發(fā)布時間：2025-02-09 15:07

　　目的:1.分別構(gòu)建含有小鼠生精細胞特異啟動子Dazl、Stra8、Hspa2、Pgk2和Prm1的AAV特異表達載體,驗證并篩選有效特異啟動子。2.構(gòu)建小鼠生精細胞特異表達載體AAV-Dazl-RFP-Flag,并且從體內(nèi)、外驗證其表達特異性。方法:1.篩選小鼠生精細胞特異啟動子通過同源重組的方法分別構(gòu)建含有小鼠生精細胞特異啟動子Dazl、Stra8、Hspa2、Pgk2和Prm1的AAV特異表達載體,分別轉(zhuǎn)染生精細胞GC1細胞,通過比較5種載體在GC1細胞中的表達情況篩選有效的小鼠生精細胞特異啟動子。2.構(gòu)建小鼠生精細胞特異表達載體AAV-Dazl-RFP-Flag通過同源重組的方法將小鼠生精細胞特異啟動子Dazl片段與酶切后去除CMV啟動子的腺相關(guān)病毒載體AAV-CMV-RFP-Flag連接,并通過雙酶切和基因測序驗證小鼠生精細胞特異表達載體AAV-Dazl-RFP-Flag的構(gòu)建。3.小鼠生精細胞特異表達載體AAV-Dazl-RFP-Flag體外驗證將腺相關(guān)病毒載體AAV-CMV-RFP-Flag及小鼠生精細胞特異表達載體AAV-DazlRFP-Flag分別轉(zhuǎn)染GC1細胞和293T...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖4AAV-pgk2-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖2AAV-Stra8-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測序結(jié)果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

本文編號：4032428