發(fā)布時間：2020-03-23 21:16

【摘要】：目的:觀察參苓白術(shù)散加味復(fù)方對骨癌痛小鼠內(nèi)AKT、P70S6表達(dá)的影響,明確參苓白術(shù)散加味復(fù)方治療骨癌痛的療效并探討其可能的作用機制。方法:雄性BALB/c小鼠58只,隨機抽取9只為正常組,其余49只建立肺癌骨轉(zhuǎn)移癌痛模型,造模過程中有4只死亡,其余45只模型小鼠按隨機數(shù)字表法,分為模型組,參苓白術(shù)散加味高、中、低劑量組,雷帕霉素組,總共5組,每組9只;正常組、模型組正常飼養(yǎng);參苓白術(shù)散加味高、中、低劑量組分別于造模后第6周每只小鼠每天0.4ml灌胃,連續(xù)7天;雷帕霉素組造模后第6周按4mg/kg劑量腹腔給藥,每天一次,連續(xù)7天。通過行為學(xué)觀察、HE染色、疼痛行為學(xué)檢測評估造模;Tunel染色觀察腫瘤細(xì)胞調(diào)亡;免疫組化、Western blot檢測各組小鼠脛骨中AKT、P70S6蛋白表達(dá)。結(jié)果:1.根據(jù)各組小鼠行為學(xué)變化,正常組及模型組HE病理檢測對比,以及造模前、造模后小鼠疼痛行為學(xué)對比結(jié)果提示模型建立成功。2.給藥后疼痛行為學(xué)檢測結(jié)果顯示,與模型組相比,參苓白術(shù)散加味中、低劑量組及雷帕霉素組小鼠疼痛閾值明顯升高(P0.01)。雷帕霉素組與中、低劑量組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.給藥后HE檢測顯示:參苓白術(shù)散加味不同劑量組骨髓腔內(nèi)腫瘤細(xì)胞數(shù)量較模型組有所減少,其中中劑量組骨髓腔內(nèi)骨髓細(xì)胞大致均勻,可見較少量腫瘤細(xì)胞,骨結(jié)構(gòu)輕度改變。雷帕霉素組小鼠骨髓腔內(nèi)可見腫瘤細(xì)胞數(shù)量減少,但同時伴有較明顯的出血。4.免疫組化結(jié)果顯示:與模型組相比,高、中、低劑量組、雷帕霉素組AKT、P70S6蛋白陽性率均降低(P0.05)。與雷帕霉素組相比,中劑量組中AKT、P70S6蛋白陽性率更低(P0.01)。5.tunel結(jié)果顯示:與模型組相比,參苓白術(shù)散加味高、中劑量組及雷帕霉素組腫瘤細(xì)胞凋亡數(shù)值明顯上調(diào)(P0.01)。雷帕霉素組與中劑量組對比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6.Western blot檢測顯示:與模型組相比,參苓白術(shù)散加味高、中、低劑量組、雷帕霉素組AKT蛋白表達(dá)均降低(P0.01);中、低劑量組、雷帕霉素組P70S6蛋白表達(dá)較模型組降低(P0.05)。結(jié)論:1.成功建立肺癌骨轉(zhuǎn)移癌痛小鼠模型。2.參苓白術(shù)散加味復(fù)方可以減輕骨癌痛小鼠疼痛癥狀,促進腫瘤細(xì)胞的調(diào)亡。3.參苓白術(shù)散加味復(fù)方可以降低骨癌痛小鼠脛骨組織中AKT、P70S6蛋白的表達(dá)。4.參苓白術(shù)散加味復(fù)方可能通過抑制AKT、P70S6表達(dá),從而影響腫瘤血管、腫瘤組織的形成,起到治療骨癌痛的作用。
【圖文】：

51 培養(yǎng)中的小鼠 SBC-5 肺癌細(xì)胞株（×20癌痛模型小鼠的建立，乙醚吸入麻醉后，根據(jù) Medhurs腿膝關(guān)節(jié)處毛發(fā)，暴露出左側(cè)脛骨酒精依次消毒皮膚，取 7G 針頭直接髓腔，注射 SBC-5 肺癌細(xì)胞液 30u保腫瘤細(xì)胞液注入骨髓腔，同時用碘酊及 75%酒精依次消毒皮膚傷口0 個萬個單位青霉素，注射完后放于所有手術(shù)過程及有關(guān)器械都嚴(yán)格無

圖 3 各組小鼠疼痛閾值情況柱形圖相比，*p＜0.01；與造模后第 3 周對比，#p＜表 1 小鼠疼痛閾值情況比較（ x ±S）n 疼痛閾7 9.94±7 4.64±7 3.27±組比較，t=10.844,*P=0.00＜0.01；與造模后第
【學(xué)位授予單位】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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本文編號：2597278