發(fā)布時間：2020-12-08 04:58

　　目的：由于原代白血病細胞與體內白血病細胞的生物學性狀相似,且遺傳性狀穩(wěn)定,但原代細胞的培養(yǎng)存在培養(yǎng)條件要求高、細胞存活率低等缺點。為此,本文就兒童原代白血病細胞的分離及最優(yōu)化的培養(yǎng)方法進行研究,為兒童急性白血�。ˋL）的體外研究提供細胞模型。方法：選取2008年8月-2009年9月本院兒科收治的25例初診AL患兒作為研究對象。于治療前抽取肝素抗凝的骨髓液或外周血2-3 ml于無菌離心管中,利用人淋巴細胞分離液即可分離出白血病細胞。在倒置光學顯微鏡下觀察不同時間點的原代白血病細胞的形態(tài)變化,以及利用CCK-8法檢測不同細胞密度、不同成分的培養(yǎng)液對原代白血病細胞增殖活性的影響。結果：細胞形態(tài)學觀察及細胞增殖活力測定提示：原代白血病細胞在72 h以內存活率較高；高密度細胞[（4-10）×106/ml]培養(yǎng)低于密度細胞[（1-2）×106/ml]；胎牛血清較患兒自身的血清更有利于原代白血病細胞生長。結論：利用人淋巴細胞分離液可以成功地分離出原代白血病細胞,而對于原代白血病細胞的體外培養(yǎng),選擇（4-6）×106/ml細胞密度接種于含10%胎牛血清的培養(yǎng)基中生長效果最理想。目的：探討小檗堿誘導兒童... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
第一部分 兒童急性白血病的實驗研究
    前言
        參考文獻
    （一） 兒童原代白血病細胞的分離與培養(yǎng)
        引言
        資料與方法
        結果
        討論
        參考文獻
    （二） 小檗堿對原代白血病細胞增殖、凋亡的實驗研究
        引言
        材料與方法
        結果
        討論
        參考文獻
    （三） MDM2、P53的表達與小檗堿對原代白血病細胞生長抑制的關系
        引言
        材料和方法
        結果
        討論
        參考文獻
第二部分 兒童急性白血病的臨床研究
    （一） 兒童急性白血病的細胞免疫分型與臨床分析
        引言
        對象與方法
        結果
        討論
        參考文獻
第三部分 兒童急性白血病的循證醫(yī)學研究
    （一） 亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性與兒童急性白血病發(fā)生的Meta分析
        引言
        資料與方法
        結果
        討論
        參考文獻
    （二） 細胞色素P4501A1 MspI基因多態(tài)性與兒童急性白血病關系的Meta分析
        引言
        對象與方法
        結果
        討論
        參考文獻
    （三） 母親懷孕過程中飲酒與兒童急性白血病關系的Meta分析
        引言
        對象與方法
        結果
        討論
        參考文獻
綜述
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致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Folate and fiber in the prevention of colorectal cancer:Between shadows and the light[J]. Wan Du,Wen-Ying Li,Rong Lu,Jing-Yuan Fang,Shanghai Institute of Digestive Disease,Shanghai Jiaotong University School of Medicine Renji Hospital,Shanghai 200001,China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(08)
[2]泛素蛋白連接酶MDM2活性及穩(wěn)定性調控的研究進展[J]. 聶晶,田春艷,張令強.  遺傳. 2009(10)
[3]Bcl-2反義核酸聯(lián)合化療藥對HL60細胞及原代白血病細胞的作用[J]. 林艷娟,呂聯(lián)煌,陳志哲,張臣青,林振興.  中國藥理學通報. 2009(08)
[4]兒童急性淋巴細胞白血病治療失敗原因分析[J]. 孟建華,高怡瑾,陸鳳娟,陸翠娥,王宏勝,李軍.  中國小兒血液與腫瘤雜志. 2009(04)
[5]細胞色素P4501A1、谷胱甘肽轉硫酶基因多態(tài)性和慢性粒細胞白血病的相關性研究[J]. 姜烈君,覃桂芳.  廣西醫(yī)科大學學報. 2009(04)
[6]孕期環(huán)境危險因素以及母親MTHFR677C→T、血漿Hcy與兒童先天性心臟病的關系[J]. 宮婷,李芬,石建,馮竣,唐小妮,李學誠,任永惠.  中國婦幼保健. 2009(22)
[7]大萼香茶菜甲素通過線粒體途徑誘導HL-60白血病細胞凋亡[J]. 吳建國,周永列,夏大靜,王珍妮,夏駿,邱蓮女,吳茅,林慧君,費鮮明.  中國臨床藥理學與治療學. 2009(07)
[8]兒童白血病對母親心理健康狀況的影響[J]. 趙筱昱,孫月吉,李倩.  中國醫(yī)藥導報. 2009(18)
[9]急性白血病兒童骨髓間充質干細胞的生物學特點的初步研究[J]. 吳麗萍,陳福雄,盧慧敏,吳澤霖,吳梓梁.  中國實驗血液學雜志. 2009(03)
[10]111例兒童急性淋巴細胞白血病免疫分型與臨床研究[J]. 蔡耘,陳惠芹,李曉峰,竇娟,王清文,何政賢.  中國熱帶醫(yī)學. 2009(06)



本文編號：2904497