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藍(lán)藻細(xì)胞分裂關(guān)鍵蛋白FtsZ的性質(zhì)及其調(diào)控

發(fā)布時(shí)間:2020-12-18 06:06
  FtsZ是第一個(gè)被鑒定出來的定位在原核細(xì)胞分裂隔膜處的蛋白,是真核生物中微管蛋白的同源類似物。FtsZ非常保守,幾乎發(fā)現(xiàn)于所有的原核生物中,作為主要的細(xì)胞骨架蛋白,在細(xì)胞分裂中起著關(guān)鍵的作用。大腸桿菌(Escherichia coli)等細(xì)菌FtsZ已在體外廣泛研究。大腸桿菌的FtsZ(EcFtsZ)裝配成長度為30-50個(gè)亞基的單線狀原絲纖維,具有很高的GTP水解活性。組裝,水解和解聚的循環(huán)使得FtsZ原絲纖維在體內(nèi)和體外都具有高度動(dòng)態(tài)性。這些原絲纖維在體內(nèi)與其它十幾種輔助蛋白一起,形成了高度動(dòng)態(tài)的收縮環(huán)(Z環(huán))。收縮環(huán)是細(xì)菌細(xì)胞分裂器的主要部分,在細(xì)菌分裂的末期,收縮環(huán)收縮使細(xì)菌分為兩個(gè)細(xì)胞。藍(lán)藻是最簡單最原始的單細(xì)胞原核生物,含有葉綠素a,是可以進(jìn)行產(chǎn)氧光合作用的最古老的生物體。在形態(tài)上,藍(lán)細(xì)菌具有革蘭氏陰性細(xì)菌的外膜特征,但藍(lán)細(xì)菌中細(xì)胞分裂的調(diào)控系統(tǒng)具有與革蘭氏陽性菌相同的特異性成分,而植物葉綠體又起源于內(nèi)共生的古生藍(lán)藻,因此研究藍(lán)細(xì)菌細(xì)胞分裂系統(tǒng)與細(xì)菌和葉綠體的相似之處和差異,將為揭示細(xì)菌分裂的機(jī)理和進(jìn)化提供新的見解。在這里,我們研究了單細(xì)胞聚球藻Synechocystis ... 

【文章來源】:西北大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 細(xì)胞骨架蛋白FtsZ
        1.1.1 FtsZ亞基和原絲結(jié)構(gòu)
        1.1.2 FtsZ組裝的生化特性
        1.1.3 FtsZ在進(jìn)化上的親緣關(guān)系
    1.2 細(xì)胞分裂的關(guān)鍵細(xì)胞器——Z環(huán)
        1.2.1 Z環(huán)與細(xì)胞膜的結(jié)合
        1.2.2 分裂體的形成
        1.2.3 通過彎曲原絲產(chǎn)生收縮力的證據(jù)
    1.3 細(xì)胞分裂的負(fù)調(diào)控系統(tǒng)
        1.3.1 NO系統(tǒng)
        1.3.2 SOS系統(tǒng)
        1.3.3 Min系統(tǒng)
    1.4 本課題的研究目的及意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 培養(yǎng)基及緩沖液的配方
        2.1.4 菌株及質(zhì)粒
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 目的基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.2.2 目的蛋白的提取和純化
        2.2.3 定點(diǎn)突變
        2.2.4 蛋白性質(zhì)測定
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 藍(lán)藻FtsZ聚合的動(dòng)力學(xué)特征
        3.1.1 SyFtsZ蛋白的表達(dá)與純化
        3.1.2 藍(lán)藻FtsZ聚合的動(dòng)力學(xué)特征
        3.1.3 不同pH下緩沖液中SyFtsZ的不同組裝特性
        3.1.4 SyFtsZ的高度彎曲結(jié)構(gòu)
    3.2 SyFtsZ上影響束狀結(jié)構(gòu)形成的關(guān)鍵位點(diǎn)的研究
        3.2.1 突變體質(zhì)粒的構(gòu)建及蛋白純化
        3.2.2 pH7.5 時(shí)野生型與突變型SyFtsZ聚合動(dòng)力學(xué)的比較
        3.2.3 pH7.2 時(shí)野生型與突變型SyFtsZ聚合動(dòng)力學(xué)的比較
        3.2.4 突變體SyFtsZ-TS GTP酶活的變化
        3.2.5 EcFtsZ突變體的生化特性
    3.3 藍(lán)藻Min蛋白聚合的動(dòng)力學(xué)
        3.3.1 細(xì)菌MinCDE共聚物的組裝
        3.3.2 藍(lán)藻MinCDE共聚物的組裝
第四章 討論與總結(jié)
    4.1 藍(lán)細(xì)菌的特點(diǎn)
    4.2 比較分析藍(lán)細(xì)菌FtsZ的生化特性
    4.3 FtsZ弱的動(dòng)態(tài)活性增加穩(wěn)定性
    4.4 負(fù)調(diào)控Min系統(tǒng)蛋白的組裝特性
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果
致謝



本文編號(hào):2923499

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