發(fā)布時間：2020-10-27 07:34

　　 目的:機(jī)械通氣(mechanical ventilation,MV)已廣泛應(yīng)用于手術(shù)麻醉、危重病醫(yī)學(xué)、急診醫(yī)學(xué)、內(nèi)科學(xué)等多個臨床領(lǐng)域,但使用呼吸機(jī)本身所引起的機(jī)械通氣肺損傷(ventilator-induced lung injury,VILI),亦成為影響危重病患者預(yù)后的重要因素之一。本研究觀察參附注射液(shenfu injection,SFI)聯(lián)合IL-10基因轉(zhuǎn)染對VILI中炎性因子和抗炎因子釋放的影響。并采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測肺組織中IL-10、ICAM-1mRNA的表達(dá),同時觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化,以對該治療方法進(jìn)行評價,為給臨床防治機(jī)械通氣肺損傷提供新的實驗性理論依據(jù)。 方法:將66只SD雄性健康大鼠隨機(jī)分為11組,每組6只。A組為空白對照組;L組為低壓力組(氣道壓力設(shè)為15cmH_2O),根據(jù)通氣時間分為2小時組(L_2)和4小時組(L_4);H組為高壓力組(氣道壓力設(shè)為25cmH_2O),根據(jù)通氣時間分為2小時組(H_2)和4小時組(H_4);B組為空白病毒轉(zhuǎn)染組(氣道壓力設(shè)為25cmH_2O),根據(jù)通氣時間分為2小時組(B_2)和4小時組(B_4);T組為IL-10基因轉(zhuǎn)染組(氣道壓力設(shè)為25cmH_2O),根據(jù)通氣時間分為2小時組(T_2)和4小時組(T_4);C組為參附聯(lián)合IL-10基因轉(zhuǎn)染組(氣道壓力設(shè)為25cmH_2O),根據(jù)通氣時間分為2小時組(C_2)和4小時組(C_4)。處理組大鼠以10%的水合氯醛0.3g/kg行腹腔注射麻醉,于頸部正中氣管切開行氣管插管,機(jī)械通氣的條件下于胸骨左緣3、4肋間開胸,于右心室注射進(jìn)行轉(zhuǎn)染,其中L、H組為乳酸鈉林格液,B組為空白病毒,T和C組都為含IL-10的腺病毒(劑量均為0.1ml)。關(guān)胸后每日肌肉注射青霉素10萬單位預(yù)防感染。轉(zhuǎn)染48小時后,重新切開氣管插管進(jìn)行持續(xù)機(jī)械通氣,通氣過程中根據(jù)體動酌情追加麻醉藥。C組在機(jī)械通氣前30分鐘前腹腔注射參附注射液10ml/kg預(yù)處理。通氣結(jié)束后,取三塊肺組織,分別待做光鏡、電鏡和RT-PCR檢測。RT-PCR技術(shù)檢測得到IL-10mRNA和ICAM-1mRNA的表達(dá)含量。所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((?)±s)表示,各組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗,組內(nèi)比較采用配對t檢驗,應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果:(1)光鏡檢查結(jié)果顯示:光鏡下A組肺泡結(jié)構(gòu)未見異常,L組肺泡腔內(nèi)略有滲出、血管周圍有少量炎癥細(xì)胞,隨通氣時間延長病變加重,H、B上述病理變化較重,T、C組上述病理變化較輕;(2)電鏡結(jié)果顯示:A組肺組織中Ⅰ型細(xì)胞、Ⅱ型細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,無明顯異常;L、H、B、T、C組均可見不同程度的線粒體腫脹、脫落、嵴消失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,細(xì)胞核變大,細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)間隙增寬,染色質(zhì)分布不均勻,板層小體腫脹,微絨毛減少;L組變化較輕,H、B組較為嚴(yán)重,T、C較H、B組減輕。(3)RT-PCR檢測結(jié)果顯示:①A組肺組織中有少量的IL-10和ICAM-1mRNA表達(dá);②肺組織中IL-10和ICAM-1mRNA表達(dá)的含量,L組、H組、B組、T、C組均高于A組(P＜0.01);③肺組織中ICAM-1mRNA表達(dá)的含量,相同通氣壓力下,隨著通氣時間延長,L、H、B、T組肺組織中ICAM-1mRNA表達(dá)的含量明顯增加(P＜0.05),而C組相反,C_4明顯低于C_2(P＜0.01);相同通氣時間下,ICAM-1mRNA表達(dá)的含量H組較L組明顯增多(P＜0.01),T、C組較B組明顯減少(P＜0.05或P＜0.01);C組與T組比較,C_2和T_2沒有明顯差異,而C_4比T_4明顯減少(P＜0.01)。④肺組織中IL-10mRNA表達(dá)的含量,相同通氣壓力下,隨著通氣時間延長,L、H、B、T組肺組織中IL-10mRNA表達(dá)的含量明顯增加(P＜0.05),而C組相反,C_4比C_2明顯減少(P＜0.01);相同通氣時間下,肺組織中IL-10mRNA表達(dá)的含量H組較L組明顯增多(P＜0.05或0.01),B、C組較T組明顯較少(P＜0.01);而C組與B組比較,C_2明顯高于B_2(P＜0.05),而C_4明顯低于B_4(P＜0.01)。 結(jié)論:①相同通氣壓力下,VILI大鼠肺組織中ICAM-1和IL-10的表達(dá)隨通氣時間延長而增加;②相同通氣時間下,VILI大鼠肺組織中ICAM-1和IL-10的表達(dá)隨通氣壓力升高而增加;③通過IL-10基因轉(zhuǎn)染能夠減輕VILI大鼠肺組織水腫及炎性細(xì)胞浸潤,使VILI大鼠肺組織中ICAM-1表達(dá)下調(diào),同時IL-10表達(dá)上調(diào),從而可以提高肺組織抗炎能力,減輕肺組織損傷;④通過參附聯(lián)合IL-10基因轉(zhuǎn)染能夠改善VILI大鼠肺組織水腫及炎性細(xì)胞浸潤,使VILI大鼠肺組織中ICAM-1,抑制抗炎因子IL-10的過度產(chǎn)生,促使促炎和抗炎因子達(dá)到平衡,起到免疫調(diào)節(jié)作用。
【學(xué)位單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R563
【部分圖文】：

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【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2858252