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基于適配體識(shí)別-酶催化顯色的真菌毒素和重金屬檢測(cè)方法研究

發(fā)布時(shí)間:2024-07-09 01:11
  真菌毒素和重金屬是危害食品安全的重要風(fēng)險(xiǎn)因子,污染分布廣、防控難,極易從農(nóng)田到餐桌全程污染食品原料和食品,并對(duì)人體健康和公共衛(wèi)生造成不利影響,因此切實(shí)提高檢測(cè)技術(shù)水平、及時(shí)監(jiān)控發(fā)現(xiàn)該類危害隱患對(duì)于保障食品安全至關(guān)重要。本研究選擇了伏馬毒素B1、玉米赤霉烯酮、重金屬鎘和鉛四種典型食品安全危害物,以特異性強(qiáng)、親和力高的核酸適配體為識(shí)別探針,基于生物酶催化顯色反應(yīng)原理、納米酶促顯色和信號(hào)增強(qiáng)效應(yīng),結(jié)合信號(hào)放大技術(shù),構(gòu)建了系列耗時(shí)短、結(jié)果直觀、方法簡(jiǎn)易的真菌毒素和重金屬高靈敏顯色檢測(cè)方法,旨在為基層食品危害物檢測(cè)工作提供更簡(jiǎn)單更直觀更便捷的技術(shù)方法選擇,為豐富和提高食品安全檢測(cè)技術(shù)提供技術(shù)支撐。首先,構(gòu)建了基于適配體-辣根過(guò)氧化物酶催化顯色的檢測(cè)方法體系,用于檢測(cè)伏馬毒素B1。將標(biāo)記生物素的伏馬毒素B1適配體通過(guò)生物素-鏈霉親和素反應(yīng)固定在微孔板上,再通過(guò)生物素-鏈霉親和素反應(yīng)將辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記在適配體互補(bǔ)鏈上,互補(bǔ)鏈與目標(biāo)毒素競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合適配體,適配體優(yōu)先捕獲目標(biāo)毒素,隨著目標(biāo)毒素濃度增加,顯色反應(yīng)信號(hào)降低,溶液顏色由深黃趨向淡黃直至無(wú)色,...

【文章頁(yè)數(shù)】:94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

圖1-1伏馬毒素B1化學(xué)結(jié)構(gòu)圖

圖1-1伏馬毒素B1化學(xué)結(jié)構(gòu)圖

江南大學(xué)博士學(xué)位論文21.1.1.1黃曲霉毒素黃曲霉毒素是雙呋喃環(huán)類毒素,最適宜生長(zhǎng)穩(wěn)定為33℃,主要分為黃曲霉毒素B1,G1,B2和G2等四種類型,另外,黃曲霉毒素M1是黃曲霉毒素B1的羥基化形式,見于牛奶和乳制品中。在紫外燈下,黃曲霉毒素B和G分別顯示出藍(lán)色和綠色的熒光特性,....


圖1-2玉米赤霉烯酮化學(xué)結(jié)構(gòu)圖

圖1-2玉米赤霉烯酮化學(xué)結(jié)構(gòu)圖

第一章緒論3玉米赤霉烯酮是一種類雌激素樣非甾體毒素,其化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1-2,常污染小麥,玉米,燕麥,黑麥和大麥等谷物,具有致畸性和生殖毒性,最適宜生長(zhǎng)溫度為25℃,國(guó)際癌癥研究署將其歸類為2A類致癌物,歐洲食品安全署將每日最大耐受攝入量定為0.25μg/kg體重[11]。在我國(guó),玉....


圖1-3適配體固定至石墨烯表面示意圖

圖1-3適配體固定至石墨烯表面示意圖

第一章緒論5析物免疫監(jiān)測(cè)方法,樣品消耗少,分析時(shí)間短,檢測(cè)成本降低,針對(duì)T2毒素、伏馬毒素B1和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的檢測(cè)限分別達(dá)到17.8、331.5和242.0μg/kg,樣品前處理和分析的總時(shí)間少于30分鐘[26]。1.1.3.4適配體檢測(cè)技術(shù)將適配體固定化是構(gòu)建適配體生物檢....


圖1-4基于氧化石墨烯和分子信標(biāo)的重金屬銅檢測(cè)法原理

圖1-4基于氧化石墨烯和分子信標(biāo)的重金屬銅檢測(cè)法原理

第一章緒論9小塊,并被氧化石墨烯釋放以恢復(fù)熒光(圖1-4)。該方法的檢出限約為50nM[62]。Liu的小組研究了三種不同長(zhǎng)度的胸腺染色DNA探針,并用氨基標(biāo)記了熒光探針的3"端以共價(jià)鍵結(jié)合氧化石墨烯。當(dāng)存在Hg2+時(shí),富含T的DNA與Hg2+結(jié)合形成雙鏈結(jié)構(gòu),并且通過(guò)分離氧化石....



本文編號(hào):4004164

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