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桃樹根癌病病原分離及拮抗菌篩選研究

發(fā)布時間:2025-06-09 23:37
  桃樹根癌病是一種危害嚴重的細菌性病害,防治十分困難。生物防治是目前國內(nèi)外植物病害防治的重要手段和發(fā)展方向,植物病害的生物防治要基于生防菌的分離,如何從自然界數(shù)量龐大的微生物群體中篩選到有效的生防菌株是生物防治的重要基礎(chǔ),也是評價生物防治效果的前提。本試驗首先對桃樹根癌病細菌進行了分離和鑒定,接著又從土壤中分離出一系列細菌、真菌及放線菌菌株,通過與病原細菌進行相應的平板對峙試驗,篩選出對根癌病菌有明顯拮抗作用的菌株,最后將篩選獲得的拮抗菌株在指示植株上進行了初步的病害防治試驗。主要研究結(jié)果如下:從桃樹根瘤中分離出20株具有土壤桿菌菌落特征的分離物,通過培養(yǎng)性狀、染色鏡檢觀察和16S r DNA分子鑒定初步確定了其中的A-4菌株為根癌土壤桿菌,生理生化鑒定及BIOLOG鑒定又進一步確定A-4菌株為根癌土壤桿菌生物型II型。通過分子生物學、向日葵幼苗和桃樹幼苗接種等試驗,確定A-4菌株含有Ti質(zhì)粒,具有較強致病性,可以導致向日葵和桃樹產(chǎn)生根癌。從感病植株根際土樣和健康植株根際土樣中共分離得到細菌21株、真菌9株、放線菌33株,采用瓊脂擴散法測定了它們對桃樹根癌病菌A-4菌株的抑制作用,又將這些...

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
abstract
前言
第一章 文獻綜述
    1 根癌病的發(fā)生分布及其危害
    2 根癌土壤桿菌的分類
    3 根癌土壤桿菌的生物學性狀
    4 根癌土壤桿菌的致病性及其致病過程
    5 根癌土壤桿菌致病機理的研究進展
    6 根癌病防治的研究進展
        6.1 根癌病防治的一般方法
        6.2 根癌病化學防治研究進展
        6.3 根癌病生物防治研究進展
        6.4 根癌病基因工程防治研究進展
    7.立題背景及研究意義
        7.1 立題背景
        7.2 研究的目的與意義
第二章 桃樹根癌土壤桿菌的分離、純化與鑒定
    1 材料與方法
        1.1 供試植物材料
        1.2 供試菌株
        1.3 根癌土壤桿菌的分離與純化
        1.4 根癌土壤桿菌的鑒定
            1.4.1 菌株形態(tài)特征的觀察
            1.4.2 16S r DNA鑒定
            1.4.3 Biolog鑒定
        1.5 根癌土壤桿菌致病性的測定
            1.5.1 向日葵幼苗針刺接種試驗
            1.5.2 桃樹兩年生幼苗接種試驗
            1.5.3 病原菌的PCR檢測
        1.6 根癌土壤桿菌生物型和質(zhì)粒類型的測定
            1.6.1 根癌土壤桿菌生物型的測定
            1.6.2 根癌土壤桿菌質(zhì)粒類型的測定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 桃樹根癌病病原細菌的分離與形態(tài)觀察
        2.2 桃根癌病病原細菌的 16S r DNA分子生物學鑒定
        2.3 桃根癌病病原菌A-4 菌株的BIOLOG鑒定
        2.4 桃根癌病病原菌A-4 菌株的致病性測定
            2.4.1 向日葵幼苗針刺接種試驗
            2.4.2 桃樹兩年生幼苗接種試驗
            2.4.3 病原菌的PCR檢測
        2.5 根癌土壤桿菌生物型和質(zhì)粒類型的測定
            2.5.1 根癌土壤桿菌生物型的測定
            2.5.2 根癌土壤桿菌質(zhì)粒類型的測定
    3 結(jié)論與討論
第三章 桃健康植株和感病植株根際土壤微生物群落的比較及根際土壤有益微生物的分離
    1 材料與方法
        1.1 土樣的采集
        1.2 方法
            1.2.1 桃健康植株和感病植株根際土壤微生物群落的比較
            1.2.2 土壤細菌、真菌及放線菌的分離
            1.2.3 菌種的保存
            1.2.4 土壤中不同種細菌的分類
    2 結(jié)果與分析
        2.1 桃健康植株和感病植株根際土壤微生物群落組成結(jié)構(gòu)的比較
        2.2 桃健康植株和感病植株根際土壤微生物群落多樣性的比較
        2.3 桃樹根際土壤細菌的分離
        2.4 桃樹根際土壤真菌的分離
        2.5 桃樹根際土壤放線菌的分離
    3 結(jié)論與討論
第四章 桃根癌土壤桿菌拮抗菌株的篩選
    1 材料與方法
        1.1 供試菌株
        1.2 土壤細菌拮抗根癌土壤桿菌平板抑菌能力的測定
        1.3 土壤細菌發(fā)酵濾液拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
        1.4 土壤真菌拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
        1.5 土壤放線菌拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
        1.6 土壤放線菌發(fā)酵濾液拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 土壤細菌拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
        2.2 土壤細菌的發(fā)酵濾液拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
        2.3 土壤真菌拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
        2.4 土壤放線菌拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
        2.5 土壤放線菌的發(fā)酵濾液拮抗根癌土壤桿菌能力的測定
        2.6 土壤細菌的 16S r DNA分子生物學鑒定
    3 結(jié)論與討論
第五章 拮抗菌株在溫室指示植物上的防治效果試驗
    1 材料與方法
        1.1 供試材料
            1.1.1 供試菌株
            1.1.2 供試指示植物
        1.2 接種用具
        1.3 菌株的活化
        1.4 番茄幼苗針刺接種試驗
        1.5 拮抗微生物對溫室指示苗根癌病的抗病促生作用
    2 結(jié)果與分析
        2.1 拮抗微生物對溫室指示植物根癌病的抗病作用
        2.2 拮抗微生物對溫室指示植物的促生作用
    3 結(jié)論與討論
第六章 全文總結(jié)與展望
    1 全文總結(jié)
    2 存在的問題與展望
參考文獻
附錄一
附錄二
附錄三



本文編號:4049982

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