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纖維素降解菌篩選及基于宏基因組克隆表達(dá)纖維素酶基因

發(fā)布時(shí)間:2024-06-10 21:13
  全球能源匱乏、資源不合理利用和環(huán)境污染等問(wèn)題,不斷威脅著人類的生存和發(fā)展,尋找和開(kāi)發(fā)可再生資源成為解決這些問(wèn)題的有效途徑。纖維素作為地球上含量最多、分布最廣的可再生資源,它的開(kāi)發(fā)和利用是解決當(dāng)前危機(jī)的關(guān)鍵。研究表明,纖維素類物質(zhì)的水解主要依靠纖維素酶催化。但由于目前已有的纖維素酶酶活普遍較低、溫度適應(yīng)性較差等原因,一直制約著纖維素酶的工業(yè)化生產(chǎn)。內(nèi)蒙古地區(qū)纖維素資源豐富,年平均溫度偏低,低溫季節(jié)漫長(zhǎng)。因此,本文針對(duì)地區(qū)特點(diǎn),采集內(nèi)蒙古九峰山、大興安嶺等自然保護(hù)區(qū)的森林土壤為菌源,以涂布劃線手段篩選低溫(分離培養(yǎng)溫度為10℃)和常溫(分離培養(yǎng)溫度為25℃)纖維素降解微生物;利用DNS(3,5-二硝基水楊酸)法測(cè)定菌株CMC(羧甲基纖維素)酶活;采用宏基因組測(cè)序技術(shù)手段,發(fā)掘纖維素酶基因并克隆表達(dá),為轉(zhuǎn)化、利用纖維素資源提供微生物材料和基因表達(dá)依據(jù)。本文主要研究結(jié)果和結(jié)論:1.共篩選獲得217株纖維素降解菌:常溫細(xì)菌92株,常溫真菌42株,低溫細(xì)菌83株,低溫真菌0株。常溫纖維素降解細(xì)菌分屬于4個(gè)門類,即變形菌門(Proteobacteria 46%)、放線菌門(Actinobacteri...

【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2纖維素分子結(jié)構(gòu)

圖2纖維素分子結(jié)構(gòu)

圖1地球生物量的主要來(lái)源和組成Fig.1Keyglobalbiomassresourcesfromagriculturalresidues,wood,andherbaceousenergycrops.1.2纖維素結(jié)構(gòu)與組成天然纖維素通常排列成無(wú)....


圖1地球生物量的主要來(lái)源和組成

圖1地球生物量的主要來(lái)源和組成

圖1地球生物量的主要來(lái)源和組成eyglobalbiomassresourcesfromagriculturalresidues,wood,andherbaceous素結(jié)構(gòu)與組成維素通常排列成無(wú)規(guī)則、質(zhì)地緊密的結(jié)晶狀態(tài),一般不纖維素是植物細(xì)胞壁中的主要組成部分....


圖3纖維素微纖絲結(jié)構(gòu)

圖3纖維素微纖絲結(jié)構(gòu)

內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文般能達(dá)到25000葡萄糖殘基大小[12]。微觀視角研究纖維素組成發(fā)現(xiàn),它華力的作用下將15-45個(gè)纖維素分子鏈連接成纖維素微纖絲結(jié)構(gòu)[13](圖微纖絲有規(guī)律的合成更大的分子結(jié)構(gòu)-結(jié)晶性原纖維。纖維素分子的基化學(xué)式為(C6H10O5)n(簡(jiǎn)稱聚合....


圖4不同GH家族中纖維素酶的立體結(jié)構(gòu)

圖4不同GH家族中纖維素酶的立體結(jié)構(gòu)

纖維素降解菌篩選及基于宏基因組克隆表達(dá)纖維素酶基因同發(fā)揮作用時(shí),可大幅度的提高對(duì)天然纖維素的水解效率[25]。該酶主要維素降解真菌的木霉屬中,能夠水解結(jié)晶度較高的纖維素類物質(zhì),如微(Avicel)、棉花等[31]。主要分布在糖苷水解酶的5、6、7、9和48家的催化結(jié)構(gòu)域類....



本文編號(hào):3991909

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