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丹參SmWRKY9轉(zhuǎn)錄因子的克隆與功能研究

發(fā)布時(shí)間:2025-03-15 06:03
  丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge),為唇形科鼠尾草屬的雙子葉草本植物,是我國(guó)傳統(tǒng)中草藥之一,主要用于心腦血管疾病的治療。心腦血管疾病發(fā)病率極高,是引起人類(lèi)死亡的頭號(hào)殺手,這導(dǎo)致丹參的市場(chǎng)需求量極大。但是,野生丹參資源枯竭,人工種植的丹參產(chǎn)量下降、品質(zhì)降低,這使得丹參市場(chǎng)面臨供不應(yīng)求的尷尬境地。利用基因工程等生物技術(shù)來(lái)提高丹參中有效成分的產(chǎn)量是行之有效的方法之一。WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物界中廣泛存在,是植物界中最大的轉(zhuǎn)錄因子家族之一。因其特殊的保守結(jié)構(gòu)域WRKYGQK而得名。WRKY轉(zhuǎn)錄因子通常參與到植物的抗逆途徑。近期,有報(bào)道表明WRKYs還參與調(diào)節(jié)次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成。本研究首先采用生物信息學(xué)手段,通過(guò)分析本實(shí)驗(yàn)室的Methyl jasmonate(MJ)誘導(dǎo)丹參轉(zhuǎn)錄組庫(kù),獲得一條響應(yīng)MJ的WRKY類(lèi)基因,并克隆得到該基因ORF序列。將該序列輸入NCBI網(wǎng)站中,發(fā)現(xiàn)其與已報(bào)道的丹參SmWRKY9同源性最高(98%),故將其命名為SmWRKY9。組織表達(dá)譜結(jié)果顯示SmWRKY9在丹參的主根中表達(dá)量最高。激素誘導(dǎo)表達(dá)譜結(jié)果表明,SmWRKY9受到MJ和Yeast ext...

【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1迷迭香酸化學(xué)結(jié)構(gòu)

圖1-1迷迭香酸化學(xué)結(jié)構(gòu)

丹酚酸B、迷迭香酸、丹參素等。最新實(shí)驗(yàn)研究證明,丹記憶功能障礙、肝纖維化、肝癌、以及艾滋病等也具有香酸酸(Rosmarinicacid)是在各類(lèi)植物中廣泛存在的一種次生科和紫草科植物中含量較高(易博等,2007)。迷迭香酸示,其中鄰二酚羥基具有清除自由基活性的作用,而且強(qiáng)其效應(yīng)....


圖1-2丹酚酸B化學(xué)結(jié)構(gòu)

圖1-2丹酚酸B化學(xué)結(jié)構(gòu)

圖1-2丹酚酸B化學(xué)結(jié)構(gòu)的生物合成酸類(lèi)物質(zhì)在結(jié)構(gòu)上多屬于多聚酚酸,而多聚酚酸類(lèi)化其中丹參素(β-3,4-二羥基苯乳酸)的結(jié)構(gòu),被認(rèn)為基本化學(xué)結(jié)構(gòu)。迷迭香酸在結(jié)構(gòu)上屬于丹參素與咖迷迭香酸的二聚體,可由3分子丹參素和1分子咖啡認(rèn)為迷迭香酸可能為其他更為復(fù)雜丹酚酸類(lèi)物0....


圖IVian0I湯仁日C記B

圖IVian0I湯仁日C記B

圖1-3丹酚酸生物合成途徑(Sunetal.,2019)類(lèi)激素激素(jasmonates,JAs)主要包括茉莉酸(JA)和茉莉是一種植物體內(nèi)受外界刺激后反應(yīng)最快的激素(王methyljasmonate,MJ)首次在1962年從大花茉


圖2-1pHB-SmWRKY9-YFP載體圖

圖2-1pHB-SmWRKY9-YFP載體圖

圖2-1pHB-SmWRKY9-YFP載體圖目的片段的擴(kuò)增:建成功的18T-SmWRKY9質(zhì)粒為模版進(jìn)行高保真擴(kuò)增目的片段,擴(kuò)。pHB-YFP大片段的獲得:生工提質(zhì)粒試劑盒提取pHB-YFP質(zhì)粒,方法如下:2mL的菌液于2mL的EP管中,12000rp....



本文編號(hào):4035278

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