發(fā)布時間：2020-12-05 22:31

　　目的：通過靜電紡絲技術制作左旋聚乳酸/明膠（PLLA/Gelatin）三維多孔納米纖維支架，并評價該納米纖維支架與軟骨細胞的細胞相容性，對其作為軟骨組織工程支架進行可行性分析，為組織工程技術修復軟骨病變缺損提供實驗依據。方法:首先將PLLA和Gelatin按照質量分數(shù)比為3:7的比例加入配置好的HFIP/DMF（98:2）溶液中，配置終濃度為10%的紡絲溶液。在特定的工作參數(shù)下（工作電壓15kV，接受距離18cm，注射泵推動注射器內液體的流動速度為30μL/h，空氣濕度在60-75%左右，室溫25℃左右），使用靜電紡絲設備制備PLLA/Gelatin納米纖維支架。采用掃描電子顯微鏡（SEM）分析所制備的支架的表面形貌，直徑分布等。提取兔膝關節(jié)軟骨細胞并傳代，將二代軟骨細胞接種至已經消毒好的PLLA/Gelatin支架上，然后通過DAPI熒光染色進行觀察軟骨細胞在該支架上的粘附分布，并用二苯基四氮唑溴鹽（MTT）法檢測細胞在該支架上的增殖，并通過HE染色和阿爾新藍-核固紅雙染法觀察軟骨細胞在支架上的生長情況和分泌軟骨特異性細胞外基質的能力。結果：通過靜電紡絲技術制備的PLLA/Gelat... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

肉眼觀察Fig3.1Visualstudy

圖 3.2 掃描電鏡觀察Pig3.2 Scanning electron microscopy0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.40510152025mean：0.833stdev：0.178umberNfoibersfDiamter（μm）

90%的軟骨細胞都能完成貼壁，軟骨細胞變暗并且軟骨細胞的形態(tài)從橢圓形逐步變成多角形，并呈現(xiàn)結節(jié)狀聚集生長。原代軟骨細胞傳代后，細胞多在 4-6h 左右全部完成貼壁，軟骨細胞呈多角形，傳至第二代時候，細胞大多數(shù)為三角形，呈分散生長的特點，較少聚集形成軟骨結節(jié)。隨著傳代次數(shù)的增加，細胞增殖能力逐漸下降，細胞形態(tài)逐漸變?yōu)殚L梭形，呈現(xiàn)“成纖維細胞”樣形態(tài)，甚至形成肥大的不規(guī)則形態(tài)，表現(xiàn)出明顯的去分化、肥大老化狀態(tài)。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]運動性關節(jié)軟骨缺損支架材料的選擇及其生物相容性[J]. 王向春.  中國組織工程研究與臨床康復. 2011(12)
[2]醫(yī)學組織工程在骨科臨床中的應用[J]. 呂剛.  遼寧醫(yī)學院學報. 2009(06)



本文編號：2900198