HDAC6限制甲型流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
發(fā)布時間：2024-07-10 19:44
甲型流感病毒(Influenza A virus)屬于正黏病毒科,流感病毒屬。作為負鏈RNA病毒,具有易突變的特性。流感病毒RNA聚合酶,核蛋白以及病毒基因組組成核糖核蛋白復(fù)合體,是病毒基因轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的最基本單元,蛋白的翻譯后修飾在病毒的生命周期中起著非常重要的作用。HDAC6作為組蛋白去乙酰化酶,能夠通過調(diào)控微管蛋白的細胞骨架,介導(dǎo)抗病毒免疫應(yīng)答或者直接調(diào)控病毒蛋白參與各種病毒的生命周期。因此本研究從流感病毒與宿主蛋白HDAC6的互作出發(fā),發(fā)現(xiàn)了流感病毒RNA聚合酶復(fù)合體PA蛋白的乙�；揎棇酆厦富钚阅酥敛《净驈�(fù)制與轉(zhuǎn)錄的影響,為研究蛋白修飾對流感病毒以及其它病毒RNA聚合酶的調(diào)節(jié)作用提供參考。1.HDAC6與流感病毒RNA聚合酶相互作用流感病毒利用宿主細胞內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)以及通過劫持宿主蛋白來維持自身的生命活動。宿主蛋白HDAC6通過調(diào)控微管蛋白的乙�；癄顟B(tài)抑制流感病毒蛋白的運輸,而流感病毒則利用HDAC6介導(dǎo)的聚集體的形成促進自身的脫殼過程,在此過程中,基質(zhì)蛋白M1,核蛋白NP能與HDAC6相互作用。而核蛋白NP與RNA聚合酶復(fù)合體緊密聯(lián)系在一起,所以本研究通過免疫共沉淀,GST...
【文章頁數(shù)】：116 頁
【學(xué)位級別】：博士
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞(Abbreviations)
第一章 文獻綜述
1.1 甲型流感病毒
1.1.1 甲型流感病毒的形態(tài)學(xué)特征
1.1.2 甲型流感病毒蛋白
1.1.3 甲型流感病毒的復(fù)制周期
1.1.4 抗甲型流感病毒藥物
1.1.5 甲型流感病毒感染過程中產(chǎn)生的免疫反應(yīng)
1.1.6 流感病毒與宿主的互作
1.2 組蛋白去乙酰化酶HDAC6的研究進展
1.2.1 組蛋白去乙�；�(HDACs)的分類
1.2.2 組蛋白去乙酰化酶HDAC6的結(jié)構(gòu)與生理功能
1.2.3 組蛋白去乙�；窰DAC6的活性調(diào)節(jié)
1.2.4 蛋白的乙�；揎�
1.2.5 HDAC6與應(yīng)激顆粒
1.2.6 HDAC6與聚集體和自噬的產(chǎn)生
1.2.7 HDAC6與病毒
1.3 本研究的目的和意義
參考文獻
第二章 HDAC6與流感病毒RNA聚合酶相互作用
1. 材料與方法
1.1 細胞系和病毒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3 主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 質(zhì)粒的構(gòu)建
1.6 免疫共沉淀試驗
1.7 GST pull-down試驗
1.8 共聚焦免疫熒光試驗
2. 結(jié)果
2.1 HDAC6與流感病毒RNA聚合酶復(fù)合體互作
2.2 HDAC6對流感病毒RNA聚合酶蛋白的調(diào)控作用
2.3 HDAC6與病毒蛋白PA直接結(jié)合
2.4 HDAC6與病毒蛋白PA在細胞質(zhì)中共定位
3. 討論
參考文獻
第三章 HDAC6使PA去乙�；源龠MPA蛋白的降解
1. 材料與方法
1.1 細胞系和質(zhì)粒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3 主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 乙�；头核鼗稽c的質(zhì)譜鑒定
1.6 HDAC6以及PA突變體的構(gòu)建
1.7 病毒蛋白PA及其突變體蛋白穩(wěn)定性的測定
2. 結(jié)果
2.1 HDAC6介導(dǎo)PA蛋白的降解依賴于其去乙�；富钚�
2.2 病毒蛋白PA乙�；稽c和泛素化位點的質(zhì)譜鑒定
2.3 HDAC6能介導(dǎo)病毒蛋白PA 664位賴氨酸的去乙�；�
2.4 PA蛋白664位賴氨酸的乙酰化與其蛋白穩(wěn)定性有關(guān)
3. 討論
參考文獻
第四章 HDAC6抑制流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
1. 材料與方法
1.1 細胞系和質(zhì)粒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3 主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 普通RT-PCR
1.6 Q-RT-PCR
1.7 流式細胞技術(shù)分析感染病毒的細胞量
1.8 TCID50測定流感病毒滴度
2. 結(jié)果
2.1 HDAC6選擇性抑制劑Tubacin能促進流感病毒的釋放
2.2 過表達HDAC6能下調(diào)流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制水平
2.3 過表達HDAC6抑制流感病毒的增殖
3. 討論
參考文獻
第五章 抑制HDAC6促進流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
1. 材料與方法
1.1 細胞系和質(zhì)粒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3 主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 MTT試驗檢測細胞增殖及細胞毒性
1.6 干擾RNA的轉(zhuǎn)染
2. 結(jié)果
2.1 MTT試驗檢測HDAC6選擇性抑制劑Tubacin對細胞增殖的影響
2.2 HDAC6選擇性抑制劑Tubacin能促進流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
2.3 HDAC6選擇性抑制劑Tubacin能促進流感病毒增殖
2.4 沉默HDAC6的表達能促進流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
3. 討論
參考文獻
第六章 HDAC6抑制流感病毒RNA聚合酶活性
1. 材料與方法
1.1 細胞系和質(zhì)粒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 Mini-genome試驗檢測流感病毒的RNA聚合酶活性
2. 結(jié)果
2.1 Mini-genome試驗檢測HDAC6對流感病毒的RNA聚合酶活性的調(diào)節(jié)
2.2 免疫印跡試驗檢測HDAC6對流感病毒RNA聚合酶活性的調(diào)節(jié)
3. 討論
參考文獻
全文總結(jié)
本論文創(chuàng)親斤點
科研成果
致謝
本文編號：4004636
【文章頁數(shù)】：116 頁
【學(xué)位級別】：博士
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞(Abbreviations)
第一章 文獻綜述
1.1 甲型流感病毒
1.1.1 甲型流感病毒的形態(tài)學(xué)特征
1.1.2 甲型流感病毒蛋白
1.1.3 甲型流感病毒的復(fù)制周期
1.1.4 抗甲型流感病毒藥物
1.1.5 甲型流感病毒感染過程中產(chǎn)生的免疫反應(yīng)
1.1.6 流感病毒與宿主的互作
1.2 組蛋白去乙酰化酶HDAC6的研究進展
1.2.1 組蛋白去乙�；�(HDACs)的分類
1.2.2 組蛋白去乙酰化酶HDAC6的結(jié)構(gòu)與生理功能
1.2.3 組蛋白去乙�；窰DAC6的活性調(diào)節(jié)
1.2.4 蛋白的乙�；揎�
1.2.5 HDAC6與應(yīng)激顆粒
1.2.6 HDAC6與聚集體和自噬的產(chǎn)生
1.2.7 HDAC6與病毒
1.3 本研究的目的和意義
參考文獻
第二章 HDAC6與流感病毒RNA聚合酶相互作用
1. 材料與方法
1.1 細胞系和病毒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3 主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 質(zhì)粒的構(gòu)建
1.6 免疫共沉淀試驗
1.7 GST pull-down試驗
1.8 共聚焦免疫熒光試驗
2. 結(jié)果
2.1 HDAC6與流感病毒RNA聚合酶復(fù)合體互作
2.2 HDAC6對流感病毒RNA聚合酶蛋白的調(diào)控作用
2.3 HDAC6與病毒蛋白PA直接結(jié)合
2.4 HDAC6與病毒蛋白PA在細胞質(zhì)中共定位
3. 討論
參考文獻
第三章 HDAC6使PA去乙�；源龠MPA蛋白的降解
1. 材料與方法
1.1 細胞系和質(zhì)粒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3 主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 乙�；头核鼗稽c的質(zhì)譜鑒定
1.6 HDAC6以及PA突變體的構(gòu)建
1.7 病毒蛋白PA及其突變體蛋白穩(wěn)定性的測定
2. 結(jié)果
2.1 HDAC6介導(dǎo)PA蛋白的降解依賴于其去乙�；富钚�
2.2 病毒蛋白PA乙�；稽c和泛素化位點的質(zhì)譜鑒定
2.3 HDAC6能介導(dǎo)病毒蛋白PA 664位賴氨酸的去乙�；�
2.4 PA蛋白664位賴氨酸的乙酰化與其蛋白穩(wěn)定性有關(guān)
3. 討論
參考文獻
第四章 HDAC6抑制流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
1. 材料與方法
1.1 細胞系和質(zhì)粒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3 主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 普通RT-PCR
1.6 Q-RT-PCR
1.7 流式細胞技術(shù)分析感染病毒的細胞量
1.8 TCID50測定流感病毒滴度
2. 結(jié)果
2.1 HDAC6選擇性抑制劑Tubacin能促進流感病毒的釋放
2.2 過表達HDAC6能下調(diào)流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制水平
2.3 過表達HDAC6抑制流感病毒的增殖
3. 討論
參考文獻
第五章 抑制HDAC6促進流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
1. 材料與方法
1.1 細胞系和質(zhì)粒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3 主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 MTT試驗檢測細胞增殖及細胞毒性
1.6 干擾RNA的轉(zhuǎn)染
2. 結(jié)果
2.1 MTT試驗檢測HDAC6選擇性抑制劑Tubacin對細胞增殖的影響
2.2 HDAC6選擇性抑制劑Tubacin能促進流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
2.3 HDAC6選擇性抑制劑Tubacin能促進流感病毒增殖
2.4 沉默HDAC6的表達能促進流感病毒基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
3. 討論
參考文獻
第六章 HDAC6抑制流感病毒RNA聚合酶活性
1. 材料與方法
1.1 細胞系和質(zhì)粒等相關(guān)材料
1.2 相關(guān)試劑
1.3主要儀器
1.4 溶液的配制
1.5 Mini-genome試驗檢測流感病毒的RNA聚合酶活性
2. 結(jié)果
2.1 Mini-genome試驗檢測HDAC6對流感病毒的RNA聚合酶活性的調(diào)節(jié)
2.2 免疫印跡試驗檢測HDAC6對流感病毒RNA聚合酶活性的調(diào)節(jié)
3. 討論
參考文獻
全文總結(jié)
本論文創(chuàng)親斤點
科研成果
致謝
本文編號：4004636
本文鏈接：http://www.wukwdryxk.cn/shoufeilunwen/nykjbs/4004636.html
上一篇：OBP-4抗艱難梭菌活性評價及其在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學(xué)研究
下一篇：沒有了
下一篇：沒有了
最近更新
教材專著
