發(fā)布時間：2020-11-20 03:49

　　 目的:非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)已成為全球第一大慢性肝臟疾病,是一個重大的公共健康問題。非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic steatohepatitis,NASH)作為NAFLD的亞型,已經(jīng)成為非肝硬化性肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)最主要的病因。因此,早期篩查出NAFLD患者和明確是否進展為NASH具有十分重要的意義。腹部超聲檢查雖為NAFLD一線篩查工具,當脂肪含量低于30%時,其靈敏度將大幅度下降。肝活檢雖為診斷NASH的唯一可靠的微創(chuàng)性、金標準試驗,然而成本高、侵入性、風(fēng)險性、并發(fā)癥、依從性低、取樣誤差等限制了其臨床應(yīng)用。此外,迄今仍缺乏對于NASH的高敏感度、高特異度診斷指標,在臨床上缺乏可用于NASH診斷的公認標志物。本課題旨在利用與NAFLD相關(guān)的常用臨床及實驗室指標,構(gòu)建無創(chuàng)性診斷模型,并評估該模型對NAFLD的預(yù)測和診斷價值,以及探討模型的臨床應(yīng)用價值,為NAFLD的篩查提供新的參考標準;同時,在此基礎(chǔ)上進一步借助于生物信息學(xué)分析手段開展創(chuàng)新性探索,尋找NASH新的潛在無創(chuàng)性診斷標志物,為在篩查出NAFLD后盡早識別NASH提供更加科學(xué)、客觀和便捷的方法。方法:1選取2018年1月至2019年1月西安醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院診斷為NAFLD患者141例和健康對照者30例為研究對象,記錄研究對象的病史、體重、身高、體質(zhì)指數(shù)(BMI);測定并收集谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、血尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)、血肌酐(CR)、血漿總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、糖化血紅蛋白(HBA1c)、游離脂肪酸(FFA)、空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)、血小板(PLT)、超聲檢查結(jié)果和Fibroscan的檢查結(jié)果等數(shù)據(jù)。計量資料組間比較采用t檢驗,相關(guān)性使用Pearson相關(guān)性分析,回歸模型的構(gòu)建使用多元線性回歸方程模型,構(gòu)建受試者工作特征曲線(ROC曲線),計算回歸模型的靈敏度和特異度以及曲線下面積(AUC)。進一步以肝活檢的結(jié)果為參考,在此基礎(chǔ)上比較診斷模型和Fibroscan的診斷效能。2通過基因表達綜合數(shù)據(jù)庫(Gene Expression Omnibus,GEO)獲取關(guān)于NASH的基因表達芯片數(shù)據(jù),進一步通過GEO2R分析手段獲得NASH和正常組織的差異基因(DEGs,differentially expressed genes)。隨后,對這些DEGs進行功能富集分析,包括GO分析(Gene Ontology)和KEGG分析(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes),同時借助于蛋白-蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖分析手段(PPI,protein-protein interaction),以尋找NASH發(fā)生和發(fā)展的潛在分子作用機制及新的診斷標志物。結(jié)果:1與脂肪肝相關(guān)的指標包括BMI(r=0.436,P0.01)、ALT(r=0.356,P0.01)、AST(r=0.317,P0.01)、UA(r=0.250,P0.01);所構(gòu)造的NAFLD回歸模型為:CAP=148.537+0.396*ALT+4.593*BMI,診斷模型的ROC曲線下面積為0.927,靈敏度為87.68%,特異度為90.00%,臨界值(cut-off value)為277.67,P?0.01,具有較高的診斷效能。診斷模型的準確率(82.6%)高于Fibroscan的準確率(69.6%),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2通過生物信息學(xué)分析,最終發(fā)現(xiàn)514個DEGs以及11個在NASH差異表達的關(guān)鍵基因(hub gene)。其中3個關(guān)鍵基因(CAT、ALDH2、ALDH8A1)與肝癌的生存分析密切相關(guān),可能與NASH發(fā)展到HCC密切相關(guān)。結(jié)論:1與目前已有的診斷模型相比,本研究所建立的模型ROC曲線下面積、特異度、靈敏度均較佳,計算方法最為簡單,實用性及可操作性強,并且準確性高于Fibroscan,有利于對早期NAFLD進行便捷篩查,提高自我干預(yù)意識,進一步降低NAFLD的危害和疾病進程,以及減少醫(yī)療資源消耗�？梢宰鳛橐粋�NAFLD早期篩查的診斷手段,具有臨床應(yīng)用及推廣的價值。2生物信息學(xué)分析的結(jié)果表明,NASH差異表達的11個關(guān)鍵基因,尤其是CAT、ALDH2、ALDH8A1在未來可能會成為NASH新的無創(chuàng)診斷標志物。基于臨床尚無可用NASH診斷標志物背景下,本項創(chuàng)新性研究可為未來該領(lǐng)域提供新的研究方向。
【學(xué)位單位】：西安醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R575.5
【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
abstract
前言
文獻回顧
第一部分 ：非酒精性脂肪性肝病初步篩查的診斷模型構(gòu)建
    1.研究資料與方法
        1.1 研究對象與方法
        1.2 入組標準
        1.3 標本收集與檢測
        1.4 質(zhì)量控制
        1.5 數(shù)據(jù)分析
        1.6 倫理學(xué)批準
    2 結(jié)果
        2.1 基本資料
        2.2 各生化指標之間差異性比較
        2.3 與肝臟脂肪含量相關(guān)的指標
        2.4 NAFLD診斷模型的構(gòu)建
        2.5 ROC診斷曲線的構(gòu)建
        2.6 診斷模型與Fibroscan的比較
        2.7 臨床篩查應(yīng)用
    3 討論
    4 結(jié)論
第二部分 應(yīng)用生信分析篩選非酒精性脂肪性肝炎無創(chuàng)診斷標志物
    1 研究對象和方法
        1.1 入組資料（芯片數(shù)據(jù)）
        1.2 數(shù)據(jù)篩選標準
        1.3 差異基因的功能富集
        1.4 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)以及分子模型分析
        1.5 關(guān)鍵基因的選擇和分析
        1.6 統(tǒng)計學(xué)處理
    2 結(jié)果
        2.1 NASH患者差異基因篩選結(jié)果
        2.2 差異基因功能富集結(jié)果
        2.3 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)以及分子模型分析結(jié)果
        2.4 關(guān)鍵基因的篩選和分析結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
不足與展望
致謝
參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 邵耕;應(yīng)用無創(chuàng)性診斷方法的一些問題[J];中華心血管病雜志;1994年03期

2 董萍萍;趙廣西;劉龍資;董玲;張寧萍;;非酒精性脂肪性肝病無創(chuàng)性診斷的研究進展[J];國際消化病雜志;2015年06期

3 馮鞏;韓海靜;齊雪;彌曼;田秋梅;牛春燕;;非酒精性脂肪性肝病無創(chuàng)性診斷方程的構(gòu)建[J];臨床肝膽病雜志;2018年06期

4 唐情容;何清;唐奇遠;;慢性乙型肝炎肝纖維化無創(chuàng)性診斷模型的研究進展[J];臨床肝膽病雜志;2015年08期

5 左賽;孔令斌;;肝纖維化無創(chuàng)性診斷方法的研究進展[J];中華診斷學(xué)電子雜志;2017年01期

6 C.Breitwieser;A.A.Schmaltz;U.Neudorf;F.Hentrich;李林;;先天性心臟病的無創(chuàng)性診斷 術(shù)前與術(shù)中所見的比較[J];德國醫(yī)學(xué);1998年04期

7 李小鷹，朱平，劉秀云，尚延忠，吳青，杜洛山，蓋魯粵;老年冠心病診斷中無創(chuàng)性診斷方法的評價[J];實用老年醫(yī)學(xué);1994年03期

8 羅磊;王穎;段鐘平;;成人和兒童非酒精性脂肪性肝病纖維化的無創(chuàng)性診斷[J];北京醫(yī)學(xué);2018年04期

9 程鳳鳳;呂品;陸應(yīng)麟;劉玉和;;肝纖維化的無創(chuàng)性診斷[J];世界華人消化雜志;2003年12期

10 殷鳳,李書權(quán),丁山;超聲對照劑通過時間的檢測:一種新的肝硬化無創(chuàng)性診斷法[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2000年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 周光德;非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）病理學(xué)評價、無創(chuàng)性診斷指標篩選、發(fā)病機制及藥物干預(yù)研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

2 劉銘;若干混合智能計算方法及應(yīng)用研究[D];吉林大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條

1 張華堂;慢性乙型肝炎肝纖維化無創(chuàng)性診斷模型的創(chuàng)建及驗證[D];福建醫(yī)科大學(xué);2018年

2 馮鞏;非酒精性脂肪性肝�。∟AFLD）的無創(chuàng)性診斷研究[D];西安醫(yī)學(xué)院;2019年

3 褚倚佑;非酒精性脂肪性肝炎無創(chuàng)性血清學(xué)診斷指標探討[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

4 李濤;肝臟纖維化無創(chuàng)性診斷模型的建立及性能驗證[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年

5 余佳初;肝纖維化無創(chuàng)性診斷的研究進展[D];南昌大學(xué);2017年

6 林中華;非酒精性脂肪性肝病遺傳學(xué)家系研究及肝纖維化無創(chuàng)診斷[D];青島大學(xué);2011年

本文編號：2890902