發(fā)布時間：2025-02-08 10:25

　　 目的探討氧化低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗體(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗體)復合物對大鼠血管平滑肌A7r5細胞鈣化、炎癥因子表達的影響以及Toll樣受體4(TLR4)在其中的作用。方法分別用oxLDL、 oxLDL/β2GPI復合物、β2GPI/抗β2GPI抗體復合物、 oxLDL/抗β2GPI抗體復合物、 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗體復合物干預刺激大鼠A7r5細胞系不同時間,采用或不采用TLR4抑制劑TAK-242處理。茜素紅染色觀察細胞鈣化結(jié)節(jié),實時熒光定量PCR和Western blot法檢測平滑肌蛋白22α(SM22α)和RUNX家族轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)的mRNA和蛋白水平, ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清中腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平; A7r5細胞給予TNF-α刺激后,進一步檢測SM22α和RUNX2 mRNA和蛋白水平的變化。結(jié)果 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗體復合物能夠促進A7r5細胞鈣化結(jié)節(jié)增多, SM22α表達減少而RUNX2明顯上升,促進炎癥因子TNF-α的表達, TLR4抑制劑能夠緩解這一現(xiàn)象;外加不同濃度的T...

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【部分圖文】：

圖1 A7r5細胞鈣化情況(茜素紅染色, ×100)

不同處理組培養(yǎng)12d后進行茜素紅染色,與對照組相比,陽性對照2.6mmol/L高磷組可見明顯深色鈣化結(jié)節(jié),說明鈣化模型建立成功(圖1～8,紅色箭頭)。各處理均出現(xiàn)了鈣化顆粒,但其中oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗體復合物處理組可見明顯多個鈣化結(jié)節(jié)(圖1),加....

圖2 不同刺激對A7r5細胞SM22α、 RUNX2表達的影響

與培養(yǎng)基對照組相比,不同干預均能使TNF-α表達提高,但其中oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗體復合物處理組TNF-α的表達增高最為明顯(P<0.01,圖4)。圖3TAK-242處理后不同干預刺激對A7r5細胞SM22α和RUNX2表達影響

圖3 TAK-242處理后不同干預刺激對A7r5細胞SM22α和RUNX2表達影響

圖2不同刺激對A7r5細胞SM22α、RUNX2表達的影響圖4不同處理對A7r5細胞TNF-α水平的影響

圖4 不同處理對A7r5 細胞TNF-α水平的影響

圖3TAK-242處理后不同干預刺激對A7r5細胞SM22α和RUNX2表達影響2.4TNF-α呈劑量依賴性導致A7r5細胞發(fā)生成骨樣表型改變

本文編號：4031379