發(fā)布時間：2025-06-19 00:08

　　新煙堿類殺蟲劑對昆蟲煙堿型乙酰膽堿受體具有高度的選擇性,對哺乳動物毒性較低。但是研究發(fā)現(xiàn)新煙堿類殺蟲劑不僅作用于非靶標生物蜜蜂,還會對哺乳動物造成有害影響。動物實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)新煙堿類殺蟲劑可增加小鼠和大鼠的患癌風險,但毒性機理仍不清楚。本研究根據(jù)表觀遺傳學變化在環(huán)境污染導致的健康危害中起到早期調(diào)控作用,研究幾種代表性新煙堿類殺蟲劑對人骨髓間充質(zhì)干細胞(hBMSCs)的DNA甲基化修飾的干擾作用,通過聯(lián)合分析研究DNA甲基化調(diào)控紊亂與基因異常表達間的關(guān)聯(lián),并與大鼠表達譜數(shù)據(jù)對比分析探究新煙堿類殺蟲劑的跨物種毒性靶標及種屬差異。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:(1)0.5μM-500μM的啶蟲脒(ACE)、烯啶蟲胺(NIT)和環(huán)氧蟲啶(CYC)暴露48小時后對hBMSCs基因組整體甲基化產(chǎn)生抑制作用,并且可能為由TET介導的主動去甲基化過程造成的。噻蟲嗪(TMX)使細胞基因組甲基化水平升高,呋蟲胺(DIN)對基因組整體甲基化水平的影響尚不明確。(2)ACE暴露導致hBMSCs基因組87個位點及21個區(qū)域的甲基化狀態(tài)發(fā)生改變。在差異甲基化基因富集通路網(wǎng)絡(luò)中,阿爾茲海默癥、多巴胺能突觸、凋亡和丙型肝炎等處...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.3 DNA微陣列(左)與RNA測序(右)樣品準備基本工作流程[85]

相比于DNA微陣列,RNA測序具有更高的分辨率、更精確的定量測量以及更廣泛的物種研究的特點[83,84]。RNA測序方法需要在mRNA反轉(zhuǎn)錄之前根據(jù)polyA尾去除其他RNA,并將其片段化(圖1.3,右側(cè))。cDNA第一、二鏈合成結(jié)束后,連接接頭(adapter)構(gòu)建文庫并上....

圖1.4研究技術(shù)路線

1.6.3技術(shù)路線1.6.4研究意義

圖2.1甲基化芯片數(shù)據(jù)分析流程

差異位點注釋后進行富集分析,采用R包clusterProfier[94]進行KEGG通路分析。2.1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析

圖2.2幾種新煙堿類殺蟲劑對h BMSCs LINE-1元件甲基化水平的影響。A.NIT暴露組,B.TMX暴露組,C.ACE暴露組,D.CYC暴露組,E.DIN暴露組(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001)

陽性對照結(jié)果顯示,甲基化抑制劑5-氮雜胞苷(DAC)顯著降低了兩種重復性元件的甲基化水平,證明該方法可以有效反映受試物對hBMSCs甲基化水平的影響(圖2.2A,圖2.3A)。新煙堿類殺蟲劑暴露組實驗結(jié)果顯示,除TMX外,其余受試新煙堿類殺蟲劑對LINE-1元件的甲基化水平....

本文編號：4050548