發(fā)布時(shí)間：2020-12-05 14:53

　　目的： 檢測(cè)HBV感染后慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化及肝癌患者外周血淋巴細(xì)胞HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ類(lèi)分子表達(dá)，建立檢測(cè)相應(yīng)患者淋巴細(xì)胞內(nèi)HLA-A mRNA方法；應(yīng)用人IL-2刺激患者淋巴細(xì)胞并進(jìn)行LDH釋放試驗(yàn)；探討慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化、肝癌患者外周血淋巴細(xì)胞HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ類(lèi)抗原分子在宿主細(xì)胞免疫狀態(tài)中的作用，對(duì)患者細(xì)胞免疫功能紊亂機(jī)制提供新的思路。 方法： 1、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞表面HLA-Ⅰ、Ⅱ類(lèi)分子： 淋巴細(xì)胞抗體的標(biāo)記：取四支試管，標(biāo)記為HLA-Ⅰ-Ctr、HLA-Ⅱ-Ctr、HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ；取同型對(duì)照液IgG1-FITC 10ul分別加入HLA-Ⅰ-Ctr、HLA-Ⅱ-Ctr管中，分別取10ulHLA-ABC-FITC、HLA-Ⅱ-FITC-加入HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ管中；各管中加入100ul抗凝全血。以標(biāo)準(zhǔn)微球調(diào)整儀器，以HLA-Ctr管做陰性對(duì)照。在前散射和測(cè)散射Dotplot二維圖中，劃出淋巴細(xì)胞區(qū)，收集10⁴個(gè)細(xì)胞，然后對(duì)淋巴細(xì)胞作FITC熒光強(qiáng)度檢測(cè)，熒光強(qiáng)度以對(duì)數(shù)放大，光反射數(shù)據(jù)存軟盤(pán)，... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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