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雜交構(gòu)樹UDP-葡萄糖脫氫酶基因編碼蛋白的亞細(xì)胞定位及其啟動(dòng)子5′端缺失片段的功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-07-20 21:23
  為了研究雜交構(gòu)樹UDP-葡萄糖脫氫酶基因(DDBJ,BpUGDH基因登錄號(hào)為L(zhǎng)C457701)啟動(dòng)子不同區(qū)域的表達(dá)活性,利用5′端缺失及同源重組實(shí)驗(yàn)技術(shù),將5個(gè)不同長(zhǎng)度的bpUGDH啟動(dòng)子5′端缺失片段與GUS基因連接,并通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法瞬時(shí)轉(zhuǎn)化煙草;同時(shí),為了定位BpUGDH基因編碼的蛋白在細(xì)胞中表達(dá)的具體位置,利用GFP報(bào)告基因融合目的基因進(jìn)行蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞定位。結(jié)果顯示:BpUGDH基因啟動(dòng)子-244 bp以內(nèi)的序列均能介導(dǎo)GUS基因的誘導(dǎo)表達(dá),并且-973、-465、-355、-281和-244 bp之間的區(qū)域可能對(duì)BpUGDH基因啟動(dòng)子的活性發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。另外,BpUGDH基因編碼蛋白的亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示:BpUGDH位于葉綠體中。 

【文章來源】:植物研究. 2020,40(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:11 頁

【部分圖文】:

雜交構(gòu)樹UDP-葡萄糖脫氫酶基因編碼蛋白的亞細(xì)胞定位及其啟動(dòng)子5′端缺失片段的功能分析


Pro.Bp UGDH的5"端缺失片段的克隆

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Pro.Bp UGDH 5"端缺失片段在煙草葉片GUS活性趨勢(shì)為:先顯著下降(PB2-ETH、PB3-Me JA、PB4-低溫),最后PB5-IAA、PB6-GA缺失區(qū)域均顯著上升。這些現(xiàn)象表明,在Bp UGDH基因啟動(dòng)子-1 304~-244區(qū)域不存在負(fù)調(diào)控元件,此區(qū)域間的ETH、Me JA、低溫、GA、IAA等順式作用元件對(duì)調(diào)控Pro.Bp UGDH的活性可能發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。圖3 Pro.Bp UGDH 5"端缺失片段在煙草葉片中的GUS活性分析

載體,細(xì)胞,煙草,缺失


Pro.Bp UGDH 5"端缺失片段在煙草葉片中的GUS活性分析

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
[1]興安落葉松尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶基因的克隆及特性分析[D]. 郭秀.內(nèi)蒙古大學(xué) 2017
[2]興安落葉松UDP-葡萄糖焦磷酸化酶和UDP-葡萄糖脫氫酶基因的克隆及特性分析[D]. 李寧寧.內(nèi)蒙古大學(xué) 2014



本文編號(hào):3293627

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