發(fā)布時間：2018-06-17 17:27

  本文選題：循環(huán)腫瘤細胞 + 無標記��； 參考：《重慶醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的癌癥是全球死亡率最高的疾病,其引起死亡的主要原因是腫瘤細胞的侵襲及轉(zhuǎn)移,所以對腫瘤轉(zhuǎn)移的早期監(jiān)測具有重要的臨床價值。血液中的循環(huán)腫瘤細胞包含大量的腫瘤表型信息,是腫瘤轉(zhuǎn)移的重要標志物。因此,高靈敏的檢測與高特異的收集循環(huán)腫瘤細胞對癌癥轉(zhuǎn)移的早期監(jiān)測以及分子機制的研究是十分有意義的。方法基于電化學阻抗譜法設(shè)計一種新型無標記的電化學細胞傳感器用于循環(huán)腫瘤細胞的檢測。首先,將6-巰基-1-乙醇(MCH)固定在金電極表面,使捕獲探針定向插入MCH分子所形成的間隙中,可促進捕獲探針站立且更加均勻地分布在電極表面,進而提高細胞傳感器的靈敏度與穩(wěn)定性。利用高親和力的適體特異地識別腫瘤細胞膜上過表達的上皮細胞粘附分子捕獲靶細胞以提高檢測特異性。由于細胞具有很強的阻礙電子轉(zhuǎn)移特性,因此我們選擇電化學阻抗譜法對其進行檢測。檢測后,借助脫氧尿嘧啶水解酶水解適體與捕獲探針結(jié)合部分的脫氧尿苷實現(xiàn)電極的重復利用以及循環(huán)腫瘤細胞的收集。結(jié)果此傳感器具有良好穩(wěn)定性和可重復性,檢測范圍可達到30-1×106cells/m L,檢測限可低至10cells/m L。并且該細胞傳感器憑借上皮細胞黏附分子與相應(yīng)適體的特異性結(jié)合可精準的在實際血液樣本中區(qū)分出靶細胞。此細胞傳感器還可通過脫氧尿嘧啶水解酶特異性切除適體與捕獲探針結(jié)合部分的脫氧尿苷,成功地實現(xiàn)電極的8次重復利用及循環(huán)腫瘤細胞的富集。結(jié)論綜上所述,我們設(shè)計的細胞傳感器有很大的潛力可以應(yīng)用于臨床,可望對癌癥的轉(zhuǎn)移進行早期監(jiān)測。
[Abstract]:Objective Cancer is the disease with the highest mortality in the world, and the main cause of death is the invasion and metastasis of tumor cells, so it has important clinical value for early monitoring of tumor metastasis. Circulating tumor cells in blood contain a lot of phenotypic information and are important markers of tumor metastasis. Therefore, high sensitive detection and high specific collection of circulating tumor cells for early detection of cancer metastasis and molecular mechanisms are of great significance. Methods A novel unlabeled electrochemical cell sensor was designed based on electrochemical impedance spectroscopy (EIS) to detect circulating tumor cells. First of all, by immobilization of 6-mercapto-1-ethanolol (MCH) on the surface of the gold electrode, the trapping probe is inserted into the gap formed by the MCH molecule, which can promote the trap probe to stand and distribute more evenly on the electrode surface. Furthermore, the sensitivity and stability of the cell sensor are improved. High affinity aptamers are used to specifically recognize the overexpression of epithelial cell adhesion molecules on tumor cell membranes to capture target cells in order to improve detection specificity. Because of the strong resistance to electron transfer, we choose electrochemical impedance spectroscopy (EIS) to detect the cells. After detection, deoxyuridine was used to reuse the electrode and collect circulating tumor cells by using deoxyuridine hydrolase to hydrolyze aptamer and capture probe part of deoxyuridine. Results the sensor has good stability and repeatability. The detection range can reach 30-1 脳 106cells/m / L, and the detection limit can be as low as 10cells/m L. The cell sensor can accurately distinguish target cells from actual blood samples by the specific binding of epithelial cell adhesion molecules to corresponding aptamers. This cell sensor can also remove deoxyuridine from aptamer and capture probe specifically by deoxyuridine hydrolase, and successfully reuse the electrode for 8 times and enrich tumor cells in circulation. Conclusion in conclusion, the cell sensor designed by us has great potential for clinical application and can be used for early detection of cancer metastasis.
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R730.43;TP212

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本文編號：2031868