發(fā)布時(shí)間：2021-01-23 07:42

　　研究目的男性生殖細(xì)胞發(fā)育調(diào)節(jié)機(jī)制中,RNA結(jié)合蛋白多聚嘧啶序列結(jié)合蛋白2（Ptbp2）作為關(guān)鍵的選擇性剪接因子已經(jīng)普遍被認(rèn)可。但是,它在隱睪睪丸組織中的表達(dá)水平及其作用依舊不清楚。此外,熱應(yīng)激抑制生殖細(xì)胞增殖和分化具有重要分子機(jī)制尚未明確。本研究擬通過手術(shù)方式,造腹腔內(nèi)隱睪小鼠模型探討Ptbp2表達(dá)水平的變化是否與熱應(yīng)激誘導(dǎo)睪丸生殖細(xì)胞損傷相關(guān)。研究方法取6周齡雄性ICR小鼠50只隨機(jī)分成假手術(shù)（SO）組和單側(cè)隱睪（UC）組。分別在術(shù)后第3、7、14、21、28天后頸椎離斷處死,并獲取睪丸組織和附睪組織。通過精液分析、HE染色觀察兩組小鼠生精細(xì)胞損傷變化,并運(yùn)用Western blot法、免疫組化、QRT-PCR檢測(cè)兩組大鼠睪丸組織中Ptbp2及其調(diào)控的Pgk2 m RNA表達(dá)變化。研究結(jié)果精液分析和HE染色結(jié)果分別顯示單側(cè)隱睪（UC）組隨著術(shù)后時(shí)間的增加,精子質(zhì)量不斷變差,生殖細(xì)胞嚴(yán)重受損,表現(xiàn)為非阻塞性無精子癥,證實(shí)成功構(gòu)建出小鼠隱睪模型。Western blot法和免疫組化顯示Ptbp2在術(shù)后第7天顯著降低,且從術(shù)后14天后幾乎不表達(dá)。QRT-PCR結(jié)果顯示Pgk2 m RNA表... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮寫詞表
中文摘要
英文摘要
1 引言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 主要試劑與儀器
    2.3 造模與組織的初步處理
    2.4 HE染色及鏡檢
    2.5 WesternBlot法
    2.6 免疫組化
    2.7 QRT-PCR
    2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
課題綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：2994838