發(fā)布時(shí)間：2020-11-19 22:59

　　 目的　克隆人乳頭瘤病毒 6b型E7(humanpapillomavirus 6bE7)基因 ,構(gòu)建原核表達(dá)載體 ,并進(jìn)行蛋白表達(dá)和純化。方法　將HPV 6bE7基因經(jīng)PCR擴(kuò)增和亞克隆 ,與GST原核表達(dá)載體pGEX 4T 2重組 ,轉(zhuǎn)化E .coliP2 3 92 菌表達(dá)蛋白 ,經(jīng)GlutathioneSepharose 4B親和層析純化GST HPV 6bE7融合蛋白。結(jié)果　限制性酶切和DNA測(cè)序表明 ,HPV 6bE7DNA正確克隆于 pGEX 4T 2多克隆位點(diǎn)。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)的GST HPV 6bE7融合蛋白主要存在于可溶性上清。經(jīng)親和層析 ,每升誘導(dǎo)菌回收 8.4mg融合蛋白

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1 周強(qiáng),程浩,高錦程,岑建萍,葉俊,曾鳳英;人乳頭瘤病毒6b型E7基因的克隆和表達(dá)[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2003年05期

本文編號(hào)：2890556