a国产,中文字幕久久波多野结衣AV,欧美粗大猛烈老熟妇,女人av天堂

中國(guó)野生華東葡萄泛素連接酶基因VpRH2抗白粉病功能研究

發(fā)布時(shí)間:2017-12-14 08:39

  本文關(guān)鍵詞:中國(guó)野生華東葡萄泛素連接酶基因VpRH2抗白粉病功能研究


  更多相關(guān)文章: 中國(guó)野生華東葡萄 泛素連接酶 VpGRP2A基因 葡萄白粉病 抗病性


【摘要】:歐洲葡萄(Vitis vinifera L.)是世界上主要的栽培種,但是對(duì)白粉病抗性差;葡萄白粉病是嚴(yán)重影響歐洲葡萄生長(zhǎng)發(fā)育和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的主要因素之一。本研究課題組前期根據(jù)白河-35-1高抗白粉病的特性,接種白粉菌構(gòu)建了cDNA文庫(kù)。本研究以cDNA文庫(kù)中獲得的EST序列(GR883881)為基礎(chǔ),克隆了VpRH2的基因全長(zhǎng)及其啟動(dòng)子序列,篩選獲得了VpRH2的互作蛋白VpGRP2A,進(jìn)行了VpRH2和VpGRP2A的亞細(xì)胞定位分析和互作位置分析,將VpRH2在歐洲葡萄無(wú)核白中過(guò)表達(dá),并進(jìn)行了抗病性分析,主要研究結(jié)果如下:1.通過(guò)cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)獲得VpRH2基因全長(zhǎng),其開(kāi)放閱讀框(Open reading frame,ORF)為1164 bp,編碼387個(gè)氨基酸。經(jīng)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析,VpRH2含有RING-H2和跨膜結(jié)構(gòu)域,屬于ATL家族,與歐洲葡萄ATL20同源,氨基酸同源性為93.02%,其中154位氨基酸殘基的天冬氨酸為插入突變;在葡萄基因組網(wǎng)站預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn),VpRH2定位在第二條染色體上。2.通過(guò)對(duì)抗病葡萄白河-35-1和感病品種無(wú)核白接種白粉病進(jìn)行定量PCR分析表明,在抗病葡萄中VpRH2表達(dá)量升高,感病葡萄中Vv RH2表達(dá)量降低。亞細(xì)胞定位分析得出VpRH2定位在細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì),在ER、TGN/EE和內(nèi)膜組分中也有分布。ABA處理后,VpRH2的表達(dá)表現(xiàn)出下調(diào)趨勢(shì),經(jīng)SA和Me JA處理后表現(xiàn)出上調(diào)的趨勢(shì)。3.根據(jù)公布的葡萄基因組序列同源克隆獲得了VpRH2啟動(dòng)子序列,脅迫相關(guān)的順式作用元件ABRE、Box-W1、TC-rich repeats、TCA-element和TGACG-element等存在于啟動(dòng)子的各個(gè)區(qū)域,與歐洲葡萄Vv RH2啟動(dòng)子相比,存在較長(zhǎng)的3段缺失突變和一段插入突變。將VpRH2和Vv RH2的啟動(dòng)子構(gòu)建GUS融合載體,瞬時(shí)轉(zhuǎn)化歐洲葡萄佳利釀葉片,經(jīng)接種白粉菌、噴施Me JA、SA、ABA以及高溫和低溫等不同脅迫處理后進(jìn)行GUS染色和GUS蛋白定量,分析表明:經(jīng)白粉菌、Me JA和SA誘導(dǎo)處理后,VpRH2啟動(dòng)子與Vv RH2啟動(dòng)子啟動(dòng)活性均表現(xiàn)出了增長(zhǎng)的趨勢(shì),而VpRH2啟動(dòng)子受誘導(dǎo)更為顯著;在高溫處理后VpRH2和Vv RH2啟動(dòng)子都表現(xiàn)出了增長(zhǎng)的趨勢(shì),但Vv RH2啟動(dòng)子活性高于VpRH2啟動(dòng)子;兩個(gè)啟動(dòng)子啟動(dòng)活性在ABA處理后表現(xiàn)出下調(diào)的趨勢(shì)而對(duì)低溫脅迫處理不敏感。4.通過(guò)酵母雙雜交技術(shù)獲得VpRH2的互作蛋白VpGRP2A(Glycine-rich RNA-binding protein 2A),并通過(guò)雙分子熒光互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)(Bimolecular fluorescencecomplementation,Bi FC)驗(yàn)證得出互作發(fā)生在細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中。VpRH2和VpGRP2A通過(guò)26S蛋白酶體途徑降解,但是VpGRP2A的蛋白降解沒(méi)有受到VpRH2的明顯促進(jìn)。VpGRP2A能夠促進(jìn)VpRH2的表達(dá),同時(shí)VpGRP2A的表達(dá)受到VpRH2的抑制。5.中國(guó)野生華東葡萄VpGRP2A與歐洲葡萄Vv GRP2A表現(xiàn)出100%的同源性;通過(guò)對(duì)抗病葡萄白河-35-1和感病品種無(wú)核白接種白粉病進(jìn)行定量PCR分析表明,VpGRP2A和Vv GRP2A表現(xiàn)出相似的表達(dá)模式,均為接種白粉病后6~24 h內(nèi)表現(xiàn)出下調(diào)的趨勢(shì),而后趨于穩(wěn)定;VpGRP2A具有細(xì)胞核定位,在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、TGN/EE和內(nèi)膜組分中也有分布。VpGRP2A在ABA處理后上調(diào)表達(dá),在SA和Me JA處理后表現(xiàn)出下調(diào)的趨勢(shì)。6.轉(zhuǎn)基因OERH2葡萄表現(xiàn)出對(duì)白粉病增強(qiáng)的抗性,生長(zhǎng)初期表現(xiàn)出加速生長(zhǎng)的表型,同時(shí)在OERH2轉(zhuǎn)基因葡萄海綿組織細(xì)胞內(nèi)部有結(jié)構(gòu)變化,經(jīng)超薄切片觀察確認(rèn)為定位于液泡和液泡膜上高密度物質(zhì)。轉(zhuǎn)基因OERH2擬南芥表現(xiàn)出對(duì)擬南芥白粉菌增強(qiáng)的抗性和外源ABA增強(qiáng)的耐受性。綜上所述,中國(guó)野生華東葡萄泛素連接酶基因VpRH2具有抗葡萄白粉病菌的功能。
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:S436.631

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 高鵬;王躍進(jìn);;華東葡萄白河-35-1器官離體再生體系建立的研究[J];果樹(shù)學(xué)報(bào);2010年01期

2 石雪暉;陳祖玉;王先榮;楊國(guó)順;劉昆玉;倪建軍;;華東葡萄和里扎馬特的離體保存研究初報(bào)[J];中外葡萄與葡萄酒;2006年03期

3 周恒;龍政權(quán);龍香菊;萬(wàn)召娣;;生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)華東葡萄綠枝扦插生根效應(yīng)的研究[J];北方園藝;2010年18期

4 肖宇;張劍俠;周起;謝曉青;朱自果;王躍進(jìn);;中國(guó)野生華東葡萄芪合成酶基因啟動(dòng)子轉(zhuǎn)化番茄的研究[J];北方園藝;2013年01期

5 張建文;王躍進(jìn);朱自果;王沛雅;張朝紅;;中國(guó)野生華東葡萄抗霜霉病抑制消減文庫(kù)構(gòu)建及初步分析[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年03期

6 王浩;侯鴻敏;殷向靜;宋軍陽(yáng);王西平;;華東葡萄轉(zhuǎn)錄因子VpSBP3基因原核表達(dá)、純化及多克隆抗血清制備[J];果樹(shù)學(xué)報(bào);2013年05期

7 余義和;徐偉榮;李樹(shù)秀;黎濤;王躍進(jìn);;中國(guó)野生華東葡萄抗白粉病轉(zhuǎn)錄因子VpRFP1基因原核表達(dá)、純化及多克隆抗體制備[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2011年01期

8 趙莘;朱自果;徐炎;張朝紅;王躍進(jìn);;中國(guó)野生華東葡萄抗白粉病相關(guān)基因(VpUSP)克隆及表達(dá)分析[J];果樹(shù)學(xué)報(bào);2011年01期

9 武杰;曾愛(ài)玲;張軍科;;華東葡萄VpWDR基因的克隆、表達(dá)及亞細(xì)胞定位分析[J];果樹(shù)學(xué)報(bào);2013年03期

10 支玉璽;張劍俠;王躍進(jìn);;華東葡萄廣西-2花藥胚狀體誘導(dǎo)與再生植株的研究[J];果樹(shù)學(xué)報(bào);2010年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 余義和;徐偉榮;王躍進(jìn);;中國(guó)野生華東葡萄泛素連接酶基因UIRP1調(diào)控抗病功能研究[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)2013年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 王磊;中國(guó)野生華東葡萄泛素連接酶基因VpRH2抗白粉病功能研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2017年

2 余義和;中國(guó)野生華東葡萄泛素連接酶基因抗白粉病功能研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

3 徐偉榮;中國(guó)華東葡萄抗白粉病芪合成酶基因及啟動(dòng)子克隆與功能分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

4 劉林麗;中國(guó)野生華東葡萄抗白粉病芪合成酶基因體外表達(dá)分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

5 文穎強(qiáng);中國(guó)野生華東葡萄基因VpALDH2a功能分析與植物侵入后非寄主抗性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

6 李慧娥;中國(guó)野生華東葡萄抗白粉病株系白河-35-1轉(zhuǎn)錄因子基因(WRKY)表達(dá)與功能研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

7 徐炎;中國(guó)原產(chǎn)華東葡萄抗白粉病基因cDNA文庫(kù)構(gòu)建及其EST序列分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

8 朱自果;中國(guó)野生華東葡萄cDNA文庫(kù)測(cè)序及轉(zhuǎn)錄因子基因ERF和NAC功能分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張小瑩;中國(guó)野生華東葡萄抗白粉病相關(guān)基因Mlo和γVPE的克隆與表達(dá)分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

2 翁凱;白粉菌誘導(dǎo)華東葡萄‘白河-35-1’轉(zhuǎn)錄組分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

3 韓麗娟;華東葡萄‘白河-35-1’抗白粉病相關(guān)miRNA的鑒定[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

4 王辰;中國(guó)野生華東葡萄抗白粉病基因VpUIRP2和VpUIRP3的表達(dá)分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年

5 周邦軍;中國(guó)華東葡萄抗白粉病新基因原核表達(dá)與抗體制備[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

6 王歡;中國(guó)野生華東葡萄‘白河-35-1’抗白粉病相關(guān)基因表達(dá)分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2014年

7 鄒瑩;華東葡萄病程相關(guān)蛋白VpPR10s基因克隆與功能分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

8 趙莘;中國(guó)野生華東葡萄抗白粉病基因(VpUSP)克隆及表達(dá)分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

9 史江莉;白粉菌誘導(dǎo)的華東葡萄消減文庫(kù)構(gòu)建及其EST序列分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

10 許騰飛;華東葡萄白藜蘆醇—氧—甲基轉(zhuǎn)移酶基因(VpROMT)克隆與功能分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

,

本文編號(hào):1287267

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://www.wukwdryxk.cn/shoufeilunwen/nykjbs/1287267.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶eee44***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要?jiǎng)h除請(qǐng)E-mail郵箱bigeng88@qq.com
日本一卡二卡四卡无卡乱码视频免费 | 久久精品国产99国产电影网| A级毛片免费全部播放无码| 国产精品1| 日韩一区av| 日韩av在线一区| 激情欧美一区二区三区中文字幕| 91丨九色丨蝌蚪熟女露脸| 亚洲bbw| 欧美日韩国产专区一区二区| 久激情内射婷内射蜜桃| 亚洲精品无码成人| 又嫩又硬又黄又爽的视频| 亚洲精品一卡2卡3卡四卡乱码| 欧美激情综合| 天一影院| 综合影院| 三上悠亚在线播放| 夜夜骚av| 东乌| 色婷婷六月亚洲婷婷6月| av天天操| 亚洲一级| 1区3区4区产品乱入视频| 欧美一区二区三区视频在线观看 | 男女肉粗暴进来动态图| 久碰人妻人妻人妻人妻人掠| 美女高潮潮喷出白浆视频| 亚洲精品55夜色66夜色| 久久久久久综合岛国免费观看| 无码| 亚洲图片一区二区三区| 91撸色| 日韩精品福利| 欧美不卡一区二区| 国产精品人人爽人人做我的可爱| 天使色吧| 91精品国产日韩91久久久久久| 大洼县| 爱情岛亚洲av永久入口首页| 国产成人精品久久一区二区三区 |