孕早期苯并（a）芘暴露損害大鼠黃體血管網(wǎng)絡(luò)
發(fā)布時(shí)間：2020-12-07 21:38
目的:苯并（a）芘（benzo（a）pyrene,BaP）是一種普遍存在的環(huán)境污染物。研究報(bào)道稱BaP暴露會(huì)損害胚胎著床,盡管其潛在的機(jī)制尚不明確,但胚胎植入成功與否與黃體功能密切相關(guān)。黃體是妊娠早期孕激素的主要來(lái)源,在胚胎著床和妊娠維持中起關(guān)鍵作用。黃體血管發(fā)育對(duì)于黃體結(jié)構(gòu)維持和功能發(fā)揮至關(guān)重要。臨床上,黃體功能不全可能導(dǎo)致不孕或復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。因此,本研究旨在探討B(tài)aP對(duì)妊娠早期大鼠黃體結(jié)構(gòu)和功能以及血管化過(guò)程的影響。方法:（1）建立孕鼠染毒模型:從妊娠第一天開(kāi)始,處理組給予0.2mg/kg/d BaP灌胃,對(duì)照組給予玉米油灌胃,分別于妊娠第4、7、9天取材。（2）應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)血清雌激素和孕激素水平。（3）通過(guò)HE、IF方法觀察黃體形態(tài)、黃體血管網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建情況。（4）通過(guò)IHC、IF、Western-blot、Real-time PCR方法檢測(cè)調(diào)控黃體血管生成及維持的相關(guān)因子的表達(dá)。結(jié)果:（1）BaP暴露使孕鼠著床位點(diǎn)數(shù)減少,雌孕激素水平降低。（2）BaP暴露使黃體數(shù)量顯著減少,并破壞黃體結(jié)構(gòu)。（3）BaP處理破壞黃體血管網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建,使CD31、SMA和Collagen I...
【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市
【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
BaP暴露降低胚胎著床數(shù)(a)植入點(diǎn)形態(tài)圖；(b)植入位點(diǎn)數(shù)統(tǒng)計(jì)圖；(c)子宮臟器系數(shù)統(tǒng)計(jì)圖
重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文dicate implantation sites. (b) Statistical analyses of the number of implanted s) The uterine organ coefficient in the control and BaP-treated groups. gnificant difference..2 BaP 暴露影響孕早期大鼠血清激素水平有報(bào)道稱胚胎植入與黃體功能密切相關(guān)，因此進(jìn)一步研究BaP對(duì)黃。運(yùn)用ELISA方法，檢測(cè)D4、D7血清中雌激素（E2）和孕激素（P第4天，BaP處理組血清E2和P4的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組；而在孕理組血清中E2和P4的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組（圖2a,b）。以上結(jié)影響孕早期大鼠黃體內(nèi)分泌功能，使雌孕激素水平發(fā)生紊亂。
圖 3 BaP 影響孕鼠卵巢結(jié)構(gòu)(a)卵巢形態(tài)結(jié)構(gòu)圖，CL,黃體；AF,有腔卵泡；(b)黃體數(shù)量統(tǒng)計(jì)圖；(c)孕鼠體重增長(zhǎng)曲線圖；(d)卵巢臟器系數(shù)統(tǒng)計(jì)圖；(e)黃體血竇圖Fig. 3 Effect of BaP on ovarian structure. (a) Morphology of ovary on D4 was assessed by HEstaining. CL, corpus luteum; AF, antral follicle. (b) The number of corpus luteum in thecontrol and BaP-treated rats. n=9, **p < 0.01. (c) Body weights of control and BaP-treated ratsfrom D1 to D9 of pregnancy. n=8 in each group (d)The ovarian organ coefficient in the controland BaP-treated group. n=11, **p < 0.01, NS, no significant difference. (e) Morphology ofcorpus luteum sinus on D4, D7, D9; n=3.3.4 BaP 暴露損害孕鼠黃體血管網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建為了研究 BaP 對(duì)黃體血管的影響，選取卵巢組織冰凍切片，進(jìn)行免疫熒光分析。用四型膠原（Collagen IV）、CD31 和平滑肌肌動(dòng)蛋白（SMA）分別標(biāo)記血管基底膜以及其他細(xì)胞層、血管內(nèi)皮細(xì)胞和周細(xì)胞。結(jié)果如圖 4 所示，Collagen IV染色（綠色）可將黃體和周圍的卵泡組織明顯區(qū)分。在 D4，Collagen IV 染色呈纖
本文編號(hào)：2903937
【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市
【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
BaP暴露降低胚胎著床數(shù)(a)植入點(diǎn)形態(tài)圖；(b)植入位點(diǎn)數(shù)統(tǒng)計(jì)圖；(c)子宮臟器系數(shù)統(tǒng)計(jì)圖
重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文dicate implantation sites. (b) Statistical analyses of the number of implanted s) The uterine organ coefficient in the control and BaP-treated groups. gnificant difference..2 BaP 暴露影響孕早期大鼠血清激素水平有報(bào)道稱胚胎植入與黃體功能密切相關(guān)，因此進(jìn)一步研究BaP對(duì)黃。運(yùn)用ELISA方法，檢測(cè)D4、D7血清中雌激素（E2）和孕激素（P第4天，BaP處理組血清E2和P4的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組；而在孕理組血清中E2和P4的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組（圖2a,b）。以上結(jié)影響孕早期大鼠黃體內(nèi)分泌功能，使雌孕激素水平發(fā)生紊亂。
圖 3 BaP 影響孕鼠卵巢結(jié)構(gòu)(a)卵巢形態(tài)結(jié)構(gòu)圖，CL,黃體；AF,有腔卵泡；(b)黃體數(shù)量統(tǒng)計(jì)圖；(c)孕鼠體重增長(zhǎng)曲線圖；(d)卵巢臟器系數(shù)統(tǒng)計(jì)圖；(e)黃體血竇圖Fig. 3 Effect of BaP on ovarian structure. (a) Morphology of ovary on D4 was assessed by HEstaining. CL, corpus luteum; AF, antral follicle. (b) The number of corpus luteum in thecontrol and BaP-treated rats. n=9, **p < 0.01. (c) Body weights of control and BaP-treated ratsfrom D1 to D9 of pregnancy. n=8 in each group (d)The ovarian organ coefficient in the controland BaP-treated group. n=11, **p < 0.01, NS, no significant difference. (e) Morphology ofcorpus luteum sinus on D4, D7, D9; n=3.3.4 BaP 暴露損害孕鼠黃體血管網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建為了研究 BaP 對(duì)黃體血管的影響，選取卵巢組織冰凍切片，進(jìn)行免疫熒光分析。用四型膠原（Collagen IV）、CD31 和平滑肌肌動(dòng)蛋白（SMA）分別標(biāo)記血管基底膜以及其他細(xì)胞層、血管內(nèi)皮細(xì)胞和周細(xì)胞。結(jié)果如圖 4 所示，Collagen IV染色（綠色）可將黃體和周圍的卵泡組織明顯區(qū)分。在 D4，Collagen IV 染色呈纖
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