發(fā)布時間：2025-01-07 02:55

　　重組人生長激素(hGH)被廣泛應用于治療生長激素缺乏癥,慢性腎功能不全和特納氏綜合癥等疾病。生長激素拮抗劑(GHA)可通過阻止生長激素與其受體(GHR)的結合,治療生長激素過度分泌引起的肢端肥大癥等疾病。由于生長激素和生長激素拮抗劑的半衰期短,必須頻繁注射才能達到有效的血藥濃度。聚乙二醇(PEG)修飾和人血清白蛋白(HSA)修飾可延長hGH和GHA的半衰期,但同時會顯著降低hGH和GHA的體外生物活性。為了解決上述問題,本論文探討了使用不同鏈長的PEG定點單修飾GHA的N末端,尋找藥代動力學與藥效動力學的平衡點。在此基礎上,采用剛性苯環(huán)連接橋介導PEG形成相對致密的構象,定點單修飾hGH,考察致密構象的PEG對hGH藥代動力學和藥效學參數(shù)的影響。為了進一步提高hGH的藥效學參數(shù),本論文將PEG修飾和長鏈脂肪烷修飾技術結合起來,定點單修飾hGH。本論文分為三個部分。第一部分采用分子量為20kDa和40kDa的PEG定點單修飾GHA的N末端,得到GHA的定點單修飾產物,并探討了修飾產物的藥代動力學與藥效學間的平衡點。結果表明：PEG修飾能顯著增加GHA的流體力學體積,從而延長了藥物的血漿半衰...

【文章頁數(shù)】：157 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．５?ＨＳＡ的射線結構（左）和Ｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅ的結構圖（右）??

圖２．１生長激素和生長激素括抗劑與受體結合模型［１６１］??

?ａｎｄ?ｐｅｇｖｉｓｏｍａｎｔ?（ｒｉｇｈｔ）??本章擬采用分子量為２０?ｋＤａ和４０?ｋＤａ的ＰＥＧ酸定點修飾ＧＨＡ的Ｎ末端的??ａ－氨基，如圖２．２所示，制備分子量均一的定點修飾Ｎ末端的ＰＥＧ化ＧＨＡ。使??最終修飾產物成分單一，易于分離純化，產物收率高，預期能減少ＧＨＡ生....

圖２．８修飾產物的犯Ｓ－ＰＡＧＥ電泳圖??Ｆｉ．?２．８?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?ａｎａｌｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＰＥＧｌａｔｅｄ?ＧＨＡｓ??

＇，?圖２．７?ＧＨＡ修飾樣品的純度分析??Ｆｉｇｕｒｅ．?２．７?ＳＥＣ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＧＨＡ?ｓａｍｐｌｅｓ??２．４．２．２?ＳＤＳ－ＰＡＣＥ分析鑒定產物純度??采用犯Ｓ－ＰＡＧＥ進一步分析ＧＨＡ修飾樣品。如圖２．８所示，ＧＨＡ為單一的??電泳條帶，分子量....

圖２．９?ＧＨＡ的總離子流圖??Ｆｉｇｕｉ＊ｅ．?２．９?Ｔｈｅ?ｔｏ化?１?Ｉｏｎ?Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｇｒａｐｈｙ?ｏｆ?ＧＨＡ??

２Ａ２．３修飾位點鑒定??在進行酶解化圖分析前，將ＧＨＡ用族蛋白酶酶切，利用反相ＨＰＬＣ分離酶??解肋段，并通過電噴霧離子陷阱質譜得到ＧＨＡ樣品的總離子流圖（如圖２．９所??示），通過分析確定狀段的分子量。對解析的每個肋段參照ＧＨＡ的一級氨基酸??序列進行鑒定（表２．１）。??如....

本文編號：4024389