發(fā)布時間：2018-12-12 16:49

【摘要】：目的探討腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)對小鼠結腸平滑肌細胞(SMC)鈣離子濃度及α-平滑肌激動蛋白(α-SMA)的影響及其相關調節(jié)機制。方法 Western blotting法檢測BDNF基因敲除(BDNF~(+/-))小鼠與正常野生型(BDNF~(+/+))小鼠α-SMA表達水平的差異。培養(yǎng)原代小鼠結腸SMC,免疫熒光法檢測SMC中酪氨酸激酶B(Trk B)受體的表達。同時以BDNF、TrkB受體阻滯劑(K252a)干預SMC,Western blotting法檢測α-SMA和Trk BPLC-Ca~(2+)信號通路蛋白表達水平的變化,鈣離子成像法檢測SMC內鈣離子濃度的變化。結果與BDNF+/+小鼠相比,BDNF~(+/-)小鼠結腸α-SMA表達水平明顯降低。SMC表達Trk B受體,在BDNF作用下,SMC中α-SMA、Trk B-PLC-Ca~(2+)信號通路蛋白表達量和細胞內鈣離子濃度增加,且加入K252a可阻斷以上變化。結論 BDNF可能通過Trk B-PLC-Ca~(2+)信號通路作用于SMC,影響細胞內鈣離子濃度及α-SMA的表達水平,進而影響腸道動力。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) on the calcium concentration of (SMC) and 偽 -smooth muscle activin (偽 -SMA) in colonic smooth muscle cells of mice and its related regulatory mechanisms. Methods the expression of 偽-SMA in BDNF knockout (BDNF~ (/ -) mice and normal wild type (BDNF~ (/) mice was detected by Western blotting method. The expression of tyrosine kinase B (Trk B) receptor in primary mouse colon was detected by SMC, immunofluorescence assay. At the same time, BDNF,TrkB receptor blocker (K252a) was used to detect the expression of 偽 SMA and Trk BPLC-Ca~ (2) signaling pathway protein by SMC,Western blotting method, and calcium imaging was used to detect the change of Ca 2 + concentration in SMC. Results compared with BDNF / mice, the expression of 偽-SMA in colon of BDNF~ (/ -) mice was significantly lower than that of BDNF / mice. SMC expressed Trk B receptor, and 偽-SMA, in SMC was induced by BDNF. Trk B-PLC-Ca2 signaling pathway protein expression and intracellular calcium concentration increased, and K252a could block these changes. Conclusion BDNF may affect the intracellular Ca ~ (2 +) concentration and 偽-SMA expression through Trk B-PLC-Ca2 signaling pathway, and then affect intestinal motility.
【作者單位】： 山東大學齊魯醫(yī)院消化內科;
【基金】：國家自然科學基金(81170352)
【分類號】：R574

【參考文獻】

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本文編號：2374941