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MANF特異性調(diào)控四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠脾臟巨噬細(xì)胞的分化

發(fā)布時(shí)間:2020-12-12 03:26
  脾臟免疫細(xì)胞,尤其是巨噬細(xì)胞(Macrophages,Mφ),在肝纖維化中發(fā)揮了重要的作用。已經(jīng)有研究表明中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(Mesencephalicastrocyte-derived neurotrophic factor,MANF)在視網(wǎng)膜中的免疫調(diào)控作用,然而MANF是如何影響肝纖維化的脾臟免疫細(xì)胞目前仍不清楚。在本研究中,我們在野生型(Wild type,WT)小鼠和單核巨噬細(xì)胞特異性敲除MANF(Mono-macrophage-specific MANF knockout,Mφ MANF-/-)小鼠,用四氯化碳(CarbonTetrachloride,CCL4)構(gòu)建了肝纖維化模型,在該模型上觀察了脾臟中巨噬細(xì)胞的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與WT小鼠比較,MφMANF-/-可引起小鼠脾臟中M1型巨噬細(xì)胞增多。而在肝纖維化時(shí),與WT小鼠比較,MφMANF--可引起小鼠脾臟中M2型巨噬細(xì)胞和漿細(xì)胞增多。無論是在正常還是肝纖維化情況下,MANF對于T細(xì)胞和B細(xì)胞的數(shù)量都沒有影響。我們的研究結(jié)果表明,MANF對不同類型免疫細(xì)胞的調(diào)控具有差異性,并且MANF可以特異性的調(diào)控脾臟巨... 

【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】:57 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

MANF特異性調(diào)控四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠脾臟巨噬細(xì)胞的分化


圖1.WT小鼠和M0MANF"?小鼠的肝組織病理特征(HE染色)??

MANF特異性調(diào)控四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠脾臟巨噬細(xì)胞的分化


圖2.M0MANF"-加重小鼠肝纖維化(天狼星紅染色)??'"

免疫熒光法,情況,細(xì)胞,腹腔


我們從M0?MANPM、鼠腹腔中提取巨噬細(xì)胞,將腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)24?h之后,??一部分細(xì)胞用于提取蛋白進(jìn)行Western?blot實(shí)驗(yàn),另一部分細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光實(shí)驗(yàn)??(圖3和4)。???Spleen???CD68?MANF?DAPI?MERGE??囊■■■■??圖3.免疫熒光法鑒定小鼠巨噬細(xì)胞中MANF敲除情況(免疫熒光法)??Fig?3.?Identification?of?MANF?knockout?in?Me?MANF-/"?mice.?Double-labeled??immunofluorescence?staining?was?used?to?detect?MANF?in?the?peritoneal?macrophages?with??anti-CD68?(green)?and?anti-MANF?(red).?The?nuclei?were?stained?with?DAPI?(Blue).?Scale?bar?is?20?|im.??23??


本文編號:2911768

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