發(fā)布時(shí)間：2017-12-25 03:09

  本文關(guān)鍵詞：NO在硝酸鹽脅迫下番茄中的作用及SlGSNOR的功能分析　出處：《昆明理工大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：土壤次生鹽堿化作為一個(gè)全球性問題,嚴(yán)重制約著設(shè)施蔬菜的可持續(xù)發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn),鹽漬化的設(shè)施土壤中存在的陰離子主要是NO3-,陽離子主要有K+和Ca2+。一氧化氮(NO)是一種重要作用的信號(hào)分子。植物細(xì)胞中的NO能夠與還原性谷胱甘肽(GSH)生成S-亞硝基谷胱甘肽(GSNO)。GSNO是植物體內(nèi)NO的存儲(chǔ)庫。S-亞硝基谷胱甘肽還原酶(GSNOR)能夠催化GSNO生成氧化型谷胱甘肽(GSSG)和NH3。本論文主要對(duì)外源施加的NO在硝酸鹽脅迫下對(duì)番茄幼苗根系的影響和過表達(dá)SlGSNOR的轉(zhuǎn)基因番茄和煙草的抗鹽作用進(jìn)行研究,取得結(jié)果如下:1.研究了外源施加NO(供體SNP和GSNO)對(duì)硝酸鹽脅迫下番茄幼苗根系的影響。與正常培養(yǎng)的番茄相比,100 mM硝酸鹽脅迫條件下,番茄根系的H202、MDA和ROS含量均顯著上升,抗氧化物酶(SOD、POD、CAT、APX和GR)活性和抗氧化物(AsA和GSH)含量顯著降低;添加(0.05,0.1,0.3,0.5,1mM)SNP 和(0.05,0.1,0.3,0.5mM)GSNO,H202、MDA 和 ROS 含量均顯著降低,抗氧化物酶活性和抗氧化物含量顯著增加,尤其是添加0.1 mM的SNP和0.3 mM的GSNO。與正常的番茄幼苗相比,硝酸鹽脅迫下,NO和S-亞硝基硫醇(SNO)含量增加,施加SNP和GSNO濃度越高,NO含量越高。添加不同濃度SNP和GSNO其含量均顯著降低,尤其是添加0.1 mM的SNP和0.3 mM的GSNO。硝酸鹽脅迫條件下,添加0.1 mM的SNP和0.1 mM cPTIO,以上生理指標(biāo)與硝酸鹽處理無顯著差異。2.利用qRT-PCR分析了 GSNOR的表達(dá)特性。硝酸鹽脅迫下,GSNOR的表達(dá)量顯著降低;外源施加不同濃度的SNP和GSNO,其表達(dá)量顯著上升,其中添加0.1 mM的SNP和0.3 mM的GSNO,GSNOR的表達(dá)量最高。100 mM氯化鈉脅迫下,GSNOR的表達(dá)量呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢,在6 h的表達(dá)量最高。3.對(duì)SlGSNOR過表達(dá)轉(zhuǎn)基因番茄和煙草在鹽脅迫下進(jìn)行了功能分析。首先進(jìn)行基因組、qRT-PCR和western blot分析表明我們獲得了 SlGSNOR過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因番茄和煙草。對(duì)SlGSNOR過表達(dá)轉(zhuǎn)基因番茄進(jìn)行硝酸鹽(100 mM)和NaCl(100nM)處理1和3天后進(jìn)行生理生化分析。結(jié)果表明:正常條件下,轉(zhuǎn)基因株系的H2O2和MDA含量、抗氧化酶活性、抗氧化物含量、SNO含量與野生型無顯著差異,GSNOR活性顯著高于野生型;硝酸鹽和NaCl脅迫條件下,轉(zhuǎn)番茄和煙草株系的H202、MDA和SNO含量顯著低于野生型,抗氧化酶、GSNOR活性和抗氧化物含量顯著高于野生型。此外,過表達(dá)SlGSNOR增加了轉(zhuǎn)基因煙草種子在硝酸鹽脅迫下的發(fā)芽率。以上結(jié)果表明過表達(dá)SlGSVOR增強(qiáng)了番茄和煙草耐鹽性。
【學(xué)位授予單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：Q943.2;S641.2

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1 鄭攀;NO在硝酸鹽脅迫下番茄中的作用及SlGSNOR的功能分析[D];昆明理工大學(xué);2017年

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本文編號(hào)：1331090