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菠菜雄性Fosmid文庫(kù)構(gòu)建篩選及雌雄差異片段的染色體定位

發(fā)布時(shí)間:2024-11-03 11:10
  菠菜(Spinach oleracea),莧科藜亞科菠菜屬一年生或2年生草本植物,是廣泛栽培的蔬菜作物。同時(shí),菠菜也是重要的雌雄異株植物,其性別決定方式為XY型,具有一對(duì)同型的性染色體,基因組很小,約為989 Mbp,所以菠菜是研究雌雄異株植物性染色體起源與早期演化非常理想的材料。目前細(xì)胞學(xué)方面已經(jīng)證明菠菜的1號(hào)染色體為性染色體并且已經(jīng)成功得到分離。菠菜的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序也已經(jīng)完成,并且已經(jīng)成功的獲得了一些性別連鎖相關(guān)的分子標(biāo)記,但是關(guān)于菠菜的性別連鎖區(qū)域尚未見(jiàn)報(bào)道,且菠菜的性別決定分子機(jī)制以及性染色體演化分子機(jī)制尚不清楚。本研究首先構(gòu)建了菠菜雄性基因組Fosmid文庫(kù),利用文獻(xiàn)報(bào)道以及新開(kāi)發(fā)的菠菜雄性特異的分子標(biāo)記,篩選獲得Fosmid單克隆而后將其標(biāo)記探針對(duì)菠菜中期染色體分裂相進(jìn)行FISH定位。另外,本研究開(kāi)發(fā)了一些雌雄差異的片段,并進(jìn)行了測(cè)序、半定量分析以及染色體定位。研究結(jié)果如下:1.成功構(gòu)建了菠菜雄性基因組Fosmid文庫(kù),并進(jìn)行了庫(kù)容量、覆蓋率以及質(zhì)量檢測(cè);2.成功的將菠菜雄性基因組Fosmid文庫(kù)PCR篩選與熒光原位雜交技術(shù)相結(jié)合,建立了克隆菠菜雄性性別控制區(qū)的技術(shù)體系;3.成功...

【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

菠菜雄性Fosmid文庫(kù)構(gòu)建篩選及雌雄差異片段的染色體定位



圖1-1pCC2FOS載體示意圖


菠菜雄性Fosmid文庫(kù)構(gòu)建篩選及雌雄差異片段的染色體定位



圖1-2Fosmid文庫(kù)構(gòu)建技術(shù)原理圖Fig.1-2TheprinciplediagramofFosmidlibraryconstruction


菠菜雄性Fosmid文庫(kù)構(gòu)建篩選及雌雄差異片段的染色體定位



圖3-1菠菜雄葉DNA電泳檢測(cè)圖


菠菜雄性Fosmid文庫(kù)構(gòu)建篩選及雌雄差異片段的染色體定位



圖3-2Fosmid文庫(kù)質(zhì)量檢測(cè)(1)



本文編號(hào):4011175

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