發(fā)布時(shí)間：2024-06-30 13:12

　　菰黑粉菌(Ustilago esculenta)是一種獨(dú)特的病原真菌,其侵染茭白植株(Zizania latifolia)后可抑制植株抽穗開花并刺激莖基部膨大形成茭白。在東亞及東南亞地區(qū)尤其是中國(guó),茭白是一種營(yíng)養(yǎng)很高的水生蔬菜,也是一種重要的藥材。前期研究發(fā)現(xiàn),菰黑粉菌是一種典型的二型態(tài)真菌,且與其他二型態(tài)真菌類似存在酵母型和菌絲型兩種型態(tài),而由酵母型向菌絲型轉(zhuǎn)換是此類真菌致病性的關(guān)鍵。另外,促分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信號(hào)途徑在病原真菌中廣泛存在,其在菌株的二型態(tài)轉(zhuǎn)換及致病性過(guò)程中起重要作用,目前該途徑中對(duì)MAPK基因的研究相對(duì)較多。本研究利用菰黑粉菌基因組測(cè)序結(jié)果,結(jié)合玉米黑粉菌(Ustilago maydis)Kpp2和Kpp6的氨基酸序列,成功從菰黑粉菌中克隆并鑒定得到兩個(gè)MAPK基因UeKpp2和UeKpp6。通過(guò)熒光定量PCR、基因修飾、融合及接種實(shí)驗(yàn)對(duì)UeKpp2和UeKpp6基因的表達(dá)模式和生物學(xué)功能進(jìn)行了研究,并通過(guò)酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)對(duì)UeKpp2和UeKpp6可能參與的調(diào)控途徑進(jìn)行了探究�？寺〉玫捷院�...

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1玉米黑粉菌生活史[9]

米黑粉菌同屬黑粉菌屬，推測(cè)其生活史與玉米黑粉菌相似[9]（圖1.1），近期，胡鵬[10]通過(guò)單孢分離法從正常茭和灰茭中分離得到兩對(duì)性親和的菰黑粉菌單倍體菌株（UeMT10和UeMT46，UeT14和UeT55），進(jìn)一步構(gòu)建了攜帶GFP的單倍體菌株，初步完善了菰黑粉菌的生活史。光學(xué)....

圖1.3部分病原真菌Fus3/Kss1信號(hào)途徑MAPK模塊

稻瘟菌該途徑的MAPK模塊包括Mst11（MAPKKK）、Mst7（MAPKK）、Pmk1（MAPK）（圖1.3），研究發(fā)現(xiàn)mst11、mst7突變菌株不能形成附著胞，且致病性喪失[77]。該模塊上游的一些基因也被克隆，如mst50、ras1、ras2，其中mst50....

圖2.1融合片段構(gòu)建及缺失菌株篩選的原理

中國(guó)計(jì)量大學(xué)碩士學(xué)位論文2μL，內(nèi)切酶22μL，質(zhì)粒約10μg，加ddH2O至50μL。37產(chǎn)物進(jìn)行1.0%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，選擇目的條帶割膠除載體的構(gòu)建菰黑粉菌基因組序列結(jié)合融合PCR的原理分別在UeKpp2閱讀框上下游各1000bp左右處....

圖2.2玉米發(fā)病程度的等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)注：A-G分別代表Deadplants、Heavytumors、Normaltumors、Smalltumors、Ligulaswelling、Chlorosis、

中國(guó)計(jì)量大學(xué)碩士學(xué)位論文00大于1.0，然后分別取500μL上述的菌液至50mLYEPS液體培養(yǎng)180r/min培養(yǎng)至OD600為0.6-0.8，離心收集菌體，用水稀釋至OD600為mL的一次性注射器吸適量稀釋好的菌液分別接種30株種植7d的....

本文編號(hào)：3998782