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基于表型性狀與SNP標(biāo)記的番茄種質(zhì)資源遺傳多樣性分析

發(fā)布時(shí)間:2020-11-14 17:26
   番茄是世界上重要的蔬菜作物。本研究采用表型性狀和SNP標(biāo)記對(duì)收集到的322份番茄種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析。用變異系數(shù)、Shannon-Wiener多樣性指數(shù)對(duì)收集到的322份番茄種質(zhì)資源的29個(gè)表型性狀進(jìn)行遺傳多樣性分析;用SPSS 20.0進(jìn)行聚類(lèi)分析,通過(guò)主成分、相關(guān)性以及回歸分析對(duì)番茄種質(zhì)資源進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)和評(píng)價(jià)指標(biāo)篩選。利用KASP技術(shù)對(duì)在表型結(jié)果聚類(lèi)基礎(chǔ)上篩選出的46份代表性材料進(jìn)行SNP基因分型檢測(cè),篩選出多態(tài)性高的SNP標(biāo)記,從篩選出的多態(tài)性引物中挑選均勻覆蓋番茄全染色體的120對(duì)引物對(duì)185份有代表性的供試材料進(jìn)一步進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析。主要研究結(jié)果如下:1.供試材料的表型性狀具有豐富的遺傳多樣性,葉片類(lèi)型以普通葉型為主,花梗離層以有離層為主。13個(gè)質(zhì)量性狀共檢測(cè)到40個(gè)變異類(lèi)型,質(zhì)量性狀中Shannon-Wiener多樣性指數(shù)最高的是生長(zhǎng)勢(shì)(1.52);數(shù)量性狀最高的是葉片長(zhǎng)(2.08)和葉片寬(2.07),16個(gè)數(shù)量性狀的變異系數(shù)CV值介于11.71%~70.93%,變異系數(shù)最大的是裂果率(70.93%);遺傳多樣性指數(shù)(H')分布范圍為1.49~2.08。相關(guān)性分析和主成分分析結(jié)果表明:各性狀間存在復(fù)雜的相互關(guān)系,前9個(gè)主成分的累計(jì)貢獻(xiàn)率為64.58%,包含了全部指標(biāo)的大部分信息。2.表型性狀的綜合評(píng)價(jià)分析表明,編號(hào)為68的番茄D值(0.585)最高,其綜合性能最好;29個(gè)表型性狀與綜合值D之間:除了果肉厚,花柱長(zhǎng)度,葉片形狀和葉色外,均表現(xiàn)為顯著相關(guān)。采用逐步回歸分析方法篩選出20個(gè)性狀可以作為番茄綜合評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。在遺傳距離為17.5處可將供試的322份番茄資源劃分為6個(gè)組群,第5組群包含133份材料,主要特點(diǎn)為圓形,生長(zhǎng)習(xí)性為有限生長(zhǎng);第6組群包含175份,主要特點(diǎn)為單果質(zhì)量小,生長(zhǎng)習(xí)性為無(wú)限生長(zhǎng)。3.基于表型性狀分類(lèi)結(jié)果篩選出46個(gè)有代表性的番茄材料,利用KASP檢測(cè)方法對(duì)374個(gè)SNP標(biāo)記進(jìn)行篩選,結(jié)果表明:75對(duì)無(wú)多態(tài)性,不能區(qū)分樣本的基因型;116對(duì)具有非特異性擴(kuò)增,不能很好的區(qū)分樣本的基因型:183對(duì)SNP引物基因分型結(jié)果好,多態(tài)性高,能夠用于后續(xù)遺傳多樣性分析。4.從篩選出的多態(tài)性引物中挑選均勻覆蓋番茄全染色體的120對(duì)引物對(duì)185份有代表性的供試材料進(jìn)行SNP基因分型,共檢測(cè)到348個(gè)等位基因,每個(gè)位點(diǎn)均檢測(cè)到2.892個(gè)等位變異。等位基因頻率為0.429~0.962之間,平均為0.674;雜合度為0~0.557之間,平均為0.032;多態(tài)性信息含量(PIC)為0.071~0.571,平均值為0.325,主要分布在0.35~0.40之間,表明本研究中SNP標(biāo)記表現(xiàn)為中度偏高多態(tài)性。185份番茄材料間的遺傳距離變異范圍為0.002~1.141之間,平均值為0.528,其中R137與R139之間的遺傳距離最低(0.002),R96與R106之間的遺傳距離最大(1.141)。按照UPGMA法構(gòu)建聚類(lèi)圖,185份番茄材料在遺傳距離為0.25時(shí)可被劃分為4大類(lèi)群。群體遺傳結(jié)構(gòu)分析將番茄種質(zhì)資源劃分為3個(gè)類(lèi)群。以上結(jié)果表明供試材料遺傳多樣性豐富,為未來(lái)番茄育種雜交親本的選擇和新品種選育提供了理論支持。
【學(xué)位單位】:寧夏大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類(lèi)】:S641.2
【部分圖文】:

凝膠電泳,純度,濃度,番茄


量檢測(cè)??度的檢測(cè)??儀測(cè)得的番茄葉片DNA的濃度和純度,DNA樣品的0/A230比值均大于2.0,研究表明提取的DNA雜質(zhì)表3-4?10份番茄DNA樣品的濃度和純度??able3-4?The?concentrations?and?purities?of?10?DNA?samples?of?tomaA260/A280?A260/A230 ̄|?序號(hào)?濃度(ng/pL)??????No.?Concentration?1.922?一1048?6?178.601.937?2.234?7?260.001.923?2.180?8?186.211.966?2.259?9?241.21L929?2J01??10?177.74泳檢測(cè)??測(cè)(閣3-1)提取到的10份番茄葉片基因組DNA(稀只有1條清晰并且完整的帶,質(zhì)量高,能滿足SNP增反應(yīng)。??

序列,番茄,引物,全染色


代表雜合型的點(diǎn)位于水平軸和垂直軸的交叉區(qū)域》NTC分布于橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)交界區(qū)域,圖中每??個(gè)圓點(diǎn)都對(duì)應(yīng)一個(gè)供試番茄材料,每個(gè)引物均會(huì)將供試番茄材料分成三組或兩組,每組帶有不同??顏色,藍(lán)色代表該基因具有FAM標(biāo)簽序列,紅色代表該基因具有HEX標(biāo)簽序列(圖3-2)。在本??研究中所應(yīng)用的374個(gè)SNP位點(diǎn)引物中,75對(duì)無(wú)多態(tài)性,不能區(qū)分樣本的基因型,116對(duì)具有非??特異性擴(kuò)增

多態(tài)性信息含量,番茄,遺傳距離,材料


同時(shí)結(jié)合其表型可以看出,R106為紅果無(wú)限生長(zhǎng)型番茄,而R96為粉果有限生長(zhǎng),兩者??外部差異明顯。??根據(jù)計(jì)算出來(lái)的17063個(gè)遺傳距離,以0.1為組距進(jìn)行次數(shù)分布分析(圖3-4)?梢钥闯觯??185份番茄材料的遺傳距離在0.502-0.602之間最多,數(shù)量為5325個(gè),占總數(shù)的31%,遺傳距離??>?0.402的遺傳距離有14536個(gè),<?0.402的遺傳距離有2527個(gè),分別占總數(shù)的85.19%和14.81%,??由此說(shuō)明,供試材料的遺傳距離大,供試材料的差異較大,遺傳基礎(chǔ)好。??-36-??
【參考文獻(xiàn)】

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