xué)傳感器研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-06 07:05
  近年來(lái),食品安全事件日益頻發(fā),不斷地給人們帶來(lái)新的挑戰(zhàn)。因此,食品分析領(lǐng)域的研究課題成為大眾普遍關(guān)注地?zé)狳c(diǎn)之一。傳統(tǒng)的食品安全分析方法大多數(shù)存在前處理過(guò)程復(fù)雜,價(jià)格昂貴,需要大型的檢測(cè)儀器,無(wú)法實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的實(shí)時(shí)快速檢測(cè)。核酸適配體電化學(xué)傳感器具有親和力好,選擇性高,靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),因此在食品安全檢測(cè)中有著較好的發(fā)展?jié)摿蛷V泛的應(yīng)用前景。本論文的研究工作針對(duì)傳統(tǒng)電化學(xué)傳感器在實(shí)際檢測(cè)中響應(yīng)速度慢的缺點(diǎn),分別以三磷酸腺苷二鈉鹽(ATP)和卡那霉素分子作為目標(biāo)分析物,通過(guò)改變核酸適配體的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)以及復(fù)合探針結(jié)合反應(yīng)的過(guò)程,得到了可以對(duì)目標(biāo)分子快速檢測(cè)的“夾心型”片段式適配體探針和“一步競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合型”適配體探針。以兩種新型核酸適體探針為基礎(chǔ)構(gòu)建的新型電化學(xué)傳感器對(duì)目標(biāo)分子均表現(xiàn)出了較高的靈敏度和響應(yīng)速度,并且具有良好的選擇性和特異性,最終在實(shí)際樣品的檢測(cè)中也獲得了很好的回收率。論文主要進(jìn)行的研究?jī)?nèi)容和結(jié)果包括:(1)核酸適配體片段式探針電化學(xué)傳感器的設(shè)計(jì)及ATP的檢測(cè)應(yīng)用。置換型核酸適配體電化學(xué)傳感器雖然應(yīng)用范圍廣,但是在實(shí)際樣品檢測(cè)中,由于核酸適配體鏈和互補(bǔ)鏈雜交時(shí)間較長(zhǎng),限制了適配體對(duì)目標(biāo)分... 

【文章來(lái)源】:煙臺(tái)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

新型核酸適配體電化學(xué)傳感器研究


SELEX技術(shù)示意圖

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圖 1-2 非標(biāo)記型核酸適配體傳感器的工作原理圖[30]Figure.1-2 Schematic diagram of the non-labeled aptamer sensor非標(biāo)記型核酸適配體電化學(xué)傳感器的優(yōu)點(diǎn)是顯而易見(jiàn)的,其主要優(yōu)勢(shì)如下:(1)無(wú)需標(biāo)記和修飾,成本低;(2)極大地保持了分子的原始活力;(3)節(jié)約檢測(cè)時(shí)間,操作簡(jiǎn)單;(4)可重復(fù)使用,避免二次檢測(cè);谝陨系膬(yōu)勢(shì),該類傳感器在基礎(chǔ)檢測(cè)、環(huán)境檢測(cè)和臨床診斷等多種領(lǐng)域中有著較大的發(fā)展前景。但是,該傳感技術(shù)發(fā)展雖日漸成熟,還是有著信號(hào)靈敏度低的缺點(diǎn),仍需廣大研究學(xué)者們繼續(xù)努力,使其擁有更大的發(fā)展空間。1.2.2.2 標(biāo)記型核酸適配體電化學(xué)傳感器由前文論述可知,非標(biāo)記型核酸適配體傳感器的信號(hào)靈敏度通常都比較的低,

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1 綜述1-3 所示,將修飾了亞甲基藍(lán)(MB)的 ATP 核酸適配體探針固定在金電極的表面,與探針互補(bǔ)的寡核苷酸鏈 C1 和適配體雜交結(jié)合后形成了雙鏈 DNA 結(jié)構(gòu),這時(shí)修飾在適配體末端的 MB 與電極之間的距離徑變大,阻礙了電子的傳遞,此時(shí)測(cè)得的 M的響應(yīng)電流較小。當(dāng)出現(xiàn)目標(biāo)分子 ATP 后,由于目標(biāo)分子的誘導(dǎo),適配體探針隨即把 ATP 包裹起來(lái),形成穩(wěn)定的發(fā)卡結(jié)構(gòu),之前的雙鏈 DNA 又變?yōu)閱捂湗?gòu)象,重新靠近金電極,既而產(chǎn)生 MB 的響應(yīng)電流峰。通過(guò) MB 電流峰的變化,可以測(cè)出 ATP的含量;诖嗽淼膫鞲衅鳟(dāng)前已應(yīng)用在卡那霉素、可卡因、溶菌酶的檢測(cè)中。


本文編號(hào):2900943

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