植物乳桿菌HE-1在共培養(yǎng)中產(chǎn)抑菌物質(zhì)與LuxS/Al-2群體感應(yīng)現(xiàn)象關(guān)系的研究
發(fā)布時間：2024-11-30 22:55
本研究使用的乳酸菌菌種均分離自內(nèi)蒙古錫盟地區(qū)的酸馬奶酒中,第一,使用Spot-on-lawn法在固體培養(yǎng)基上對具有產(chǎn)生抑菌物質(zhì)潛力的Lactobacillus plantarumHE-1和Enterococcus faecium HE-432進行篩選,同時篩選出用于后續(xù)檢測試驗的最佳指示菌；第二,選用相近或不同種屬乳酸菌作為環(huán)境中的刺激因素,設(shè)計14個共培養(yǎng)組合,使用打孔法檢測混菌培養(yǎng)上清液的抑菌性；第三,對于具有抑菌性的混菌培養(yǎng)上清液進行AI-2信號分子檢測,尋找AI-2信號分子產(chǎn)生與發(fā)酵產(chǎn)生抑菌物質(zhì)二者之間在時間和產(chǎn)生量上的對應(yīng)關(guān)系；第四,對產(chǎn)抑菌物質(zhì)乳酸菌生物膜生成和群體感應(yīng)現(xiàn)象二者關(guān)系進行探索,為以后將其開發(fā)為腸道益生菌打下基礎(chǔ)；第五,使用分子生物學(xué)手段驗證產(chǎn)抑菌物質(zhì)乳酸菌含有l(wèi)uxS基因片段,輔助證明AI-2信號分子的產(chǎn)生。實驗結(jié)果顯示,第一,L. plantarum HE-1產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)對腸球菌、發(fā)酵乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸乳球菌、乳酸片球菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌和藤黃微球菌均有不同程度的抑制作用,并選取抑制作用最好的大腸桿菌作為后續(xù)實驗的指示菌。第二,在...
【文章頁數(shù)】：47 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【文章目錄】：
摘要
Abstract
插圖和附表清單
1 前言
1.1 乳酸菌抑菌特性概述
1.1.1 乳酸菌素Nisin的研究概述
1.1.2 乳酸菌Ⅱ類細菌素的研究概述
1.2 群體感應(yīng)現(xiàn)象概述
1.2.1 種內(nèi)群體感應(yīng)系統(tǒng)概述
1.2.2 由LuxS/AI-2介導(dǎo)的種間群體感應(yīng)系統(tǒng)概述
1.3 基于LuxS/AI-2的群體感應(yīng)系統(tǒng)在乳酸菌共培養(yǎng)中的研究進展概述
1.3.1 乳酸菌種間共培養(yǎng)中LuxS/AI-2系統(tǒng)調(diào)控的QS現(xiàn)象
1.3.2 乳酸菌與其他種屬菌株或細胞共培養(yǎng)中LuxS/AI-2系統(tǒng)調(diào)控的QS現(xiàn)象
1.4 微生物生物膜生成與LuxS/AI-2的群體感應(yīng)系統(tǒng)二者之間的關(guān)系
1.5 研究的目的及意義
2 材料與方法
2.1 儀器與材料
2.1.1 實驗菌種
2.1.2 儀器
2.1.3 藥品試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 菌種保藏、活化和計數(shù)
2.2.2 Spot-on-lawn抑菌物質(zhì)檢測法
2.2.3 乳酸菌共培養(yǎng)方法
2.2.4 發(fā)酵上清液的制備
2.2.5 打孔法檢測混菌培養(yǎng)上清液抑菌物質(zhì)
2.2.6 AI-2信號分子的檢測及方法優(yōu)化
2.2.7 生物膜形成的檢測
2.2.8 DNA的提取與luxS基因的擴增
2.2.9 同源性分析與系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
3 結(jié)果與分析
3.1 Spot-on-lawn法篩選產(chǎn)抑菌物質(zhì)實驗菌和最佳指示菌
3.2 共培養(yǎng)中產(chǎn)抑菌物質(zhì)與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
3.2.1 共培養(yǎng)誘導(dǎo)產(chǎn)生抑菌物質(zhì)
3.2.2 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的檢測
3.2.3 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的產(chǎn)生與產(chǎn)抑菌物質(zhì)二者的相關(guān)關(guān)系
3.3 L.plantarum HE-1生物膜形成與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
3.4 luxS的擴增及同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
4 討論
4.1 Spot-on-lawn法篩選產(chǎn)抑菌物質(zhì)實驗菌和最佳指示菌
4.2 共培養(yǎng)中產(chǎn)抑菌物質(zhì)與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
4.2.1 共培養(yǎng)誘導(dǎo)產(chǎn)生抑菌物質(zhì)
4.2.2 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的檢測
4.2.3 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的產(chǎn)生與產(chǎn)抑菌物質(zhì)二者的相關(guān)關(guān)系
4.3 L.plantarum HE-1生物膜形成與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
4.4 luxS的擴增及同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
作者簡介
本文編號：4013142
【文章頁數(shù)】：47 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【文章目錄】：
摘要
Abstract
插圖和附表清單
1 前言
1.1 乳酸菌抑菌特性概述
1.1.1 乳酸菌素Nisin的研究概述
1.1.2 乳酸菌Ⅱ類細菌素的研究概述
1.2 群體感應(yīng)現(xiàn)象概述
1.2.1 種內(nèi)群體感應(yīng)系統(tǒng)概述
1.2.2 由LuxS/AI-2介導(dǎo)的種間群體感應(yīng)系統(tǒng)概述
1.3 基于LuxS/AI-2的群體感應(yīng)系統(tǒng)在乳酸菌共培養(yǎng)中的研究進展概述
1.3.1 乳酸菌種間共培養(yǎng)中LuxS/AI-2系統(tǒng)調(diào)控的QS現(xiàn)象
1.3.2 乳酸菌與其他種屬菌株或細胞共培養(yǎng)中LuxS/AI-2系統(tǒng)調(diào)控的QS現(xiàn)象
1.4 微生物生物膜生成與LuxS/AI-2的群體感應(yīng)系統(tǒng)二者之間的關(guān)系
1.5 研究的目的及意義
2 材料與方法
2.1 儀器與材料
2.1.1 實驗菌種
2.1.2 儀器
2.1.3 藥品試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 菌種保藏、活化和計數(shù)
2.2.2 Spot-on-lawn抑菌物質(zhì)檢測法
2.2.3 乳酸菌共培養(yǎng)方法
2.2.4 發(fā)酵上清液的制備
2.2.5 打孔法檢測混菌培養(yǎng)上清液抑菌物質(zhì)
2.2.6 AI-2信號分子的檢測及方法優(yōu)化
2.2.7 生物膜形成的檢測
2.2.8 DNA的提取與luxS基因的擴增
2.2.9 同源性分析與系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
3 結(jié)果與分析
3.1 Spot-on-lawn法篩選產(chǎn)抑菌物質(zhì)實驗菌和最佳指示菌
3.2 共培養(yǎng)中產(chǎn)抑菌物質(zhì)與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
3.2.1 共培養(yǎng)誘導(dǎo)產(chǎn)生抑菌物質(zhì)
3.2.2 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的檢測
3.2.3 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的產(chǎn)生與產(chǎn)抑菌物質(zhì)二者的相關(guān)關(guān)系
3.3 L.plantarum HE-1生物膜形成與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
3.4 luxS的擴增及同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
4 討論
4.1 Spot-on-lawn法篩選產(chǎn)抑菌物質(zhì)實驗菌和最佳指示菌
4.2 共培養(yǎng)中產(chǎn)抑菌物質(zhì)與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
4.2.1 共培養(yǎng)誘導(dǎo)產(chǎn)生抑菌物質(zhì)
4.2.2 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的檢測
4.2.3 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的產(chǎn)生與產(chǎn)抑菌物質(zhì)二者的相關(guān)關(guān)系
4.3 L.plantarum HE-1生物膜形成與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
4.4 luxS的擴增及同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
作者簡介
本文編號：4013142
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