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棕色脂肪組織脂滴和線粒體相互作用的研究

發(fā)布時間:2020-12-04 00:17
  棕色脂肪組織作為哺乳動物體內(nèi)非顫抖性產(chǎn)熱的主要器官,主要存在于人類嬰兒和其他動物體內(nèi)。近年來在成年人體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了棕色脂肪。長時間暴露在寒冷環(huán)境中,也可以誘導白色脂肪組織出現(xiàn)米色脂肪細胞,使其獲得產(chǎn)熱功能。棕色脂肪和米色脂肪細胞能夠氧化分解儲存在甘油三酯里的脂肪酸,將能量以熱量的形式釋放出來,以維持機體的正常體溫。在棕色或者米色脂肪細胞中,與產(chǎn)熱功能相關的兩個細胞器是脂滴和線粒體。脂滴是一個膜性細胞器,包含一個中性脂核心和磷脂單分子層及嵌入單分子層表面的蛋白。幾乎所有生物的細胞都含有脂滴。動物細胞的脂滴作為儲存甘油三酯的主要場所,在代謝穩(wěn)態(tài)中起著重要作用。脂滴來源的脂肪酸在線粒體中的β-氧化反應是細胞合成ATP的主要能量來源。線粒體也可以將用于合成ATP的能量以熱量的形式釋放出去,以維持動物體溫。其中,甘油三酯水解的產(chǎn)物脂肪酸需要被轉(zhuǎn)運到線粒體中進行β-氧化。因此,脂肪酸轉(zhuǎn)運效率對于產(chǎn)熱是至關重要的。而脂肪酸是親脂性分子,不易在胞漿的水相中轉(zhuǎn)運。所以,脂肪酸在脂滴和線粒體這兩個細胞器之間的直接或間接運輸機制,就是該領域的一個重要研究方向。近年來,組學研究為棕色脂肪組織中的脂滴如何應對外界... 

【文章來源】:中國科學技術(shù)大學安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】:140 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 脂滴和線粒體概述
    1.1 脂滴
        1.1.1 脂滴的起源
        1.1.2 脂滴的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 脂滴的形成及動態(tài)變化
        1.1.4 脂滴與人類健康
        1.1.5 脂滴的功能
        1.1.6 脂滴研究的意義及應用前景
    1.2 線粒體
        1.2.1 線粒體的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 線粒體的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.3 線粒體的動態(tài)變化
        1.2.4 線粒體的功能
        1.2.5 線粒體與疾病
        1.2.6 線粒體與衰老
    1.3 棕色脂肪活性調(diào)控
        1.3.1 脂肪組織的分類
        1.3.2 脂肪組織的生理功能
    1.4 脂滴和線粒體的相互作用
第二章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗常用儀器設備
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 實驗常用試劑耗材
    2.2 實驗方法
        2.2.1 小鼠棕色脂肪組織HE染色和免疫組化
        2.2.2 小鼠棕色脂肪組織電鏡樣品制備與觀察
        2.2.3 小鼠棕色脂肪組織脂滴和線粒體的純化
        2.2.4 小鼠棕色脂肪組織脂滴和線粒體電子顯微鏡樣品的制備
        2.2.5 小鼠棕色脂肪組織脂滴和線粒體的LipidTox和Hoechst染色
        2.2.6 小鼠棕色脂肪組織脂滴洗脫和胰酶保護實驗
        2.2.7 小鼠棕色脂肪組織脂滴和線粒體蛋白純度的鑒定
        2.2.8 小鼠棕色脂肪組織脂滴蛋白和線粒體蛋白的質(zhì)譜樣品制備
        2.2.9 白色脂肪前體細胞和棕色脂肪前體細胞的培養(yǎng)與分化及熒光觀察分析
        2.2.10 細胞脂滴和線粒體的純化
        2.2.11 組織或者細胞RNA的提取
        2.2.12 反轉(zhuǎn)錄PCR
        2.2.13 熒光定量PCR
第三章 棕色脂肪細胞脂滴和線粒體的緊密相互作用
    3.1 棕色脂肪組織中脂滴和線粒體的相互作用
        3.1.1 棕色脂肪組織的形態(tài)學分析
        3.1.2 不同溫度處理的小鼠棕色脂肪組織及其純化的脂滴和線粒體分析
        3.1.3 棕色脂肪組織中脂滴和線粒體的緊密相互作用
    3.2 脂滴結(jié)合的線粒體的特性
    3.3 棕色脂肪前體細胞分化刺激脂滴和線粒體的相互作用
        3.3.1 棕色脂肪前體細胞的誘導與分化
        3.3.2 棕色脂肪前體細胞中脂滴與線粒體的相互作用
    3.4 棕色脂肪前體細胞分化轉(zhuǎn)錄組學分析
    3.5 白色脂肪前體細胞分化及米色化
第四章 脂滴結(jié)合的線粒體和細胞質(zhì)中的線粒體
    4.1 脂滴結(jié)合的線粒體與細胞質(zhì)中的線粒體蛋白質(zhì)組學分析
    4.2 與脂滴相結(jié)合的線粒體的特性
    4.3 棕色脂肪組織細胞質(zhì)中的線粒體的特性
    4.4 短時間冷刺激應激
第五章 討論與展望
    5.1 脂滴和線粒體可能形成細胞器復合物
    5.2 氧化型組織中細胞器復合物提高脂肪酸的運輸效率
    5.3 細胞器復合物可能是由蛋白質(zhì)復合物介導的
    5.4 脂滴和線粒體識別及錨定的可能調(diào)控機制
參考文獻
附錄A
致謝
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本文編號:2896699

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