姬松茸高產維生素B 12 菌株的選育
發(fā)布時間：2020-12-06 11:58
姬松茸食藥用價值豐富、栽培效益可觀、有利于資源循環(huán)利用,發(fā)展前景廣闊。但國內種質資源缺乏,因此進行姬松茸育種研究十分必要。隨著社會發(fā)展素食者不斷增多,而素食者普遍缺乏維生素B12。據(jù)此,本研究以姬松茸JS01為試驗材料,分別獲取其原生質體和孢子,并通過紫外誘變試驗、誘變菌株的篩選和鑒定試驗、栽培試驗等,以期獲得高產維生素B12的姬松茸菌株,研究結果如下:1.通過單因素試驗以及正交實驗,利用SPSS 22.0軟件進行分析,對姬松茸原生質體的制備及再生條件進行優(yōu)化。結果表明原生質體最佳制備條件為:菌齡7 d,以0.6mol·L-1 KCl作滲透壓穩(wěn)定劑,溶壁酶濃度1.5%,酶解溫度30℃,酶解時間4.0 h,pH6.0,在此條件下原生質體產量高達1.97×107個·mL-1;菌齡6 d,以0.6 mol·L-1 MgSO4作滲透壓穩(wěn)定劑,溶壁酶濃度2.0%,酶解溫度30℃,酶解時間3.0 h,pH 6.5,再生培養(yǎng)基為GM時,原生質體的再...
【文章來源】：陜西理工大學陜西省
【文章頁數(shù)】：73 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
拮抗試驗結果
陜西理工大學碩士學位論文32圖3-3拮抗試驗結果Fig.3-3Antagonismtestresults3.3.3高效液相檢測結果3.3.3.1色譜條件選擇據(jù)文獻報道，維生素B12在361nm處紫外吸收強度最大，且吸收峰干擾因素少[102]，因此試驗中紫外檢測器波長設置為361nm。酸性條件下維生素B12比較穩(wěn)定，且磷酸鹽對色譜柱有一定改性作用，因此用磷酸調節(jié)水相pH，并加入NaH2PO4緩沖，結果峰形對稱且分離度高。3.3.3.2線性關系圖3-5為測定維生素B12的標準曲線，其線性回歸方程為Y=13.387X+0.7609（R2=0.9994），維生素B12在0.1μg·mL-1~10.0μg·mL-1范圍內的線性關系良好。圖3-4維生素B12標準品液相色譜圖Fig.3-4LiquidchromatogramofvitaminB12standard時間（min）峰面積（mAU）時間（min）峰面積（mAU）6.200時間/min峰面積/mAU6.200
第3章姬松茸高產維生素B12菌株的誘變及選育35（a）（b）圖3-6菌絲體維生素B12含量液相色譜圖Fig.3-6LiquidchromatogramofvitaminB12contentinmycelium表3-7菌絲生長速度比較Tab.3-7Comparisonofthegrowthrateofmycelium菌株菌絲生長速度Mycelialgrowthrate/（cm·d-1）Strains第1代第5代第10代JS010.2450.2250.200BUV-50.2100.2050.185BUV-160.2300.2150.1903.3.4分子鑒定結果3.3.4.1PCR凝膠電泳結果圖3-7為擴增ITS序列結果，從結果可以看出，本次實驗擴增出單一且明亮的條帶，同時該條帶位置位于750bp左右，與預期結果一致，因此可以用于后續(xù)測序實驗。峰面積/mAU時間/min6.422峰面積/mAU時間/min（min）6.485
【參考文獻】：
期刊論文
[1]姬松茸原生質體制備及再生條件優(yōu)化[J]. 鄒彰毅,鄧百萬. 北方園藝. 2020(03)
[2]英媒：素食者應補充維生素B12[J]. 中國食品學報. 2020(01)
[3]2019年中國維生素產業(yè)透視[J]. 柳曉峰. 中國畜牧雜志. 2020(01)
[4]食用菌分子育種研究進展[J]. 張妍,黃晨陽,高巍. 菌物研究. 2019(04)
[5]高效液相色譜法測定強化食品中維生素B6的含量[J]. 劉桂果,王浩淼,李佳慧,李嘉禹,夏然. 食品安全質量檢測學報. 2019(21)
[6]β-欖香烯與姬松茸萃取物的抗腫瘤作用和藥理學研究[J]. 薛天樂,王慶,孫守國,劉耀武. 中國食用菌. 2019(11)
[7]2種微生物法測定嬰幼兒乳粉中維生素B5含量的比較[J]. 黃鐘標,吳思敏,鄭思珩,嚴家俊. 食品安全質量檢測學報. 2019(14)
[8]高精度定量毛細管電泳法同時測定復合維生素B片中B1、B2、B6、煙酰胺及泛酸鈣[J]. 胡雯雯,陶建偉,王慶偉,李靜,閻超,許旭. 色譜. 2019(06)
[9]B族維生素檢測方法及其使用[J]. 王丹,朱小梅. 食品安全導刊. 2019(15)
[10]育秧大棚栽培姬松茸技術[J]. 郭煒,于洪久,張楠,鐘鵬,孫彬,左辛,劉杰. 黑龍江農業(yè)科學. 2019(05)
碩士論文
[1]適于河南省栽培的高溫平菇品種的選育[D]. 姜婷.河南科技學院 2019
[2]三種食用菌子實體的營養(yǎng)成分及抗氧化性分析[D]. 景彥萍.山西大學 2019
[3]金針菇與巨大口蘑原生質體融合育種研究[D]. 鄭錦榮.華南農業(yè)大學 2016
[4]玉蕈與金針菇原生質體融合研究[D]. 王國正.天津師范大學 2016
[5]印度塊菌與赤芝原生質體融合研究[D]. 馬欣燕.天津師范大學 2016
[6]九種常用維生素治療性、診斷性監(jiān)測和臨床應用研究[D]. 王乃東.山東大學 2015
[7]姬松茸液體發(fā)酵及其保肝膠囊的制備[D]. 王航.山東中醫(yī)藥大學 2015
[8]單孢雜交選育草菇耐低溫高產新菌株[D]. 林鋒.上海海洋大學 2015
[9]營養(yǎng)素補充劑類保健食品中維生素類成分檢測方法研究[D]. 邢亞東.安徽中醫(yī)藥大學 2015
[10]巴氏蘑菇多糖降血糖機制的研究[D]. 歐陽玉倩.山西農業(yè)大學 2014
本文編號：2901324
【文章來源】：陜西理工大學陜西省
【文章頁數(shù)】：73 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
拮抗試驗結果
陜西理工大學碩士學位論文32圖3-3拮抗試驗結果Fig.3-3Antagonismtestresults3.3.3高效液相檢測結果3.3.3.1色譜條件選擇據(jù)文獻報道，維生素B12在361nm處紫外吸收強度最大，且吸收峰干擾因素少[102]，因此試驗中紫外檢測器波長設置為361nm。酸性條件下維生素B12比較穩(wěn)定，且磷酸鹽對色譜柱有一定改性作用，因此用磷酸調節(jié)水相pH，并加入NaH2PO4緩沖，結果峰形對稱且分離度高。3.3.3.2線性關系圖3-5為測定維生素B12的標準曲線，其線性回歸方程為Y=13.387X+0.7609（R2=0.9994），維生素B12在0.1μg·mL-1~10.0μg·mL-1范圍內的線性關系良好。圖3-4維生素B12標準品液相色譜圖Fig.3-4LiquidchromatogramofvitaminB12standard時間（min）峰面積（mAU）時間（min）峰面積（mAU）6.200時間/min峰面積/mAU6.200
第3章姬松茸高產維生素B12菌株的誘變及選育35（a）（b）圖3-6菌絲體維生素B12含量液相色譜圖Fig.3-6LiquidchromatogramofvitaminB12contentinmycelium表3-7菌絲生長速度比較Tab.3-7Comparisonofthegrowthrateofmycelium菌株菌絲生長速度Mycelialgrowthrate/（cm·d-1）Strains第1代第5代第10代JS010.2450.2250.200BUV-50.2100.2050.185BUV-160.2300.2150.1903.3.4分子鑒定結果3.3.4.1PCR凝膠電泳結果圖3-7為擴增ITS序列結果，從結果可以看出，本次實驗擴增出單一且明亮的條帶，同時該條帶位置位于750bp左右，與預期結果一致，因此可以用于后續(xù)測序實驗。峰面積/mAU時間/min6.422峰面積/mAU時間/min（min）6.485
【參考文獻】：
期刊論文
[1]姬松茸原生質體制備及再生條件優(yōu)化[J]. 鄒彰毅,鄧百萬. 北方園藝. 2020(03)
[2]英媒：素食者應補充維生素B12[J]. 中國食品學報. 2020(01)
[3]2019年中國維生素產業(yè)透視[J]. 柳曉峰. 中國畜牧雜志. 2020(01)
[4]食用菌分子育種研究進展[J]. 張妍,黃晨陽,高巍. 菌物研究. 2019(04)
[5]高效液相色譜法測定強化食品中維生素B6的含量[J]. 劉桂果,王浩淼,李佳慧,李嘉禹,夏然. 食品安全質量檢測學報. 2019(21)
[6]β-欖香烯與姬松茸萃取物的抗腫瘤作用和藥理學研究[J]. 薛天樂,王慶,孫守國,劉耀武. 中國食用菌. 2019(11)
[7]2種微生物法測定嬰幼兒乳粉中維生素B5含量的比較[J]. 黃鐘標,吳思敏,鄭思珩,嚴家俊. 食品安全質量檢測學報. 2019(14)
[8]高精度定量毛細管電泳法同時測定復合維生素B片中B1、B2、B6、煙酰胺及泛酸鈣[J]. 胡雯雯,陶建偉,王慶偉,李靜,閻超,許旭. 色譜. 2019(06)
[9]B族維生素檢測方法及其使用[J]. 王丹,朱小梅. 食品安全導刊. 2019(15)
[10]育秧大棚栽培姬松茸技術[J]. 郭煒,于洪久,張楠,鐘鵬,孫彬,左辛,劉杰. 黑龍江農業(yè)科學. 2019(05)
碩士論文
[1]適于河南省栽培的高溫平菇品種的選育[D]. 姜婷.河南科技學院 2019
[2]三種食用菌子實體的營養(yǎng)成分及抗氧化性分析[D]. 景彥萍.山西大學 2019
[3]金針菇與巨大口蘑原生質體融合育種研究[D]. 鄭錦榮.華南農業(yè)大學 2016
[4]玉蕈與金針菇原生質體融合研究[D]. 王國正.天津師范大學 2016
[5]印度塊菌與赤芝原生質體融合研究[D]. 馬欣燕.天津師范大學 2016
[6]九種常用維生素治療性、診斷性監(jiān)測和臨床應用研究[D]. 王乃東.山東大學 2015
[7]姬松茸液體發(fā)酵及其保肝膠囊的制備[D]. 王航.山東中醫(yī)藥大學 2015
[8]單孢雜交選育草菇耐低溫高產新菌株[D]. 林鋒.上海海洋大學 2015
[9]營養(yǎng)素補充劑類保健食品中維生素類成分檢測方法研究[D]. 邢亞東.安徽中醫(yī)藥大學 2015
[10]巴氏蘑菇多糖降血糖機制的研究[D]. 歐陽玉倩.山西農業(yè)大學 2014
本文編號：2901324
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