發(fā)布時間：2024-12-21 02:56

　　背景和目的:骨質(zhì)疏松癥是代謝性骨病變,主要特征是骨組織量減少及骨微結(jié)構(gòu)退化,骨質(zhì)疏松可增加骨脆性和骨折。然而,骨質(zhì)疏松癥的分子機制仍不明確。糖皮質(zhì)激素直接作用于成骨細胞,導致成骨細胞產(chǎn)生量減少,并引起成骨細胞凋亡。長鏈非編碼RNA(LncRNA)已成為控制基因表達和影響多種生物過程的重要表觀遺傳調(diào)節(jié)因子。越來越多的證據(jù)表明LncRNA參與骨重塑,與骨質(zhì)疏松的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。人成骨細胞中,地塞米松(Dex)處理導致顯著的細胞毒性。LncRNA EPIC1(Lnc-EPIC1)是與Myc直接作用的LncRNA。本論文主要檢測了 Lnc-EPIC1對Dex誘導的人成骨細胞損傷的潛在影響及機制研究。研究方法和內(nèi)容:在OB-6人成骨細胞株和原代人成骨細胞中,通過慢病毒包裹Lnc-EPIC1 載體(“LV-EPIC1”)過表達 Lnc-EPIC1;并通過 siRNA 手段沉默 Lnc-EPIC1的表達。上述細胞用Dex處理后,用實時定量聚合酶鏈反應(qPCR)檢測Lnc-EPIC1的表達;通過MTT(3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2H-四唑溴化物)法、乳酸脫氫酶(LDH)法...

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．?ＯＢ－６成骨細胞中地塞米松處理增加ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣ１的表達??用慢病毒包裹的?Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ?表達載體（ｐＬｅｎｔｉ６－ｐｕｒｏ－ＧＦＰ－Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ，??

ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣ１保護成骨細胞免受地塞米松損傷?第一部分??本課題中，我們首先檢測了地塞米松（Ｄｅｘ）對Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ表達的潛在影響。在??ＯＢ－６［１９，２８－３０］人成骨細胞株中，Ｄｅｘ處理（ｌｆｉＭ，?２４小時）后，Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ表達增??加超過一倍（圖１）。....

圖２．?ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣｌ過表達顯著抑制地塞米松誘導的ＯＢ－６成骨細胞死亡??用慢病毒包裹的?Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ?表達載體（ｐＬｅｎｔｉ６－ｐｕｒｏ－ＧＦＰ－Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ，??

第一部分?ＬｎｃＲＮＡＥＰＩＣｌ保護成骨細胞免受地塞米松損傷??胞存活率（ＭＴＴＯＤ，圖２Ａ）顯著下降，而細胞死亡（ＬＤＨ釋放，圖２Ｂ）顯著增加；??而兩株ＬＶ－ＥＰＩＣ１過表達的０Ｂ－６成骨細胞中（見圖１），Ｄｅｘ?（ｌ｜ｉＭ，２４小時）誘導??的存活率下降（圖２Ａ）和死亡（圖....

圖３．?ＯＢ－６成骨細胞屮，ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣ１過及達Ｖ著抑制地寒米松誘導的??Ｃａｓｐａｓｅ－３??

ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣ１保護成骨細胞免受地塞米松損傷?第一部分??ＬＶ－ＥＰＩＣ１對０Ｂ－６細胞Ｃａｓｐａｓｅ－３的活化無顯著作用（圖３Ａ和Ｂ）。因此，０Ｂ－６成??骨細胞中，ＬｎｃＲＮＡＥＰＩＣｌ過表達顯著抑制Ｄｅｘ誘導的Ｃａｓｐａｓｅ－３活化。??Ａ．?Ｂ．??ＯＢ－６?ｃｅ....

圖４．?ＯＢ－６成骨細胞中，ＬｎｃＲＮＡＥＰＩＣ１過表達顯著抑制地塞米松誘導的細胞凋亡－１??用慢病毒包裹的Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ表達載體（ｐＬｅｎｔｉ６－ｐｕｒｏ－ＧＦＰ－Ｌｎｃ－ＥＰ丨Ｃ１，??

受地塞米松損傷??Ａ．?ＯＢ－６?ｃｅｌｌｓ?Ｂ．?ＯＢ－６?ｃｅｌｌｓ?＃??Ｑ?１?２］ｃｉＶｅｃｔｏｒ?—－—?°＇５］ａ?Ｖｅｃｔｏｒ?ｆ?＾??〇?Ｓ?圈?ｌｖ－ｅＰＩＣ１（Ｌ１）?１??＜?ＢＬＶ－ｈＨＩＵＴ?（Ｌ２）?＾?Ｏ?Ｑ４?ｂＬＶ－ＥＰＩＣＩ?（Ｌ２）??§....

本文編號：4018284