鯉皰疹病毒3型囊膜蛋白ORF136、ORF25的篩選和鑒定
發(fā)布時間：2020-12-14 20:10
鯉皰疹病毒3型（Cyprinid herpesvirus 3,Cy HV-3）,又稱為錦鯉皰疹病毒（Koi herpesvirus,KHV）,是引起鯉魚、錦鯉及其變種高度傳染性錦鯉皰疹病毒�。↘oi herpesvirus disease,KHVD）的病原。KHVD自1997年首次報道以來,在全球多個國家傳播、流行,范圍覆蓋亞洲、歐洲、北美及非洲多個國家地區(qū),給鯉魚及錦鯉養(yǎng)殖業(yè)造成無可估量的經(jīng)濟損失。Cy HV-3隸屬于皰疹病毒目,異皰疹病毒科,鯉皰疹病毒屬,是具有囊膜包裹的雙鏈DNA病毒。病毒的囊膜蛋白在識別宿主細胞受體介導病毒入侵等方面具有關鍵性的作用,而關于Cy HV-3囊膜蛋白的研究卻非常有限。本論文將對Cy HV-3純化病毒粒子和囊膜組分進行蛋白質組分析,篩選病毒可能存在的囊膜蛋白,在此基礎上對推測的囊膜蛋白ORF136和ORF25進行定位研究,試驗證實ORF136和ORF25為Cy HV-3的囊膜蛋白,為后續(xù)的蛋白功能研究奠定基礎。全文內容分為以下三個部分:1、Cy HV-3增殖與純化:分別將Cy HV-3 GZ1301分離株和E分離株感染敏感細胞系鯉魚腦細胞（Common...
【文章來源】：上海海洋大學上海市
【文章頁數(shù)】：82 頁
【學位級別】：碩士
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
1 CyHV-3分類地位
2 CyHV-3理化特性
3 CyHV-3基因組與轉錄組
4 CyHV-3蛋白質組
5 KHVD流行病學
6 KHVD診斷與檢測
7 KHVD防治措施
8 本研究目的與意義
第一章 鯉皰疹病毒3型增殖與純化
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結果與分析
2.1 細胞培養(yǎng)與CyHV-3感染
2.2 CyHV-3純化與電鏡觀察
2.3 SDS-PAGE
2.4 免疫印跡分析
3 討論
4 小結
第二章 鯉皰疹病毒3型蛋白質組分析
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結果與分析
3 討論
3.1 CyHV-3病毒蛋白
3.2 與CyHV-3相關的宿主蛋白
4 小結
第三章 鯉皰疹病毒3型囊膜蛋白ORF136和ORF25的鑒定
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結果與分析
2.1 ORF136蛋白鑒定
2.2 ORF25蛋白鑒定
3 討論
3.1 ORF136蛋白
3.2 ORF25蛋白
4 小結
全文總結
參考文獻
碩士期間主要成果
致謝
【參考文獻】：
期刊論文
[1]雙抗體夾心ELISA檢測牛腸道病毒抗原方法的建立及流行病學調查[J]. 邢澤黎,王新平,朱利塞,魯海冰,郭昌明,蓋小春,王明月. 中國獸醫(yī)學報. 2016(04)
[2]一種基于Ⅱ型鯉皰疹病毒衣殼蛋白72的免疫學檢測方法[J]. 孔善云,姜有聲,許丹,謝駿,呂利群. 中國水產科學. 2016(02)
[3]錦鯉皰疹病毒GZ1301株的分離與鑒定[J]. 李瑩瑩,王慶,曾偉偉,潘厚軍,王英英,劉春,梁紅茹,石存斌,吳淑勤. 水產學報. 2014(08)
[4]傳染性胰壞死病毒雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 張琳琳,連科迅,張英,蔣燁,姜艷萍,崔文,喬薪瑗,唐麗杰,李一經(jīng),劉敏. 淡水漁業(yè). 2014(04)
[5]羅非魚無乳鏈球菌雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 張新艷. 福建農業(yè)學報. 2014(06)
[6]一例冰下低溫爆發(fā)的錦鯉皰疹病毒病的鑒定[J]. 邢程,王好,周井祥,王友超. 水產學雜志. 2014(01)
[7]豬傳染性胃腸炎病毒雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 屈月,葛俊偉,唐麗杰,喬薪瑗,姜艷平,尹光昕,李一經(jīng). 中國預防獸醫(yī)學報. 2013(05)
[8]一株錦鯉皰疹病毒的分離與鑒定[J]. 朱霞,李新偉,王好,呂文亮,周井祥. 中國預防獸醫(yī)學報. 2011(05)
[9]錦鯉皰疹病毒的檢測與人工感染試驗[J]. 周永燦,袁軍法,任武澤,劉葒,江育林,石正麗. 武漢大學學報(理學版). 2005(S2)
[10]進口錦鯉暴發(fā)病病原的nested-PCR鑒定[J]. 劉葒,史秀杰,高隆英,江育林. 華中農業(yè)大學學報. 2002(05)
碩士論文
[1]錦鯉皰疹病毒抗體血清學檢測方法的建立及應用[D]. 劉亭岐.南京農業(yè)大學 2012
本文編號：2916954
【文章來源】：上海海洋大學上海市
【文章頁數(shù)】：82 頁
【學位級別】：碩士
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
1 CyHV-3分類地位
2 CyHV-3理化特性
3 CyHV-3基因組與轉錄組
4 CyHV-3蛋白質組
5 KHVD流行病學
6 KHVD診斷與檢測
7 KHVD防治措施
8 本研究目的與意義
第一章 鯉皰疹病毒3型增殖與純化
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結果與分析
2.1 細胞培養(yǎng)與CyHV-3感染
2.2 CyHV-3純化與電鏡觀察
2.3 SDS-PAGE
2.4 免疫印跡分析
3 討論
4 小結
第二章 鯉皰疹病毒3型蛋白質組分析
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結果與分析
3 討論
3.1 CyHV-3病毒蛋白
3.2 與CyHV-3相關的宿主蛋白
4 小結
第三章 鯉皰疹病毒3型囊膜蛋白ORF136和ORF25的鑒定
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結果與分析
2.1 ORF136蛋白鑒定
2.2 ORF25蛋白鑒定
3 討論
3.1 ORF136蛋白
3.2 ORF25蛋白
4 小結
全文總結
參考文獻
碩士期間主要成果
致謝
【參考文獻】：
期刊論文
[1]雙抗體夾心ELISA檢測牛腸道病毒抗原方法的建立及流行病學調查[J]. 邢澤黎,王新平,朱利塞,魯海冰,郭昌明,蓋小春,王明月. 中國獸醫(yī)學報. 2016(04)
[2]一種基于Ⅱ型鯉皰疹病毒衣殼蛋白72的免疫學檢測方法[J]. 孔善云,姜有聲,許丹,謝駿,呂利群. 中國水產科學. 2016(02)
[3]錦鯉皰疹病毒GZ1301株的分離與鑒定[J]. 李瑩瑩,王慶,曾偉偉,潘厚軍,王英英,劉春,梁紅茹,石存斌,吳淑勤. 水產學報. 2014(08)
[4]傳染性胰壞死病毒雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 張琳琳,連科迅,張英,蔣燁,姜艷萍,崔文,喬薪瑗,唐麗杰,李一經(jīng),劉敏. 淡水漁業(yè). 2014(04)
[5]羅非魚無乳鏈球菌雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 張新艷. 福建農業(yè)學報. 2014(06)
[6]一例冰下低溫爆發(fā)的錦鯉皰疹病毒病的鑒定[J]. 邢程,王好,周井祥,王友超. 水產學雜志. 2014(01)
[7]豬傳染性胃腸炎病毒雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 屈月,葛俊偉,唐麗杰,喬薪瑗,姜艷平,尹光昕,李一經(jīng). 中國預防獸醫(yī)學報. 2013(05)
[8]一株錦鯉皰疹病毒的分離與鑒定[J]. 朱霞,李新偉,王好,呂文亮,周井祥. 中國預防獸醫(yī)學報. 2011(05)
[9]錦鯉皰疹病毒的檢測與人工感染試驗[J]. 周永燦,袁軍法,任武澤,劉葒,江育林,石正麗. 武漢大學學報(理學版). 2005(S2)
[10]進口錦鯉暴發(fā)病病原的nested-PCR鑒定[J]. 劉葒,史秀杰,高隆英,江育林. 華中農業(yè)大學學報. 2002(05)
碩士論文
[1]錦鯉皰疹病毒抗體血清學檢測方法的建立及應用[D]. 劉亭岐.南京農業(yè)大學 2012
本文編號：2916954
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