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南蛇藤提取物通過(guò)PI3K/Akt/mTOR抑制人胃癌MGC-803細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2024-06-01 02:24
  南蛇藤(Celastrus oricultus Thunb.)系衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物,始載于清代《植物名實(shí)圖考》,在我國(guó)分布較為廣泛,又名過(guò)山風(fēng)、降龍草、黃藤等。主要有抗炎鎮(zhèn)痛、行氣活血、消腫、祛風(fēng)解毒等作用。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)南蛇藤具有抑制腫瘤細(xì)胞的增殖以及侵襲轉(zhuǎn)移、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤血管生成等生物學(xué)活性。胃癌嚴(yán)重危害著人類(lèi)的健康,發(fā)病率和死亡率高,預(yù)后差。胃癌是全球最常見(jiàn)的消化道腫瘤之一,每年約有70萬(wàn)人死于胃癌,該人數(shù)占消化系統(tǒng)腫瘤總死亡人數(shù)的一半以上,臨床上治療胃癌常以外科手術(shù)、化學(xué)療法、放射療法、免疫療法、中醫(yī)中藥輔助治療為主。但由于胃癌患者早期診治率較低,同時(shí)胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力較強(qiáng),容易復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移,因此患者的預(yù)后往往都比較差。因此,探索胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移的相關(guān)機(jī)制,發(fā)現(xiàn)胃癌的治療靶點(diǎn),對(duì)胃癌的診治及預(yù)防復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移均有重大意義。哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)水平異常增高,是胃癌細(xì)胞增殖和侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵分子。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程(epithelial mesenchymaltransition,EM...

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

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符號(hào)說(shuō)明
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 人胃癌組織mTOR的表達(dá)以及人胃癌MGC-803/mTOR-細(xì)胞的構(gòu)建
    1 材料
        1.1 組織樣本
        1.2 細(xì)胞株
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 儀器及耗材
        1.5 主要試劑的配制
    2 方法
        2.1 免疫組化
        2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3 慢病毒感染細(xì)胞
        2.4 Western blot
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 胃癌樣本中mTOR、p-mTOR以及EMT相關(guān)蛋白的表達(dá)水平
        3.2 倒置熒光顯微鏡下觀察慢病毒感染后的熒光表達(dá)
        3.3 慢病毒感染后MGC-803細(xì)胞中mTOR蛋白的表達(dá)
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 南蛇藤提取物對(duì)人胃癌MGC-803/mTOR-細(xì)胞增殖和侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響
    1 材料
        1.1 藥物準(zhǔn)備
        1.2 細(xì)胞株
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 耗材及儀器
        1.5 主要試劑的配制
    2 方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 MTT實(shí)驗(yàn)
        2.3 Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)
        2.4 Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.5 細(xì)胞創(chuàng)傷-愈合實(shí)驗(yàn)
        2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 COE對(duì)人胃癌MGC-803/mTOR-細(xì)胞增殖能力的影響
        3.2 COE對(duì)人胃癌MGC-803/mTOR-細(xì)胞遷移能力的影響
        3.3 C OE對(duì)人胃癌MGC-803/mTOR-細(xì)胞侵襲能力的影響
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 南蛇藤提取物抑制人胃癌MGC-803/mTOR-細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制
    1 材料
        1.1 藥物準(zhǔn)備
        1.2 細(xì)胞株
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.5 耗材及儀器
        1.6 主要試劑的配制
    2 方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 蛋白樣品制備
        2.3 BCA蛋白定量
        2.4 Western blot
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 COE對(duì)EMT相關(guān)蛋白水平表達(dá)的影響
        3.2 COE對(duì)PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路蛋白水平表達(dá)的影響
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3985422

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