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NGF調控RHO/ROCK信號轉導通路在哮喘發(fā)病機制中的研究

發(fā)布時間:2020-12-08 09:54
  目的:支氣管哮喘(簡稱哮喘)是影響全球公共健康的最常見的慢性疾病之一,哮可以由多種因素引起,其發(fā)病機制復雜,至今尚未完全闡明。近年來的研究表明,哮喘的發(fā)生和哮喘的持續(xù)狀態(tài)與免疫-神經(jīng)機制有著十分密切的關系,而神經(jīng)生長因子(nerve growth factor,NGF)作為聯(lián)系氣道免疫與神經(jīng)機制的中介物質,在哮喘的發(fā)病過程中起著十分重要的作用。Rho GTP酶又稱小G蛋白,是目前研究最為清楚的Ras相關單體GTP酶。它通過激活其下游靶分子—Rho相關卷曲螺旋形成蛋白激酶(Rho associatedcoiled coil forming protein kinase,Rock)調節(jié)細胞的多種行為與功能,包括細胞的收縮、游走及黏附、生長分裂以及腫瘤細胞的轉化與浸潤等。近年來的研究發(fā)現(xiàn),Rho/Rock信號轉導通路參與多種平滑肌和非平滑肌功能異常相關疾病的發(fā)生機制,因而引起了廣泛關注。但在支氣管哮喘中NGF是否通過Rho/Rock信號轉導通路引起氣管平滑肌的收縮,氣道阻力增加,進一步引起哮喘的發(fā)生、發(fā)展和持續(xù)尚不清楚。本課題旨在通過對NGF和Rho/Rock信號轉導通路進行相關性的研究,進... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】:86 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 NGF和RhoA/ROCK在哮喘小鼠肺組織中的表達及其在哮喘發(fā)病機制中的作用
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
        2.2 研究對象和分組
        2.3 研究方法
    3 結果
        3.1 哮喘小鼠的臨床表現(xiàn)
        3.2 小鼠氣道反應性測定
        3.3 血涂片及支氣管肺泡灌洗液涂片的留取及細胞計數(shù)
        3.4 肺組織標本的留取及HE染色病理學觀察
        3.5 ELISA檢測血清及BALF中IL-13、IFN-γ的含量
        3.6 免疫組化檢測肺組織中NGF、RhoA、ROCK、P-MLC的表達
        3.7 WesternBlot檢測肺組織中NGF、RhoA、ROCK、P-MLC的表達
        3.8 RealTimeRT-PCR檢測肺組織中NGF、RhoA、ROCK、P-MLCmRNA
    4 討論
    5 結論
第二部分 Rho激酶抑制劑Y-27632在OVA誘導的哮喘小鼠平滑肌收縮中的作用
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
        2.2 研究對象和分組
        2.3 研究方法
    3 結果
        3.1 哮喘小鼠的臨床表現(xiàn)
        3.2 小鼠氣道反應性測定
        3.3 血涂片及BALF中嗜酸性粒細胞計數(shù)
        3.4 肺組織HE染色
        3.5 ELISA檢測血清及BALF中IL-13、IFN-γ的含量
        3.6 免疫組化檢測肺組織中ROCK、P-MLC的表達
        3.7 WesternBlot檢測肺組織中ROCK、P-MLC的表達
        3.8 RealTimeRT-PCR檢測肺組織中ROCK、P-MLCmRNA
    4 討論
    5 結論
第三部分 NGF調控Rho/ROCK信號轉導通路在哮喘小鼠發(fā)病機制中的研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
        2.2 研究對象和分組
        2.3 研究方法
    3 結果
        3.1 哮喘小鼠的臨床表現(xiàn)
        3.2 小鼠氣道反應性測定
        3.3 血清及支氣管肺泡灌洗液涂片的留取及細胞計數(shù)
        3.4 肺組織標本的留取及HE染色病理學觀察
        3.5 ELISA檢測血清及BALF中IL-13、IFN-γ的含量
        3.6 免疫組化檢測肺組織中NGF、RhoA、ROCK、P-MLC的表達
        3.7 WesternBlot檢測肺組織中NGF、RhoA、ROCK、P-MLC的表達
        3.8 RealTimeRT-PCR檢測肺組織中NGF、RhoA、ROCK、P-MLCmRNA
    4 討論
    5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻】:
期刊論文
[1]Rho/ROCK signaling in motility and metastasis of gastric cancer[J]. Tasuku Matsuoka,Masakazu Yashiro.  World Journal of Gastroenterology. 2014(38)
[2]巨噬細胞移動抑制因子經(jīng)Rho途徑促進人肺成纖維細胞Ⅰ型膠原合成[J]. 陳培芬,羅雅玲,賴文巖,邢曉雯,譚家余,駱子義,邱智輝.  醫(yī)學理論與實踐. 2011(14)
[3]哮喘小鼠肺組織Rho、ROCK信號通路與氣道炎癥及選擇性拮抗劑Y-27632的干預[J]. 項薔薇,李海靜,羅運春,王強,朱妍艷,李昌崇.  中國免疫學雜志. 2010(12)
[4]實驗性哮喘時神經(jīng)生長因子對神經(jīng)激肽A的上調作用[J]. 方秀斌,劉曉湘,張鴻.  中國病理生理雜志. 2004(01)
[5]法舒地爾對支氣管哮喘小鼠肺組織Rho激酶-1表達及氣道炎癥的影響[J]. 吳豐芹,朱述陽,何彩霞,谷名曉.  中華結核和呼吸雜志. 2009 (11)



本文編號:2904895

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