發(fā)布時(shí)間：2024-11-02 11:25

　　背景/目的:線粒體谷胱甘肽（mitochondrial glutathione,mGSH）作為一種細(xì)胞抗氧化劑,對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮（human retinal pigment epithelium,hRPE）細(xì)胞的功能具有重要保護(hù)作用。雖然,目前對(duì)mGSH的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制尚未完全了解,但以往的研究表明,位于線粒體內(nèi)膜的2-氧戊二酸酯（OGC;SLC25A11）和二羧酸鹽（DIC;SLC25A10）作為mGSH轉(zhuǎn)運(yùn)體,在肝、腎和肺組織細(xì)胞中發(fā)揮重要作用。本課題主要研究OGC和DIC在hRPE細(xì)胞中的表達(dá)及定位特性,在氧化應(yīng)激狀態(tài)下的表達(dá)變化、對(duì)細(xì)胞凋亡的影響,以及參與調(diào)節(jié)細(xì)胞mGSH平衡的作用。方法:通過免疫印跡和共聚焦顯微鏡觀察OGC和DIC在非極化、極化hRPE細(xì)胞以及小鼠視網(wǎng)膜中的表達(dá)和定位特性。分別用H₂O₂、琥珀酸苯基酯（phenylsuccinate,PS）或丙二酸丁酯（butylmalonate,BM）作用于hRPE細(xì)胞24小時(shí),觀察在不同時(shí)間、不同劑量刺激條件下,OGC和DIC的表達(dá)變化情況。通過測定抑制OGC或DIC后,細(xì)胞凋亡（TU...

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文29圖1.OGC和DIC在人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞中表達(dá)OGC和DIC在hRPE細(xì)胞的基因和蛋白質(zhì)水平顯著表達(dá)。圖1A，hRPE細(xì)胞中OGC和DIC在mRNA水平表達(dá)。利用兩個(gè)供體來源的RPE細(xì)胞，RPE1來自供體M，RPE2來自供體N，neg：陰性對(duì)照。圖1....

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文30圖2.OGC和DIC在人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞中的定位OGC和DIC在hRPE細(xì)胞中的免疫熒光染色的共聚焦圖像。圖2A、B第一行圖分別表示細(xì)胞中的OGC和DIC（綠色熒光標(biāo)記）與線粒體（Mitotracker，紅色熒光標(biāo)記）共染色，其中細(xì)胞核用DAPI復(fù)染....

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文32圖3.極化狀態(tài)對(duì)hRPE細(xì)胞中OGC和DIC表達(dá)的影響及ZO-1蛋白的變化極性狀態(tài)對(duì)hRPE細(xì)胞中OGC和DIC表達(dá)的影響，ZO-1熒光染色的圖像顯示細(xì)胞間緊密連接。Westernblot分析顯示，極化較非極化的RPE細(xì)胞中OGC和DIC的表達(dá)均明顯增....

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文34圖4.H2O2誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激條件下OGC和DIC的表達(dá)變化暴露于H2O2的hRPE細(xì)胞中OGC和DIC蛋白表達(dá)呈劑量和時(shí)間依賴性降低。給予不同濃度的H2O2（50，100，200，300μM）處理hRPE細(xì)胞24小時(shí)（圖A、B，E、F）；同時(shí)觀察200....

本文編號(hào)：4009519